利用iTRAQ技术和转录组筛选芍药属远缘杂交不亲和基因

【目的】远缘杂交育种是目前牡丹、芍药品种改良和育种的主要方法,而远缘杂交不亲和一直是制约其快速发展的主要因素。本研究从牡丹、芍药远缘杂交授粉后不亲和应答相关的柱头差异蛋白与转录组方面深入研究,揭示牡丹、芍药远缘杂交不亲和的分子机理,为杂交育种提供理论依据。【方法】以芍药‘粉玉奴’自交、芍药‘粉玉奴’与牡丹‘凤丹白’杂交为供试材料,在授粉后24 h采取柱头,分别进行同位素标记相对定量（iTRAQ）和转录组技术分析。对所获得的蛋白和转录组数据进行生物信息学分析,并对其中可能与远缘杂交不亲和相关的基因进行定量PCR验证。【结果】利用iTRAQ技术分析牡丹、芍药远缘杂交后柱头中蛋白质的表达差异,共鉴定到685个差异蛋白,富集到了188条通路,其中显著富集的Pathway有18条。与不亲和授粉相关代谢通路有RNA降解、钙信号途径、丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase signaling pathway,MAPK）信号途径、磷脂酰肌醇信号系统。在RNA降解代谢通路中,烯醇酶（Enolase）、热休克蛋白DnaK（HSP70）及病菌抗原（GroEL）均表达下调。在钙信号途径中,钙调蛋白（CALM）表达下调,腺苷酸转运酶（adenine nucleotide translocase,ANT）表达量增加,表达上调。MAPK信号途径中,乙二醛酶Ⅰ（GloI）表达下调。磷脂酰肌醇信号系统中的钙调蛋白（CALM）表达下调。随机选取与差异蛋白相关的6个基因进行qRT-PCR验证,结果显示,6个基因的表达与蛋白质水平趋势相一致,均表达下调。通过转录组测序,共获得了52 998个有注释信息的Unigene,占所有Unigene的40.37%。基于6组样品的RPKM（Reads Per Kilobase per Million）值,共筛选到16 224个差异基因。其中上调基因13 361,下调基因2 863个。对差异基因进行Pathway显著富集分析,杂交与自交相比,不亲和差异表达的基因主要富集在氧化磷酸化代谢、ABC转运蛋白、次级代谢产物等通路。与远缘杂交不亲和相关且发生显著变化的基因有CalS-5、CalS-12（胼胝质酶）和SPL（squamosa promoter binding protein-like）表达上调,ABCF（ABC transporter family protein）表达下调。【结论】在转录组和蛋白数据共注释到6个蛋白、4个基因与植物不亲和性密切相关,这些蛋白与基因可能在远缘杂交不亲和方面发挥着重要作用。     

3个秋菊品种瓶插过程中花瓣生理生化指标的变化

以东海的月、春日剑山、国华强大3个秋菊品种为材料,利用瓶插液2%蔗糖+200mg·L^-18-HQ作为处理组(T),以蒸馏水为对照组(CK),研究其在瓶插过程中花瓣可溶性糖、抗氧化酶活性等生理生化指标的变化。结果表明,东海的月、国华强大的可溶性糖含量均呈下降趋势,处理组高于对照组;可溶性蛋白质含量前期增加,后期下降,处理组含量较高;超氧化物歧化酶(superoxidedismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性变化趋势相似,瓶插初期下降,之后有所回升,衰老末期再次下降;过氧化物酶(peroxidase,POD)活性随瓶插时间延长而上升,处理组高于对照组。秋菊瓶插期间可溶性糖、蛋白质含量的下降,以及抗氧化酶活性的降低可能是导致菊花瓶插中花瓣衰老的原因,本研究为秋菊瓶插观赏应用提供了理论依据。     

园林专业英语中的汉译英技巧

从中英文的语言表达差异和文化差异入手,归纳了园林专业文章的翻译技巧,包括词汇的分类、选择,句子成分的分析,重点词汇含义的分析,结构的重建。总结为4句话"有取就有舍,离析又组合。去表揪深意,重新建骨骼。"     

