遗传性长QT综合征HERG基因真核表达载体的构建和在HEK293细胞中的表达

目的构建HERG基因的真核表达载体，并在人胚胎肾细胞（HEK293）中进行表达。方法先将pGH19-HERG通过限制性酶SacⅠ和EcoR Ⅰ酶切得到HERG cDNA，将pIRES2-EGFP用SacⅠ和EcoRⅠ进行双酶切，把HERGcDNA定向克隆到pIRES2-EGFP中，即构建了HERG基因的真核表达载体pIRES2-EGFP—HERG。然后利用电穿孔法将pIRES2-EGFP-HERG转染HEK293细胞。结果在卵母细胞异源表达载体pGH19-HERG基础上，获得了真核表达载体pIRES2-EGFP—HERG，并在HEK293细胞中成功进行了表达。结论在HERG基因卵母细胞异源表达载体的基础上，构建了HERG基因的真核表达载体piRES2-EGFP-HERG，利用电穿孔法将其转染至HEK293细胞中并成功地进行了表达，为下一步进行膜片钳的研究奠定基础。     

Identification of a new lamin A/C mutation in a chinese family affected with atrioventricular block as the prominent phenotype

Even though mutations in LMNA have been reported in patients with typical dilated cardio-myopathy(DCM)and atrioventricular block(AVB)previously,the purpose of this study was to disclose this novel genetic abnormality in one Chinese family with the atypical phenotype of progressive AVB followed by DCM with normal QRS interval.Genome-wide linkage analysis mapped the AVB gene in this family to a marker at chromosome 1q21.2,where the LMNA gene was located.Direct DNA sequence analysis revealed a heterozygous G t...     

氯沙坦通过室旁核抑制慢性心衰大鼠肾交感神经兴奋性

目的：研究慢性心衰时室旁核微量注射氯沙坦对心率、血压和肾交感神经的作用,揭示心衰下丘脑室旁核对肾交感神经活性的调节机制。方法：用SD大鼠制作心衰模型,超声心动图检测心功能变化。脑立体定位仪对大鼠室旁核定位,微量注射氯沙坦（50nL）,观察心率、血压和肾交感神经活性的变化。结果：超声心动图显示手术组较假手术组左室内径增加（P〈0．01）,射血分数降低（P〈0．01）,左室内径缩短率降低（P〈0．05）。注射氯沙坦后,手术组和假手术组的肾交感神经兴奋性降低,手术组较假手术组降低更为明显。结论：心衰时室旁核内注射氯沙坦可降低肾交感神经兴奋性。     

牙周疾病的预防措施及护理对策

目的探讨引起牙周疾病的病因,提出相对应的预防措施,并完善护理措施。方法对2010年5月至2012年5月期间,我院收治的97例牙周疾病患者进行病因的分析和研究。结果本组共有97例牙周疾病患者,年龄12-75岁,平均年龄53岁,其中男性患者58例,女性患者39例。由牙齿局部因素导致患病的有69例,年龄12～59岁;由全身因素导致患病的有28例,年龄27-70岁。讨论针对导致牙周疾病的不同病因,制定合理可行的预防措施,并要加强对牙周疾病患者的护理,可在很大程度上减少牙周疾病的发生、发展。     

实验性大鼠急性心肌缺血血浆蛋白C和D-二聚体检测的研究

目的探讨垂体后叶素致急性心肌缺血的实验性大鼠血浆蛋白C和D-二聚体水平的变化和意义。方法50只大鼠随机分成正常对照组和实验模型组，腹腔注射垂体后叶素建立急性心肌缺血模型，观察注射垂体后叶素后心电图ST段变化以及血浆蛋白C活性和D-二聚体浓度生化指标。结果实验组血浆D-二聚体水平明显高于正常对照组（P〈0．01），而血浆蛋白C活性检测与正常对照组没有明显差别（P〉0．05）。结论血浆蛋白C不是垂体后叶素致实验性大鼠急性心肌缺血的主要因素，而D-二聚体增高参与了垂体后叶素致大鼠急性心肌缺血的过程。     

