截断逆挽方对慢加急性肝衰竭大鼠肝细胞进入S期关键蛋白的影响

目的:观察截断逆挽方对慢加急性肝衰竭(ACLF)大鼠肝脏细胞进入S期关键蛋白的影响。方法:将150只Wistar大鼠随机分成3组,正常组(NC)、模型组(MC)及截断逆挽方组(JD)。采用人血清白蛋白联合D-氨基半乳糖和脂多糖急性攻击制作ACLF模型。JD组大鼠在急性攻击24 h后连续灌胃,在第5、10、15天平行取材。运用HE染色法观察大鼠肝脏组织结构,Western blot法检测转录因子E2F1的表达量,RT-PCR检测CyclinA、E和Cdc25 mRNA表达量。结果:与模型组相比,JD组大鼠E2F1的表达量明显增高,并在第10天时差异最为显著(P<0.05),CyclinA、E、Cdc25表达量均有不同程度升高;与正常组相比,JD组大鼠10 d、15 d时CyclinA mRNA表达量差异显著,JD组大鼠在10 d、15 d时Cdc25和CyclinE mRNA表达量均差异显著(P<0.05)。结论:截断逆挽方可以通过调节E2F1介导的细胞再生信号通路上的关键蛋白E2F1、CyclinA、CyclinE、Cdc25的表达,从而促使细胞进入S期,加快DNA复制进程,提高肝细胞的增殖率,发挥治疗ACLF的作用。     

四唑化合物开环反应、晶体结构及相关抗微生物作用研究

目的 为了解决日益严重的耐药性问题,合成得到了四唑开环化合物3。方法 5-氨基四唑1和4-乙酰氨基苯磺酰氯2在碳酸钾存在下反应得到四唑开环化合物3,并采用倍比稀释法和棋盘法测试了化合物的抗微生物活性及与临床药物的联用效果,最后使用紫外-可见光谱法测试了化合物与小牛胸腺DNA的相互作用。结果 X-射线单晶衍射证实5-氨基四唑断键开环生成叠氮化物3含有一个结晶水分子,属于P-1空间群,晶胞参数a = 7.5554(5) Å,b = 8.8163(4) Å,c = 11.0516(7) Å,a = 75.463(5) °,b = 89.813(5) °,g = 69.166(6) °。化合物通过氧原子、氮原子和氢原子形成氢键,进而形成三维超分子结构。化合物的抗细菌和抗真菌活性,结果表明所合成化合物的对所测试的细菌和真菌显示了较弱到中等(MIC = 64~256 mg·mL^-1)的抑制活性。化合物与临床药物联用后,明显增强了抗微生物能力,显示较好的协同作用效果。化合物3与小牛胸腺DNA相互作用的紫外吸收光谱显示,化合物可能通过嵌入DNA形成复合物,从而发挥抗微生物作用。结论 化合物3可作为潜在的临床抗微生物候选药物。     

加速康复外科减少胃癌患者术后重症监护病房住院时间的临床观察

目的 观察加速康复外科(ERAS)缩短胃癌患者术后重症监护病房(ICU)住院时间的安全性与有效性。 方法 回顾性分析2017年1月至6月在南京大学医学院附属金陵医院行胃癌D2根治术患者80例。根据围手术期是否采用加速康复外科理念分为ERAS组和传统组,两组各40例。比较两组患者在术后ICU病房停留时间、术后住院天数(ICU住院天数加上普通病房住院天数)、术后首次通气时间、术后首次下床时间、术后第1天视觉模拟评分(VAS)以及术后并发症发生率。 结果 ERAS组胃癌患者术后重症监护病房住院时间明显短于传统组［(0.65±0.53)d vs(1.93±1.59)d, Z=4.938, P<0.001］;ERAS组术后住院时间也明显短于传统组［(6.23±4.67)d vs(8.55±4.51)d, Z=4.529, P<0.001］;ERAS组术后首次通气时间、术后首次下床时间短于传统组［(38.73±6.81)h vs(59.90±12.71)h, t=8.848, P<0.001］、［(14.63±3.98)h vs(23.68±4.51 )h, t=9.519, P<0.001］;另外ERAS组术后第1天VAS评分低于传统组［(2.33±0.73)vs(4.33±0.76), t=11.970, P<0.001］,两组术后并发症发生率差异并无统计学意义,分别为12.5% vs 22.5%(χ2=1.385, P=0.378)。 结论 加速康复外科缩短了胃癌术后重症监护病房住院时间,减少了手术应激,并没有增加术后并发症发生率,节省了医疗资源。     

