切换波长HPLC同时测定左金丸乙醇提取物中7种生物碱的含量

目的:建立同时测定左金丸乙醇提取物中表小檗碱、盐酸药根碱、黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱含量的液相色谱法.方法:采用Kromasil C18(4.6mm×250mm,5μm)柱,以乙腈-0.1％磷酸和0.05％三乙胺水溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长0～40 min为265 nm,40～55 min为225 nm.结果:表小檗碱、盐酸药根碱、黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱的线性范围分别是0.2759～17.66,0.2670 ～ 17.09,0.2625～16.80,0.2214～14.17,0.9487 ～ 60.71,0.0504 ～ 3.229,0.0449 ～2.874 mg·L-1,平均回收率分别为100.4％,99.8％,100.2％,100.0％,99.0％,98.9％,97.4％,RSD分别为1.8％,1.2％,2.1％,2.1％,2.0％,2.0％,2.2％.结论:本法简便、准确,可同时测定左金丸乙醇提取物中表小檗碱、盐酸药根碱、黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量,为左金丸的现代制剂研究和质量控制提供方法学参考.     

应激性胃溃疡发病机制与中医药治疗的研究进展

应激是机体遭受强烈刺激后所产生的瞬间生物学反应,致使机体内稳态破坏并出现细胞代谢障碍和损伤。应激性胃溃疡主要是指在应激状态下(包括各种创伤、危重病、休克等)发生的一种以炎性糜烂、浅表溃疡及出血为特征的急性胃黏膜病变。尽管目前应激性胃溃疡的发生机制尚不完全明确,但学术界普遍认为这是机体对各种应激性刺激的非特异性防御反应,受到整体因素如神经-内分     

基于磷酸二酯酶抑制活性的清金化痰汤抗炎活性评价方法建立

目的 基于磷酸二酯酶（PDE）抑制活性,建立清金化痰汤抗炎活性测定方法,补充与完善该经典名方的质量控制体系。方法 采用高效液相色谱法（HPLC）建立PDE活性测定方法,考察清金化痰汤抑制PDE活性的量效关系,流动相甲醇-0.5%乙酸水溶液（5∶95）,检测波长254 nm。通过测定多批清金化痰汤水提物冻干粉对PDE的抑制率,以中和酶的活性国际单位U标示其生物活性。结果 选择4 U·mL^-1 PDE溶液,在反应底物环磷酸腺苷（cAMP）浓度为50 μmol·L^-1、反应时间为60 min时,酶促反应稳定。在此反应体系下,当清金化痰汤水提物冻干粉终质量浓度为0.11~3.0 g·L^-1时,其对PDE的抑制作用呈现浓度依赖性。确定清金化痰汤水提物冻干粉待检质量浓度1 g·L^-1,在该质量浓度下对PDE呈显著且稳定抑制作用,抑制率>45%,即1 mg的清金化痰汤水提物冻干粉至少可中和1.8 U PDE的活性。结论 建立了基于PDE抑制活性的清金化痰汤生物活性评价方法,以PDE活性国际单位U表征了清金化痰汤的抗炎活性,可为中药复方生物活性测定研究提供新方法。     