α-2b干扰素抑制实验性动脉粥样硬化机制

目的 :阐明α 2b干扰素 (IFNα 2b)抑制动脉粥样硬化 (AS)的体内机制。方法 :随机将 18只家兔分为空白对照 (NC)组、AS组和IFN治疗 (IFN)组 ,复制AS模型 ,于第 1、3、5、7周用酶法测血清总胆固醇、三酰甘油。 7周后主动脉苏丹Ⅳ染色测AS斑块面积 /总面积 ,苏木精 伊红染色观察主动脉形态学改变。用免疫组化法测胸主动脉中的增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达 ,用原位杂交法测血小板生长因子 β(PDGF β)的表达程度。 结果 :主动脉粥样硬化斑块面积NC组和IFN组低于AS组 (P <0 .0 5 ) ,NC组与AS组差异无显著性意义。PDGF β的表达NC组和IFN组低于AS组 (P <0 .0 5 )。结论 :PDGF β可能是促使血管平滑肌细胞 (VSMC)增生、AS进展的主要原因。IFNα 2b通过下调PDGF βmRNA抑制VSMC的增生 ,可能是其抑制AS形成及发展的重要机制之一。     

氯沙坦通过室旁核抑制慢性心衰大鼠肾交感神经兴奋性

目的：研究慢性心衰时室旁核微量注射氯沙坦对心率、血压和肾交感神经的作用,揭示心衰下丘脑室旁核对肾交感神经活性的调节机制。方法：用SD大鼠制作心衰模型,超声心动图检测心功能变化。脑立体定位仪对大鼠室旁核定位,微量注射氯沙坦（50nL）,观察心率、血压和肾交感神经活性的变化。结果：超声心动图显示手术组较假手术组左室内径增加（P〈0．01）,射血分数降低（P〈0．01）,左室内径缩短率降低（P〈0．05）。注射氯沙坦后,手术组和假手术组的肾交感神经兴奋性降低,手术组较假手术组降低更为明显。结论：心衰时室旁核内注射氯沙坦可降低肾交感神经兴奋性。     

下丘脑室旁核小电导钙激活钾通道过表达降低慢性心衰大鼠肾交感神经兴奋性

 目的：研究下丘脑室旁核小电导钙激活钾通道亚型2（SK2）过表达对慢性心衰大鼠心率、血压和肾交感神经活性的影响,揭示心衰大鼠下丘脑室旁核对交感系统的调节机制。方法：构建SK2重组腺病毒穿梭载体pDC316-mCMV-EGFP-rKCNN2。采用SD大鼠,手术组用左冠状动脉前降支结扎术制作慢性心衰模型,假手术组大鼠左冠状动脉前降支下穿线但不结扎,术后6周用超声心动图测定心功能。心衰组和假手术组分别在室旁核微量注射 SK2 腺病毒pDC316-mCMV-EGFP-rKCNN2和对照腺病毒pDC316-mCMV-EGFP,7 d后通过超声心动图检测心功能的改变;运用免疫组织化学、RT-PCR和Western blotting方法检测SK2重组腺病毒转染情况及表达。室旁核微量注射SK通道阻滞剂apamin,通过PowerLab 8/30系统采集信号记录心率、血压和肾交感神经活性的变化。结果: 心衰大鼠SK2表达较假手术组减少,下丘脑室旁核微量注射SK2腺病毒导致心衰大鼠肾交感神经兴奋性明显降低,下丘脑室旁核微量注射对照腺病毒对假手术大鼠交感神经兴奋性的改变不明显。结论：SK通道蛋白在心衰状态下表达降低并可能导致其功能减弱,进而促成由SK2通道介导的中枢负性交感调节通路的降低,增加了交感神经兴奋性,从而加重心衰的发展。SK2过表达减弱了心衰大鼠的肾交感神经活性,为治疗心衰提供了新的方向。     

胺碘酮对缺血性心肌病心力衰竭患者肿瘤坏死因子-α的影响

目的探讨胺碘酮对缺血性心肌病心力衰竭患者血清肿瘤坏死因子α(TNFα)及外周血单核细胞(PBMC)分泌TNFα的影响。方法缺血性心肌病心力衰竭患者41例随机分为对照组和胺碘酮治疗组,用放射免疫法测定治疗前后各组患者血清TNFα浓度;取患者静脉血并分离PBMC,分别加入胺碘酮和脂多糖等,使胺碘酮终浓度分别为0、0.1、1、10μmol/L进行培养,经24h孵化后取上清液,用放射免疫法测定培养上清液TNFα含量。结果在体外胺碘酮对缺血性心肌病心力衰竭患者PBMC分泌TNFα有抑制作用,并呈剂量依赖性;胺碘酮治疗后心力衰竭患者血清TNFα升高(P<0.05)。结论胺碘酮可使缺血性心肌病心力衰竭患者血清TNFα升高;在体外,胺碘酮能抑制心力衰竭患者PBMC分泌TNFα,这种作用可能与胺碘酮治疗心力衰竭的有益作用无关。