补肾活血方通过调节PI3K/Akt/mTOR信号通路改善DOR大鼠卵巢储备功能

目的 观察补肾活血方调节磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路相关因子改善卵巢储备功能下降（DOR）大鼠卵巢储备功能的作用机制。方法 运用Ataya法腹腔注射环磷酰胺复制60只DOR模型大鼠，将其随机分为模型组、戊酸雌二醇组（0.000 9 g·kg^-1），补肾活血方高、中、低剂量组（33，16.5，8.25 g·kg^-1），同时另设正常组，每组12只；各组相应药物治疗，正常组和模型组给予等体积生理盐水，连续灌胃14 d，每天1次。治疗结束后，苏木素-伊红（HE）染色卵巢组织，光镜观察初级卵泡数、成熟卵泡数、总卵泡数的变化；免疫组化检测卵巢组织中血管内皮生长因子（VEGF）的表达，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测卵巢组织中PI3K，Akt，mTOR，半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）法检测卵巢组织中PI3K，Akt，mTOR mRNA表达。结果 与正常组比较，模型组卵巢组织中成熟卵泡数量、总卵泡数量明显减少（P<0.05，P<0.01），卵巢组织中VEGF，Caspase-3表达升高（P<0.05），PI3K，Akt，mTOR蛋白及mRNA表达水平降低（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，补肾活血方中、高剂量组成熟卵泡数量、总卵泡数量均有不同程度上升（P<0.05，P<0.01），VEGF补肾活血方中剂量组升高最为明显（P<0.05），补肾活血方低、中、高剂量组及戊酸雌二醇组Caspase-3下降，补肾活血方中、高剂量组PI3K，Akt，mTOR蛋白及mRNA表达水平均升高（P<0.05，P<0.01），且补肾活血方中剂量组更加接近于正常组。结论 补肾活血方可以有效地改善DOR大鼠卵巢储备功能，促进卵泡数量增加。作用机制可能与补肾活血方通过增加卵巢组织中VEGF的表达有关，进而激活PI3K/Akt/mTOR信号通路，从而调节Caspase-3的含量，最后促进卵泡数量的增加。     

金香丹抑制NLRP3/IL-1β/Caspase-1信号通路缓解大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的 观察金香丹预处理对心肌缺血再灌注损伤（MIRI）大鼠模型心肌组织NOD样受体热蛋白结构域3（NLRP3）/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1（Caspase-1）/白细胞介素-1β（IL-1β）信号通路的影响,探讨金香丹对MIRI的保护作用及其机制。方法 50只雄性SD大鼠随机分成假手术组,模型组,金香丹高、低剂量组及地奥心血康组,每组10只。造模前7 d开始,金香丹组给予金香丹片高、低剂量（0.72,0.18 g·kg^-1）灌胃;假手术组和模型组每天给予等体积生理盐水灌胃;地奥心血康组给予地奥心血康（1.29 g·kg^-1）灌胃。末次灌胃12 h后,结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注60 min的方法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。心电图检测ST段升高评价模型;比色法检测心脏组织肌酸激酶（CK）和乳酸脱氢酶（LDH）水平,苏木素-伊红（HE）染色观察心肌组织损伤情况,DNA断裂的原位末端标记（TUNEL）法检测心肌细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测心肌组织NLRP3,Caspase-1和IL-1β蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测心肌组织中NLRP3,Caspase-1和IL-1β mRNA的表达。结果 与假手术组比较,模型组心电图ST段显著升高（P<0.01）,心肌组织CK和LDH活性显著增加（P<0.01）,心肌组织凋亡细胞显著增加（P<0.01）,NLRP3,IL-1β,Caspase-1蛋白和mRNA表达显著升高（P<0.01）;与模型组比较,金香丹高、低剂量组及地奥心血康组心电图ST明显降低（P<0.05,P<0.01）,心肌组织CK和LDH活性明显降低（P<0.05,P<0.01）,心肌细胞凋亡明显改善（P<0.05,P<0.01）,降低NLRP3,IL-1β,Caspase-1蛋白和mRNA表达水平（P<0.05,P<0.01）;与地奥心血康组比较,金香丹低剂量组心电图ST段明显升高（P<0.05）,金香丹高剂量组明显降低（P<0.05）,金香丹高、低剂量组和地奥心血康组心肌组织绿色荧光强度明显降低（P<0.05,P<0.01）,金香丹高剂量NLRP3,IL-1β,Caspase-1蛋白和mRNA表达均明显降低（P<0.05）。结论 金香丹可以降低心肌缺血再灌注损伤,其可能机制为抑制炎症小体NLRP3,降低IL-1β表达,抑制心肌细胞凋亡,缓解心肌缺血再灌注损伤。     