枸杞咀嚼片免疫调节及抗氧化活性分析

目的 探究枸杞咀嚼片对正常小鼠固有免疫和适应性免疫调节作用及其体内外的抗氧化活性。方法 采用碳廓清实验、免疫器官指数实验、血清溶血素实验、刀豆蛋白A（ConA）诱导脾淋巴细胞增殖实验及小鼠自然杀伤细胞（NK细胞）活性实验,观察枸杞咀嚼片低、中、高剂量组（0.25、0.5、1.5 g·kg^-1）对正常小鼠免疫功能的影响。通过检测小鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和丙二醛（MDA）水平判断枸杞咀嚼片对体内抗氧化能力的影响。以2,2''-联氨-双（3-乙基苯井噻唑啉-6-磺酸）二胺盐（ABTS）自由基、2,2-二苯基-1-苦基肼（DPPH）自由基和羟基自由基清除实验,检测枸杞咀嚼片的体外抗氧化活性。结果 与空白组比较,枸杞咀嚼片低、中、高剂量组均可明显提高小鼠NK细胞活性、脾淋巴细胞增殖能力和小鼠血清溶血素抗体水平（P<0.05）;高剂量组可明显增加小鼠胸腺指数、脾脏指数和巨噬细胞吞噬功能（P<0.05,P<0.01）。与空白组比较,枸杞咀嚼片中剂量组小鼠血清中GSH-Px活力明显升高（P<0.05）,高剂量组小鼠血清中MDA含量明显降低（P<0.05）。体外抗氧化实验中,枸杞咀嚼片在质量浓度为44.9 g·L^-1时,对ABTS及羟基自由基的清除率可达到100%,质量浓度为8.7 g·L^-1时对DPPH自由基清除率达到了95.24%±0.02%,说明枸杞咀嚼片具有良好的体外抗氧化效果。结论 枸杞咀嚼片具有增强小鼠免疫功能的作用,且具有良好的抗氧化效果。     

多模态超声在脑死亡器官捐献移植肝术后监测中的应用

  目的   联合应用二维灰阶超声、CDFI（彩色多普勒血流成像）、PW（频谱多普勒）及CEUS（超声造影）对脑死亡器官捐献肝移植术后实现灰阶、血流、微灌注等检查,探讨多模态超声在肝移植术后监测中的应用价值。  方法   选取2018年1月至2021年12月昆明市第一人民医院脑死亡器官捐献（donors after brain death,DBD）移植肝患者57例,所有患者肝移植术后均进行常规超声实时、动态连续监测,对移植肝血管显示困难、血流充盈差、可疑狭窄或血栓、移植肝内或肝周出现不能确定的异常病变进一步行CEUS检查,分析超声检查对移植肝术后各种并发症的诊断,检查结果与其他影像学检查、临床、病理、实验室检查进行对照。  结果   多模态超声提示有血管并发症者7例,其中肝动脉狭窄2例（3.5%）,门静脉血栓2例（3.5%）,下腔静脉血栓1例（1.2%）,下腔静脉狭窄2例（3.5%）;胆道并发症4例（7.0 %）:其中胆道狭窄3例（5.2%）,胆汁瘤1例（1.2%）,均经临床证实;一般常见并发症:胸腹腔积液57例（100%）,肝内及肝周血肿31例（54.3%）。多模态超声漏诊肝动脉假性动脉瘤1例（1.2%）。  结论  多模态超声检查作为肝移植术后的首选检查方法,能较准确的诊断肝移植术后并发症。     

左金丸总生物碱对束缚水浸应激性胃溃疡模型大鼠神经体液调节的影响

目的左金丸是黄连和吴茱萸按6∶1配伍组成,临床常用于胃溃疡的治疗。该文主要探讨左金丸总生物碱(ZJP-TA)对束缚水浸应激性胃溃疡模型大鼠神经体液调节的影响。方法采用束缚水浸法复制大鼠胃溃疡模型,测定ZJP-TA对大鼠胃溃疡指数,胃黏膜TNF-α含量的影响。测定大鼠海马、皮质、下丘脑、纹状体等脑区中单胺类神经递质5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)及其代谢产物5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量以及肾上腺组织中NE和肾上腺素(E)含量的影响。结果预先口服ZJPTA可明显降低应激性胃溃疡大鼠的溃疡指数,明显降低胃黏膜中TNF-α的含量。各剂量ZJPTA可不同程度降低大鼠脑组织单胺类神经递质的浓度,与模型组比较差异具有显著性(P<0.05或P<0.01)。模型组肾上腺组织NE和E含量明显升高,ZJPTA能明显抑制其升高(P<0.05或P<0.01)。结论 ZJPTA可通过神经体液调节作用,对抗应激性胃溃疡损伤。     

多模态超声监测DBD移植肾的临床应用

目的 评估多模态超声在DBD移植肾功能及术后并发症监测中的价值.方法 选取昆明医科大学附属甘美医院2019年7月至2021年6月脑死亡器官捐献移植肾(DBD)67例,运用多模态超声对移植肾进行评估.以血肌酐将移植肾分为功能正常组和异常组,异常组以穿刺病理分为急性排斥组、慢性排斥组,病毒性肾病组,纤维化组、药物损伤组.采...     

