基于微流控核酸等温扩增的 登革病毒现场快速检测技术研究

[摘要]?目的?结合环介导等温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification, LAMP）和微流控芯片技术，建立一种适合现场快速检测登革病毒的方法。方法?利用RT-LAMP，针对登革病毒基因组中3’非编码区中特异性序列进行扩增，建立基于微流控芯片技术的LAMP检测方法，优化检测体系，并对该方法的灵敏性和特异性进行评估。结果?基于LAMP 和微流控芯片技术的登革病毒检测方法，通过对病毒模板进行扩增，发现与其他病毒无交叉反应，特异性良好；同时，结果显示该方法对登革病毒检测灵敏性可达61.2 pg/μl，与实时荧光定量PCR仪所达到的检测灵敏性一致。结论?基于LAMP和微流控芯片技术的登革病毒检测方法具有操作简单、快速、对设备要求低等优势,并且灵敏性、特异性均较好，是一种便于开展现场快速检测的方法。     

“厚薄”教学理念在病理教学中的应用研究

病理学理论课教学是灌输病理学基础知识的基本手段,是医学教育的关键组成部分,普遍应用LBL教学模式。如何让传统病理学理论教学模式从被动灌输方式转化为主动学习的过程,充分调动教学双方的内在动机,拓展学生的思维能力,这是病理学理论教学研究的重要内容。文章尝试"把书读厚及把书读薄"的教学思想有效应用到病理学教学中,通过引入"思维导图"优化相关教学内容;结合双师型培训机制,灵活做到将病理学"教薄教厚";积极创建网络互动平台,提升学生的动手操作能力,实现把病理学"学薄学厚"。     

基于《新入职护士培训大纲(试行)》的“2+1”专科护士培养模式探索

目的探索构建适合我国国情的专科护士培养模式。方法在文献回顾的基础上采用半结构化专家访谈法和德尔菲法,通过预试验修改并形成专家咨询问卷,向21名专家进行两轮咨询,最终形成专科护士培养模式指标。结果两轮问卷的专家建议率依次为90.5%和95.2%。专家熟悉系数、判断系数和权威系数分别为0.81、0.95和0.88。专家对5个一级指标、18个二级指标和118个三级指标达成一致性意见。结论专科护士培养模式涉及专科护士培养目标、培养制度、培养过程、培养考核、培养保障5方面,专家积极系数和权威程度较高,意见较为集中,函询结果可靠,现实指导性较强,为专科护士培养的规范化、系统化建设提供理论依据。     

2018年至2019年浙江省绍兴市新确证人类免疫缺陷病毒1型感染者的分子传播网络特征分析

目的分析浙江省绍兴市新确证人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)感染者传播关系的分子网络特征,为疫情流行趋势和防治提供依据。方法纳入2018年8月至2019年12月绍兴市新确证未经抗病毒治疗的423份HIV-1感染/艾滋病病例血液样本,获得375份样本序列,采用反转录聚合酶链反应和巢式聚合酶链反应扩增HIV-1的pol基因,采用MEGA 6.0软件构建系统进化树分析亚型,并采用HyPhy软件和Cytoscape 3.7.2。生成不同基因距离的分子网络,通过美国斯坦福大学HIV耐药数据库在线软件工具分析耐药突变位点。结果375份样本序列中发现8种亚型,优势亚型为流行重组型(circulating recombinant form,CRF)07BC 215份(57.33%),CRF01AE 103份(27.47%),其他包括CRF08BC、CRF85BC、CRF5501B、B、C和CRF01AE/B亚型。在基因距离为1.50%时,共形成24个分子簇,194条序列入网,入网率为51.73%。在分子簇最多的0.75%基因距离时,共形成30个分子簇,129条序列入网,入网率为34.40%,35例以老年人为主的病例聚集成CL1簇。42份样本存在监测性耐药突变(surveillance drug resistance mutation,SDRM),耐药传播率为11.20%(42/375),其中非核苷类反转录酶抑制剂耐药突变38例,分别为K103N(32/375,8.53%)、K103S(4/375,1.07%)、Y188L(1/375,0.27%)和G190A(1/375,0.27%),蛋白酶抑制剂耐药突变4例,分别为M46I(3/375,0.80%)和V82A(1/375,0.27%)。分子簇C2序列携带高比例耐药突变(94.29%,33/35)。结论绍兴市HIV-1亚型丰富多样,CRF07BC亚型传播迅速;在0.75%基因距离仍聚集的CL1簇老年病例亟待干预,防止该耐药毒株的进一步快速传播。     