术前KLIC评分对清创、假体保留联合抗生素治疗急性假体周围感染效果的预测价值

目的 探讨KLIC（kidney, liver, index surgery, cemented prosthesis and C reactive protein value）评分系统用于预测清创、假体保留联合抗生素方案（DAIR）治疗急性假体周围感染（PJI）结果的准确性。方法 回顾性研究。纳入2015年1月—2020年12月南京大学医学院附属金陵医院骨科急性PJI患者44例,其中男17例、女27例,年龄21~86岁,均行DAIR。结合病史和检验结果,计算患者术前KLIC评分,并按评分结果将患者分为KLIC评分≤2分组、2.5~3.5分组、4~5分组、5.5~6.5分组和≥7分组。比较各组患者基线资料、住院时间和DAIR治疗结果的差异。采用受试者操作特征曲线（ROC）来评价KLIC评分系统预测DAIR治疗结果的准确性;以DAIR失败作为终点事件,采用Kaplan-Meier绘制累积治疗成功率曲线。结果 5组患者年龄、性别、体质量指数（BMI）、病变部位、感染分类、感染症状持续时间、术后住院时间等基线资料比较,差异均无统计学意义（P值均>0.05）。5组患者总体治疗成功率为61.36%（27/44）、失败率为38.64%（17/44）;KLIC评分≤2、2~3.5、4~5、5.5~6.5分和≥7分5组的失败率分别为0/8、2/8、5/13、6/10、4/5,组间比较差异有统计学意义（P=0.018）;趋势χ²检验结果提示,随着KLIC评分的增加,DAIR失败率也随之增加,差异有统计学意义（χ²=10.86,P=0.001）。ROC曲线显示KLIC评分在预测DAIR治疗结果上具有较高的准确性（AUC=0.876,95%可信区间0.773~0.978,P<0.001）。Kaplan-Meier曲线提示：KLIC评分≥7分的患者累积治疗成功率低于KLIC评分<7分者,差异有统计学意义（χ²=8.95,P=0.003）。结论 KLIC评分对于DAIR治疗结果具有良好的预测性;对于KLIC评分≥7分的急性PJI患者,DAIR治疗的失败率较高,不建议采用。     

鼠抗人B7-H4单克隆抗体的制备及初步鉴定

目的制备鼠抗人B7-H4单克隆抗体,并对其生物学特性进行初步鉴定。方法用稳定表达B7-H4分子的L929/B7-H4转基因细胞免疫6-8周龄的Balb/c小鼠。取脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合后,采用流式细胞术筛选阳性克隆,制备稳定分泌抗B7-H4单克隆抗体的细胞株,并用Western blot和Dot blot鉴定其生物学特性。细胞计数试剂盒8(CCK-8)测定T细胞增殖情况。结果成功获得1株稳定分泌抗人B7-H4单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为5C8。Western blot和Dot blot结果表明,5C8能与人B7-H4蛋白特异性结合。CCK-8实验显示,5C8可以阻断B7-H4分子对T细胞增殖的抑制作用。结论成功获得鼠抗人B7-H4单克隆抗体,为研究B7-H4分子在肿瘤中的作用提供了手段。     

人B7-H4基因转染细胞株的构建及其对T细胞的作用

目的克隆人B7-H4基因,构建人B7-H4基因转染细胞株并初步研究其对T细胞的作用。方法通过RT-PCR的方法获得人B7-H4分子的基因,将目的片段双酶切(EcoRⅠ和BamHⅠ)后与pIRES2-EGFP真核表达载体连接,构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-B7-H4并进行鉴定;脂质体转染法将重组载体导入L929细胞,经G418加压筛选并通过流式细胞术和RT-PCR检测表达载体是否转入L929细胞中,通过检测活化T细胞上CD25,CD69的表达及T细胞增殖实验对B7-H4转基因细胞的生物学功能进行初步研究。结果从外周血活化单核细胞中扩增出目的基因,构建重组表达载体pIRES2-EGFP-B7-H4并将其转染至L929细胞,构建了一株稳定表达人B7-H4分子的基因转染细胞株,对其生物学功能的研究显示B7-H4分子可以下调活化T细胞上CD25,CD69的表达,并且对T细胞的活化增殖起到抑制作用(P<0.05)。结论成功构建了稳定表达B7-H4分子的基因转染细胞株,为进一步研制B7-H4分子的单克隆抗体提供了有效的免疫原。     

BTLA与HVEM顺式复合物对细胞表面BTLA分子检测的影响

目的探讨BTLA-HVEM顺式复合物的存在对细胞表面BTLA分子检测的影响。方法T细胞和U937细胞存在BTLA和HVEM共表达的现象。采用流式细胞术的方法，用抗不同人BTLA位点的商品化单抗MIH26和该室研制的单抗8H9分别检测U937和T细胞等细胞表面BTLA分子的表达水平。293T／BTLA基因转染细胞上BTLA分子的检测采用8H9单抗。结果商品化单抗MIH26（0．5μg）检NT细胞和U937细胞上BTLA分子的表达量均为90％以上，而8H9单抗（1μg）检测到二者的表达量分别为42．2％、30．8％。采用0．02μg和0．05μg的8H9单抗检测293T／BTLA转基因细胞株，显示BTLA分子的表达量分别为80％和91．4％。结论T细胞和U937细胞上共表达的BTLA和HVEM形成顺式复合物，影响8H9对BTLA的检测，而不影响MIH26的检测。     

日本化妆品和医药部外品管理简介

日本是除我国之外目前世界上对化妆品保留注册许可制的为数不多的国家之一 ,在化妆品和化妆品原料的监管方面有丰富的经验 ,作者详细介绍了日本对化妆品、医药部外品和化妆品新原料的监督管理 ,对我国化妆品监管政策的制定有一定的借鉴意义。     

8例赠卵体外受精-胚胎移植的治疗及护理

卵子赠送治疗是一项新的辅助生育技术,是治疗卵巢功能低下、衰竭或高龄缺乏卵子而不能妊娠的最有效的方法.通过接受供卵者的卵子与丈夫的精子进行体外受精-胚胎移植,而使之受孕的过程.自1998年11月～2000年12月,我院生殖中心采用该方法为8例患者治疗,获5例临床妊娠,其妊娠率为62.5%.针对该项治疗的特殊性,护士应事先熟悉供者和受者在不同阶段的治疗、用药,提供相应的护理措施及适当的心理护理是提高卵子赠送治疗成功率的关键.建立严格的医患联系制度.定期随访,收到满意的效果.