基于微流控核酸等温扩增的 登革病毒现场快速检测技术研究

[摘要]?目的?结合环介导等温扩增技术（loop-mediated isothermal amplification, LAMP）和微流控芯片技术，建立一种适合现场快速检测登革病毒的方法。方法?利用RT-LAMP，针对登革病毒基因组中3’非编码区中特异性序列进行扩增，建立基于微流控芯片技术的LAMP检测方法，优化检测体系，并对该方法的灵敏性和特异性进行评估。结果?基于LAMP 和微流控芯片技术的登革病毒检测方法，通过对病毒模板进行扩增，发现与其他病毒无交叉反应，特异性良好；同时，结果显示该方法对登革病毒检测灵敏性可达61.2 pg/μl，与实时荧光定量PCR仪所达到的检测灵敏性一致。结论?基于LAMP和微流控芯片技术的登革病毒检测方法具有操作简单、快速、对设备要求低等优势,并且灵敏性、特异性均较好，是一种便于开展现场快速检测的方法。     

肝病合并细菌感染者PCT的变化特点分析

[摘要]?目的?探讨肝病合并细菌感染者降钙素原（procalcitonin, PCT）的变化特点，并评估PCT与WBC、中性粒细胞百分比、CRP及感染病原菌类型的关系，为患者临床早期合理应用抗生素提供依据。方法?选取2019年9月—2020年8月解放军总医院第五医学中心收治的1315例肝病患者作为研究对象，其中1153例继发细菌感染，根据PCT升高程度将其分为轻度升高组（0.5 ng/ml＜PCT≤2 ng/ml）、中度升高组（2 ng/ml＜PCT＜10 ng/ml）和重度升高组（PCT≥10 ng/ml）；162例未继发细菌感染且PCT正常，将其作为对照组。评估PCT在肝病合并细菌感染者中的变化特点，同时分析PCT与WBC、中性粒细胞百分比、CRP及感染病原菌类型的关系。结果?肝病合并细菌感染者中，PCT升高占87.68%（1153/1315），WBC升高占41.98%（552/1315），中性粒细胞百分比升高占71.86%（945/1315），CRP升高占43.95%（578/1315），细菌培养阳性占20.23%（266/1315）。PCT重度升高组肝功能Child-Pugh分级C级患者占41.9%（31/74），明显高于中度升高组、轻度升高组和对照组（P均＜0.05）。PCT重度升高组、中度升高组的感染性休克和死亡患者分别占28.4%、19.6%和10.8%、9.8%，均明显高于轻度升高组和对照组（P均＜0.05）。PCT重度升高组、中度升高组的WBC、中性粒细胞百分比以及CRP水平均明显高于PCT轻度升高组及对照组（P均＜0.05）。革兰阳性菌感染者平均PCT值为（8.96±19.12）ng/ml，革兰阴性菌感染者平均PCT值为（5.77±10.44）ng/ml，均高于细菌培养阴性肝病患者的（4.12±8.64）ng/ml（P均＜0.05）。结论?肝病合并细菌感染者PCT较WBC、中性粒细胞百分比、CRP及细菌培养更敏感，可通过其浓度水平判断出患者的病情严重程度。