茶用菊品种金丝皇菊对盐胁迫的响应

通过盐胁迫下茶用菊的抗性机制分析,为茶用菊在盐渍化土地上的生产提供理论参考。以金丝皇菊为供试材料,进行4种浓度NaCl溶液处理,对叶绿素荧光、抗氧化酶活性以及脂肪酸含量等相关指标进行测定,并探讨脂肪酸去饱和酶关键基因的表达状况。结果表明:盐胁迫下,随着处理时间的增加,最大光化学效率(Fv/Fm)逐渐降低,非光化学猝灭系数(NPQ)不断升高。不同盐浓度处理下叶绿素含量变化具有差异性。不同盐浓度处理下超氧化物歧化酶(SOD)活性变化具有差异性,在所有处理组中变化不规律。各处理组中过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量以及脯氨酸含量逐渐增加,可溶性糖含量先增加后减少,50、200 mmol/L处理组中可溶性蛋白含量先增加后减少,100 mmol/L处理组中可溶性蛋白含量不断减少。与清水对照组相比,金丝皇菊的不饱和脂肪酸含量在50、100 mmol/L处理组中逐渐增加,在200 mmol/L处理组中先上升后下降。在50、100 mmol/L处理组中,CmSAD、CmFAD2和CmFAD7的表达量与不饱和脂肪酸含量变化基本一致,均呈现先上升后下降的趋势,然而,在200 mmol/L处理组中,与不饱和脂肪酸含量变化相比,基因的表达量变化则呈现出一定的滞后性。综上,低浓度盐胁迫下金丝皇菊通过提高膜脂不饱和脂肪酸含量,增加热耗散以及提高抗氧化酶活性等响应机制来保护光合系统免受破坏,从而增强细胞膜体系的稳定性,缓解盐胁迫伤害。     

逐渐干旱对牡丹实生苗某些生理指标的影响

以牡丹实生苗凤丹为试材,研究了逐渐干旱对牡丹实生苗叶绿素含量、光合特性、过氧化氢酶(CAT)活性等生理指标的变化.结果显示:随着干旱胁迫的加剧,牡丹实生苗叶绿素含量呈先升后降趋势.轻度干旱时叶绿素含量达到最大值,比干旱胁迫前上升18.6%;重度干旱时达到最小值,比干旱胁迫前下降了51.2%.净光合速率、胞间CO<,2>...     

郑州多肉植物产业现状分析

为促进多肉植物产业发展,从多肉植物的销售、生产、应用等方面介绍了郑州多肉植物产业发展的历程与现状,并对各花卉市场、花店进行调查统计,郑州市区共有63个店铺销售多肉植物,多肉植物涉及16科,71属,636个种或品种,其货源一部分来自郑州郊区,一部分来自福建。总结了传统多肉植物基地的生产经验,并对郑州多肉植物产业的健康发展提出可实施的建议。     

菊花去饱和酶CmSAD基因的克隆与表达分析

以秋菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)抗寒品种‘星光灿烂’为材料,利用RT-PCR和RACE方法从叶片中克隆△9硬脂酰-ACP去饱和酶(Stearoyl-ACP desaturase,SAD)基因,命名为CmSAD,Gen Bank登录号为KC529335。该基因cDNA全长1 203 bp,编码401个氨基酸,相对分子质量为45.57 k D,等电点为6.48,编码的氨基酸序列与新疆雪莲同源性最高(80.29%)。通过对该蛋白进行生物信息学分析得出其没有跨膜结构,主要存在于叶绿体基质中,N端含有一段包含60个氨基酸的叶绿体转运肽。通过实时荧光定量PCR研究低温胁迫下叶片和根系中CmSAD基因的表达量变化,该基因在叶片和根系中均有表达。根系中CmSAD基因的表达量随着温度的降低而降低,16℃时表达量最高;叶片中CmSAD表达量随着温度的降低先升高再降低,5℃时最高。随着温度的降低,菊花叶片和根系中CmSAD基因的表达情况表现出一定的差异。CmSAD基因的表达变化与温度有关,为低温胁迫下菊花脂肪酸代谢的分子机理研究提供了基础。     

黑壳楠染色体核型分析及基因组Survey预测

【目的】明确黑壳楠(Lindera megaphylla)染色体形态结构特征和基因组基本信息。【方法】以野生黑壳楠为材料，采用荧光原位杂交法，对染色体进行核型分析，并通过基因组survey预测了黑壳楠基因组的基本信息。【结果】黑壳楠染色体数目为2n=24,核型公式为2n=2X=24=18m(2SAT)+6sm, 9号染色体存在1对随体，属于2B型染色体。染色体组绝对长度变异范围为2.92～5.83,相对长度的变化范围为5.33%～11.11%,核型不对称系数为59.49%。研究还发现，存在1对5S rDNA杂交位点和1对18S rDNA杂交位点，分别位于5号和9号染色体。18S rDNA杂交位点2个杂交信号位置相同、强度近似。基因组survey结果显示，黑壳楠基因大小为1.38 Gb,杂合率为0.8%,重复序列比例为70%。【结论】黑壳楠为2倍体，染色体数目为24条，核型相对对称。黑壳楠在樟科的进化中属于较为原始的物种，且染色体未发生重组、变异或者种内杂交等现象。黑壳楠为大基因组，杂合率较高，重复序列多的物种。