基于巨噬细胞吞噬及分泌功能的清金化痰汤生物限值测定

目的 建立基于小鼠巨噬细胞RAW264.7吞噬及分泌功能的清金化痰汤水提物冻干粉生物限值测定方法，从生物活性层面对清金化痰汤进行质量控制。方法 建立巨噬细胞RAW264.7吞噬模型和炎症模型，以清金化痰汤水提物冻干粉对巨噬细胞RAW264.7吞噬指数和白细胞介素-6（IL-6）分泌量的抑制率为指标，考察清金化痰汤水提物冻干粉的生物活性，并寻找生物限值。结果 巨噬细胞优选接种密度为3×10⁵个/mL，药物作用时间24 h，脂多糖（LPS）质量浓度1 mg·L^-1；当清金化痰汤水提物冻干粉质量浓度为500 mg·L^-1时，对RAW264.7巨噬细胞既无毒性也无明显促增殖作用，在此浓度下，对RAW264.7巨噬细胞吞噬中性红有明显促进作用，吞噬指数均>113%，且对LPS诱导RAW264.7巨噬细胞分泌IL-6呈现出显著且稳定的抑制作用，抑制率>45%。结论 结合清金化痰汤抗炎及免疫调节的药理活性，建立了基于RAW264.7巨噬细胞吞噬及分泌功能的生物限值评价方法，在设定的实验条件下，确定500 mg·L^-1为限值浓度，在该限值浓度下，清金化痰汤水提物对巨噬细胞的吞噬指数有明显的促进作用或对LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞IL-6的分泌量有明显抑制作用，均可判断为质量合格。     

剪切波弹性成像在供肝评估中的临床应用

目的探讨剪切波弹性成像(SWE)结合常规超声对供肝质量评估的临床应用价值。 方法2014年2月至2017年10月昆明医科大学附属甘美医院实施公民逝世后器官捐献肝移植共121例,供肝获取前所有供者均行常规超声及SWE检查。根据术中快速病理检查结果将供者分为正常组和异常组,异常组包括脂肪肝、肝淤血、肝纤维化和肝坏死。采用成组t检验分别比较异常组、脂肪肝组、肝纤维化组与正常组供肝杨氏模量值。绘制受试者工作特征曲线,以约登指数最高时的杨氏模量值作为区分正常和异常供肝的截断值,计算相应敏感度和特异度。 结果根据术中快速病理检查结果,121例供者分为正常组73例,异常组48例;异常组包括脂肪肝组21例、肝淤血组18例、肝纤维化组5例和肝坏死组4例。异常组和正常组供肝杨氏模量值分别为(5.55±1.56)kPa和(3.64±0.70)kPa,差异有统计学意义(t＝7.964,P<0.05)。截断值＝4.07 kPa时,约登指数最高＝0.628,SWE诊断供肝病变的敏感度为83.3%,特异度为79.5%。脂肪肝组和肝纤维化组供肝杨氏模量值分别为(5.56±1.43)和(6.67±1.36)kPa,均高于正常组,差异均有统计学意义(t＝5.974和4.933,P均<0.05)。肝淤血组和肝坏死组杨氏模量值分别为2.46～7.11 kPa和5.62～9.11 kPa。 结论SWE可以定量评估肝组织硬度,对异常和正常肝脏的鉴别具有较高特异度。SWE结合常规超声检查可以对供肝质量进行无创、定量评估,具有较高的临床应用价值。