基于络病理论浅析从“温阳通络”治疗阴茎硬结症

阴茎硬结症是一种临床上较为少见的男性疾病,因其起病隐秘,病症复杂,病程缠绵且容易复发,同时伴阴茎疼痛、勃起障碍等症状,对男性正常的工作生活造成较大影响。现代医学对于阴茎硬结症尚无有效治疗手段,作者通过长期临床观察,认为阴茎硬结症属于中医络病范畴,以络病学说“易滞易瘀”的病理特点为基础,将“阳虚络瘀”视作阴茎硬结症的基本病机,运用“温阳通络”法治疗阴茎硬结症验案多例,疗效颇著。     

周安方教授学术思想及临床经验简介

介绍全国名老中医周安方教授学术思想及临床经验,周师全面界定了中医学的学科属性和研究内容,发展创新了中医学的学术理论:如新解"肾主发育"、扩大"治病求本"的学术内涵、首倡"肝司生殖"和"肝实肾虚"的学术观点。他在临床工作中,主张辨病与辨证相结合,善于运用对药治疗疾病,用药配伍精当,注重阴中求阳、阳中求阴,血中求气、气中求血。     

明胶-白芨胶/丹参多孔材料的理化性质研究

目的评价明胶-白芨胶/丹参多孔材料作为组织工程皮肤支架的理化性质。方法以明胶和白芨胶为基质材料,复合丹参提取液制备多孔材料。参照ISO10993-1标准,观察材料性状、吸水性和体外降解性,并采用急性毒性试验、热原试验和溶血试验,评价材料的理化性质。结果实验材料具有较好的韧性、吸水性及可降解性。材料浸提液注入小鼠腹腔未引起急性毒性反应,注入家兔耳缘静脉内未引起发热反应,材料浸提液溶血率为2.59%,符合规定。结论明胶-白芨胶/丹参多孔材料具有良好的理化性质,具备成为组织工程皮肤支架的条件。     

基于GR/ERK/CX43研究母代肾精亏虚诱发子代原发性睾丸生精功能减弱的宫内编程机制

目的 明确母代肾精亏虚导致子代原发性睾丸生精功能减弱的宫内编程机制。方法 制备孕鼠24只,数字随机法均分为空白组,模型组,补肾组;除空白组以外,余下各组孕期采用慢性应激复制母鼠肾精亏虚模型。酶联免疫吸附法(ELISA)法检测母鼠血清甲状腺素(T4)、糖皮质激素(GC)、胎产数评估母鼠模型。从孕0天开始,补肾组给予左归丸灌胃填补肾精;孕期20天时,比较母鼠一般情况及体重变化,雄性胎鼠睾丸体质比,ELISA法检测其血清T4、GC、促卵泡生长激素(FSH)含量,并通过苏木素-伊红染色评估睾丸生殖细胞发育状况,免疫荧光双染检测胎鼠睾丸缝隙连接蛋白43(Cx43)、SYR-盒包含蛋白9(Sox9)表达,实时荧光定量聚合酶链式反应检测胎鼠睾丸细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、Cx43基因表达,蛋白免疫印迹法检测胎盘组织GR、胎鼠睾丸ERK1/2、Cx43、促卵泡生长激素受体(FSHR)蛋白表达。结果 与空白组母鼠比较,模型组母鼠,产后体重减轻、胎产数减少、血清T4含量降低、血清GC含量升高(P<0.01);与模型组母鼠比较,补肾组母鼠,产后体重增加、胎产数增加、血清T4含量升高、GC降低、...     