鄱阳湖区实施"麋鹿回家计划"对血吸虫病传播影响的调查

目的　了解放归鄱阳湖区的麋鹿血吸虫感染情况,评价“麋鹿放归野外自然繁衍生长计划”（“麋鹿回家计划”）对鄱阳湖区血吸虫病传播的影响。方法　采用GPS项圈定位、人工跟踪观察等方法,于2018年4月-2019年12月调查放归鄱阳湖区麋鹿的种群分布、栖息活动和自然增殖等情况,采用塑料杯顶管孵化法检测麋鹿栖息地动物野粪血吸虫感染情况,采取系统抽样法对麋鹿栖息地草洲进行钉螺分布调查。结果　2018年,共有51头麋鹿放归鄱阳湖区,形成了银宝湖、龙口、南池湖、莲子湖和珠湖等5个麋鹿栖息地,栖息环境主要为鄱阳湖区草洲、圩内农田和山丘林地等。对银宝湖麋鹿栖息地调查显示,至2019年该地麋鹿自然增殖率为25.0%,平均钉螺密度为0.009 ~ 0.039只/0.1 m2,未发现血吸虫感染性钉螺;麋鹿和牛粪平均密度分别为4.6份/hm2和2.1份/hm2,血吸虫阳性率分别为4.35%和13.16%（P ＝ 0.236）,感染强度分别为“+++”和“+”。结论　放归鄱阳湖区的麋鹿可感染血吸虫,并可通过粪便对草洲污染而引起血吸虫病传播扩散。应积极探索麋鹿放归湖区后对当地血吸虫病传播的影响和应对策略,确保鄱阳湖区消除血吸虫病目标的实现和“麋鹿回家计划”的顺利实施。     

酒精性肝硬化与乙型肝炎肝硬化中医体质的差异性分析

目的:通过观察酒精性肝硬化及乙型肝炎肝硬化患者体质量表得分情况,比较两者体质特征的差异性。方法:分析酒精性肝硬化患者110例及乙型肝炎肝硬化患者100例体质分布特征。结果:酒精性肝硬化出现频率较高的中医体质为湿热体质及血瘀体质;乙型肝炎肝硬化出现频率较高的中医体质为痰湿体质、气郁体质及气虚体质,两者体质量表得分比较,差异具有显著性意义。结论:酒精性肝硬化及乙型肝炎肝硬化患者具有不同的体质特征,酒精性肝硬化体质特征为"湿热"、"瘀血";乙型肝炎肝硬化体质特征是"痰湿"、"气郁"、"气虚"。     

