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1.
目的应用基因芯片研究三氧化二砷(As2O3)处理前后K562细胞基因表达的变化.方法提取As2O3处理前后K562细胞的总RNA,纯化为mRNA后再反转录为cDNA.cDNA经限制性内切酶Sau3AI切割后,cDNA片段分别用Cy3和Cy5标记,与自制的包含348个基因片段的胎盘库芯片杂交.结果杂交结果经扫描和软件分析,发现了11个差异表达的基因片段,其中有3个基因片段与细胞凋亡密切相关.结论我们构建的胎盘库基因芯片可以成功地用于研究药物作用前后基因表达的变化. 相似文献
2.
3.
Poly-L-Lysine玻片在寡核苷酸芯片制备中的改进 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 为了制得适合固定未修饰寡核苷酸的芯片,提高检测灵敏性,对Patrick Brown实验室的多聚左旋赖氨酸包被玻片的方法进行改进。方法 玻片经清洗后用缩水甘油-丙氧基三甲氧基硅烷进行硅烷化,然后应用Poly-L-Lysine在玻片表面形成聚合物涂层,经次亚苯基二异硫氰酸盐表面活化后可使寡核苷酸共价连接在芯片表面。设计了各种实验考察方法改进前后芯片表面的性能,并将改进后的玻片初步应用于SARS冠状病毒寡核苷酸芯片检测中。结果 方法改进后芯片表面性能优良:固定效率高、点的同一性好、杂交效率和热稳定性好、寡核苷酸结合牢固、芯片可以重复利用。结论 利用共价连接,方法改进后的芯片表面适合固定未修饰的寡核苷酸,解决了寡核苷酸与玻片之间物理结合不稳定、易剥离的缺陷,提高了芯片检测的灵敏性。 相似文献
4.
目的本文利用离体结合在体实验探讨心肌营养素-1(CT-1)在高血压心室重塑中的作用。方法离体实验用160 mm Hg的高静水压刺激原代培养的心肌成纤维细胞,同时用心肌营养素-1的反义寡核苷酸进行干预。分别用MTT法检测心肌成纤维细胞的增殖,放免法检测血管紧张素Ⅱ的浓度,Western blotting检测CT-1蛋白的表达。以L-NAME诱导的一氧化氮缺乏性高血压大鼠作为在体实验模型。用卡托普利进行干预。12周后处死动物,取材观察心肌组织病理变化,检测心肌中血管紧张素Ⅱ及羟脯氨酸的浓度,同时检测心肌中CT-1的表达。结果高静水压能明显促使心肌成纤维细胞增殖,血管紧张素Ⅱ分泌增加,CT-1合成上调(光密度值1.56±0.24 vs 0.95±0.19,P<0.01),而CT-1的反义寡核苷酸能抑制高静水压诱导的细胞增殖和血管紧张素Ⅱ分泌。而进行在体实验的大鼠给予L-NAME后血压明显升高,心肌组织中血管紧张素Ⅱ和羟脯氨酸分泌增加,CT-1表达上调(光密度值1.79±0.21vs 1.02±0.12,P<0.01),经卡托普利干预后,与L-NAME组相比,血压明显下降,心肌组织中羟脯氨酸浓度降低,血管紧张素Ⅱ分泌减少,CT-1表达下调(1.12±0.15 vs 1.79±0.21,P<0.05)。结论从在体和离体实验证明CT-1在高血压心室重塑中发挥着重要的调节作用,且这一作用与肾素血管紧张素系统有关。 相似文献
6.
7.
8.
目的:探讨氧化型—低密度脂蛋白(ox—LDL)对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)培养液中内源性一氧化氮合酶抑制剂一不对称二甲精氨酸(ADMA)的影响及尼莫地平的干预作用。方法:采用改良的Jaffe法原代培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),取3-6代HUVECs用于实验。用Cu^ 引发脂质过氧化过程,制备氧化型低密度脂蛋白。按实验要求加入不同浓度的ox—LDL和尼莫地平,与内皮细胞共同孵育(37℃,5%CO^2)24h后,收集细胞及培养液。高效液相色谱法(HPLC)测定ADMA、L—arg的浓度。流式细胞仪测定细胞内Ca^ 含量,同时测定培养液NO、ET含量。结果:与空白对照组比较,ox—LDL使HUVECs产生ADMA的量呈浓度依赖性增加,ET及细胞内Ca^ 量显著升高;而合成NO的量减少。尼莫地乎能显著减少ox—LDL诱导的ADMA增加,增加N0的合成,同时细胞内Ca^ 含量及CT降低,而合成N0的底物L-arg无明显变化。结论:ox—LDL增加内源性NOS抑制剂—ADMA的产生,导致内皮细胞的功能障碍。尼莫地平能减少ox—LDL诱导的ADMA增加,从而减轻ox—LDL诱导的内皮细胞代谢功能障碍。 相似文献
9.
消痛酊渗透治疗混合型颈椎病63例 总被引:1,自引:0,他引:1
1996年4月~1997年10月采用自制消痛酊渗透治疗混合型颈椎病取得了较好的疗效,报告如下。1一般资料全部病例均系住院病人,入院前经X线及CT检查确诊,诊断标准按《颈椎病》一书(北京:人民卫生出版社)制定的标准。共观察123例患者,随机分为治疗组6... 相似文献
10.
生物化学是基础医学教育中的教学难点学科。本文联系继续医学教育进修学习中生物化学课程的教学实践,在如何帮助专升本学生学好该课程上进行了一些初步探讨,以期提高教学效果,更好地让学生学得有趣,得轻松。 相似文献