清肺利咽方用于肺系病证的药理研究

清肺利咽方是用于临床治疗病毒、细菌引起的咽炎、扁桃体炎、支气管炎及肺炎等病症的中药复方.由金银花、川贝、连翘、鱼腥草、苏叶、桑白皮等组成,功效为清热解毒,化痰止咳.笔者在临床疗效观察基础上,对该方抗炎、祛痰、止咳等作用进行药理学实验研究,探讨其作用机理,以期更好地指导临床运用. 1材料与方法     

沉默Cx43基因对左归丸促MC3T3-E1细胞分化作用的影响

目的:研究沉默Cx43基因对左归丸含药血清促MC3T3-E1细胞分化作用的影响。方法:采用慢病毒介导的RNA干扰技术沉默Cx43基因,将培养细胞分为正常对照A组、含药血清B组、基因沉默C组。细胞培养第3、5、7、9天进行ALP活性测定、第21天矿化结节茜素红染色,进行组间对比。结果:左归丸含药血清可以促进MC3T3-E1细胞的分化,与A组比较:ALP活性增强,其中第5、7、9天差异显著(P0.05);茜素红染色面积增加(P0.01)。C组与B组比较:ALP活性降低,其中第7、9天差异显著(P0.05);茜素红染色面积明显减少(P0.05)。结论:沉默细胞Cx43基因导致左归丸含药血清促MC3T3-E1细胞分化作用明显下降。     

火麻仁油藻油混合物安全性实验研究

目的评价火麻仁油藻油混合物安全性。方法采用KM小鼠和SD大鼠为实验动物,分别进行急性毒性试验、遗传毒性试验以及30d喂养试验。结果急性毒性试验中,样品组与阴性对照组比较,自发活动、反应速度、精神状况、组织器官等均无异常(P0.05);遗传毒性试验中,小鼠骨髓嗜多染红细胞微核含量测定,样品各剂量组与阴性对照组比较,差异无显著性(P0.05);小鼠精子畸形试验中,样品各剂量组与阴性对照组比较无显著性差异(P0.05);30d喂养试验中,各剂量组大鼠体重增重、进食量及食物利用率与对照组比较无显著性差异(P0.05),血生化指标和血常规指标与对照组比较无显著性差异(P0.05)。结论在此次的实验中,未发现火麻仁油藻油有毒性作用,为无毒物。     

光照异常对小鼠妊娠及仔鼠发育影响的初步观察

为探讨异常光照对小鼠妊娠期及其子代的影响.将妊娠期昆明小鼠分为正常光照组(7:00-19:00光照,19:00-次日7:00黑暗)、持续光照组(持续24 h光照)、持续黑暗组(持续24 h黑暗)、反向光照组(7:00-19:00黑暗,19:00-次日7:00光照),观察孕鼠整个孕期(至自然产仔)日常情况,在第0、6、12、18天时的体重增长情况以及各组仔鼠出生体重及身长比较.除正常光照组外,各组小鼠均出现不同程度的饮食量减少,精神萎靡,部分小鼠还出现情绪烦躁,易怒现象;持续光照组出现2只孕鼠早产,各组无死胎、畸形胎情况;在第12、18天时,持续光照组体重低于正常光照组(P＜0.05),持续黑暗组在第12天时低于正常光照组(P＜0.05);持续光照、持续黑暗、反向光照组仔鼠体重低于正常光照组(P＜0.01或P＜0.05),持续光照组仔鼠身长小于正常光照组(P＜0.05).提示异常光照周期和时间可影响小鼠妊娠及其子代生长发育.