肝组织活检诊断为药物性肝损伤的肝功能异常患者临床特征分析

 目的 分析179例肝组织活检诊断药物性肝损伤的肝功能异常患者临床特征。方法 回顾性分析2010-01至2015-01解放军总医院第五医学中心收治的符合条件的诊断为肝功能异常且可排除甲乙丙戊型病毒性肝炎、EB病毒及CMV病毒性感染、自身免疫性肝病、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝病,以及遗传代谢性肝病导致的肝损伤病例179例。依据肝组织活检病理结果将病例分为急性/亚急性组和慢性组,分析两组间临床特征及病理表现差异。结果 在发病类型方面,急性/亚急性肝损伤以青年为主(64.3%),而对于慢性肝损伤以老年为主(53.7%),差异具有统计学意义(P＜0.05)。临床症状表现中,乏力、肝区不适、发热、皮肤瘙痒方面,两组之间相比差异无统计学意义;而急性/亚急性组中纳差(50.0% vs 30.9%)和尿黄(58.9% vs 35.0%)症状较慢性组更明显(P＜0.05)。肝功能生化检测指标方面,急性/亚急性组在ALT、AST、TBIL、DBIL方面明显高于慢性组,有统计学差异(P＜0.01),但两组在ALP、GGT、ANA的分布比例无统计学差异。急性/亚急性组与慢性组药物性肝损伤的病理表现不同,两组在胆汁淤积病理表现方面没有差异,而急性/亚急性组多见于混合型病理表现,慢性组多见肝细胞损伤病理表现。结论 老年人易发生慢性药物性肝损伤,并且多以肝细胞损伤病理表现为主,对于病因不明的反复肝功能异常老年患者,应警惕慢性药物性肝损伤的可能。     

急性ST段抬高型心肌梗死合并MVD患者入院后两周内干预非罪犯血管对预后的影响

目的 探讨急性ST段抬高型心肌梗死(ST segment elevation myocardial infarction,STEMI)合并多支冠状动脉血管病变(multi-vessel coronary artery disease,MVD)患者入院后两周内接受非罪犯血管经皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI)对预后的影响。方法 回顾性分析2019年1月~2020年12月徐州医科大学附属医院心内科监护病房收治的242例STEMI合并MVD患者。根据不同血运重建策略将研究对象分为仅处理罪犯血管的对照组(n=184)及在对照组的措施基础上,于入院两周内处理非罪犯血管的试验组(n=58)。比较两组患者术后主要不良心血管事件(major adverse cardiac events,MACE)及安全性终点的差异。结果 经过平均17.7±8.5个月的随访,试验组术后无MACE存活率显著高于仅处理罪犯血管的对照组,差异有统计学意义(P=0.027);对照组患者的MACE发生率(19.6% vs 6.9%,P=0.024)、全因死亡率(16.3% vs 5.2%,P=0.031)明显高于试验组,差异有统计学意义;两组患者的顽固性心绞痛(15.8% vs 10.3%,P=0.307)、出血事件(2.2% vs 0,P=0.258)、缺血或出血性脑卒中(1.1% vs 1.7%,P=0.702)、造影剂肾病(3.8% vs 3.4%,P=0.901)发生率比较,差异均无统计学意义。结论 在STEMI合并MVD的患者中,入院后两周内行非罪犯血管PCI使患者预后更好。     

急性脑梗死不同中医证型患者血栓常规的变化及其意义

目的探讨急性脑梗死(ACI)不同中医证型患者血栓常规的变化及其意义。方法对256例ACI患者进行中医辨证分型,以及血栓常规[包括凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fib)、D-二聚体、血管性血友病因子(v WF)和抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)]检测。对不同中医证型亚组之间的血栓常规结果及与正常对照组进行比较。结果本组ACI患者分为风火上炎证53例、风痰瘀阻证68例、痰热腑实证44例、气虚血瘀证47例和阴虚风动证44例。与正常对照组比较,各型亚组的APTT、ATⅢ水平明显降低,血Fib、D-二聚体、v WF水平明显升高(P0.05~0.01),PT、TT的差异无统计学意义(均P0.05);各型亚组之间PT、APTT和TT的差异无统计学意义。风痰瘀阻证亚组的血D-二聚体和v WF水平明显高于其他4亚组(P0.05~0.01);风痰瘀阻证亚组的血Fib水平明显高于、血ATⅢ水平明显低于风火上炎证、气虚血瘀证和阴虚风动证亚组(P0.05~0.01),但与痰热腑实证亚组的血Fib、ATⅢ水平无统计学差异(均P0.05)。结论 ACI风痰瘀阻证型患者的血D-二聚体和v WF水平升高最明显,其可作为ACI风痰瘀阻证分型的参考指标。     

结核性脑膜炎42例的临床护理

我院2006—07／2008—07共收治结脑患者42例，现将护理情况总结如下。