基因芯片快速HLA-DR52组分型

目的 用基因芯片对HLA-DR52组快速分型。方法 根据中国汉族人群常见的HLA-DRB位点及其基因多态性的独特序列，设计特异性的寡核苷酸分型探针，制成寡核苷酸芯片。通过组间特异引物扩增基因组DNA，扩增中用荧光标记，扩增标记后的产物与芯片的探针杂交，通过杂交产生的荧光信号确定样品的基因亚型。83份样本分别用基因分型芯片和序列特异性引物聚合酶链反应技术(PCR-SSP)对HLA-DR52组分型。结果PCR-SSP分型DR52组57个位点中，经芯片分型有2个无DR52组位点，3个PCR-SSP分型为DR52组纯合子，芯片为DR52组杂合子，1个PCR-SSP分型为非DR52组纯合子，芯片分型为含有1个DR52组位点的杂合子。结论 基因芯片能对HLA-DR52组快速、准确的分型，比PCR-SSP能更多的检出DR52组位点，特别是能将纯合子进一步分型，适合临床应用。     

无痛胃镜在九年义务教育期儿童患者中的临床应用

目的：探讨丙泊酚在九年义务教育期儿童无痛胃镜检查术的有效性和安全性。方法：对180例儿童患者进行无痛胃镜检查。结果：检查后家属满意100％,患儿对检查过程遗忘100％．慢性胃炎发病率最高,HP阳性感染率为12．50％。结论：丙泊酚静脉麻醉是儿童无痛胃镜检查的一种安全、有效的方法。无痛胃镜术可用于提高儿童患者的消化道疾病诊治。     

枕神经电刺激治疗顽固性偏头痛的个案报道

偏头痛是一种反复发作的原发性脑功能异常性疾病,表现为反复发作的一侧或双侧搏动性头痛.流行病学调查显示,偏头痛的发病率男性约占6%,女性约占15%～17%.长期用药后疗效下降以及随后的严重副作用,是内科药物治疗的主要问题.国外采用神经电刺激术为偏头痛患者提供了一种全新的治疗.我科于2009年10月应用枕神经电刺激方法治疗了一例顽固性偏头痛患者,现报道如下.     

国产HLA-DRB基因分型检测芯片应用体会

目前,国内HLA基因分型大多采用聚合酶反应一序列特异引物技术(PCR-SSP)或序列特异寡核苷酸探针杂交技术(PCR-SSO）,使用的试剂也大都是进口。国产HLA试剂的开发,将大大降低移植配型技术的成本,给患者带来福音。我们应用上海博星基因芯片有限责任公司研制的国产HLA-DRB基因分型检测芯片,对临床移植配型的患者进行HLA-DRB基因分型。     

预注右旋美托咪啶用于喉显微手术麻醉的临床观察

选取78例行喉显微手术的患者并按照手术顺序随机均分为对照组与观察组各39例,两组患者在进行麻醉诱导时均进行静脉推注0.6μg/kg美托咪啶,随后对照组选用1.5mg/kg琥珀胆碱、1.0μg/kg雷米芬太尼实施麻醉,观察组则采用2.0mg/kg丙泊酚、0.5μg/kg雷米芬太尼实施麻醉。观察组患者在不同时间点的血流动力变化及术后不良反应均明显优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。在喉显微手术的麻醉时预注右旋美托咪啶可减轻患者应急反应,减少在麻醉当中的药物使用剂量,避免呼吸抑制的情况出现,具有临床应用及推广的价值。     

“曹操墓”引发的DNA鉴定热议

“曹操墓”在沉寂千年后骤然现世，一时间众说纷纭，莫衷一是，自复旦现代人类学教育部重点实验室宣布，拟用DNA技术来鉴别曹操墓真伪之后，消息一出，社会上对DNA鉴定引起了热议。一时之间，     

寡核苷酸DNA芯片用于ABO血型基因分型的研究

目的 对寡核苷酸芯片用于ABO血型基因分型的技术进行研究。方法 常规的酚／氯仿法提取标准血样基因组DNA，在ABO座位的外显子6和7区域各设计一对引物，经PCR扩增基因组相应区段并用Cy5-dCTP进行标记。设计寡核苷酸分型探针，将探针固定在APS－PDC法制作的DNA芯片上，用标记的PCR产物与之杂交，扫描仪对杂交结果进行扫描，Imagene软件对杂交图象进行分析。结果 本实验共检测了100份已知血型血样的ABO基因型，结果证明本实验研制的ABO基因分型芯片快速、准确、灵敏。结论 寡核苷酸DNA芯片用于ABO的基因分型与其他方法相比更具有灵敏、直观、高通量和集成化的优势。     

HLA-DR位点的基因芯片分型与临床应用

目的：建立一种新型的HLA－DR位点的基因分型方法，为HLA－DR的基因分型提供一个较新的思路。方法：利用基因芯片技术HLA不同基因亚型的独特序列设计探讨，制成分型芯片；待检测样品经PCR反应标记上荧光之后，与芯片进行杂交，根据杂交产生的荧光信号值分析确定样品DR位点的基因亚型，将这一方法应用于70份标准DNA和200份医院移植供受者的HLA－DR基因分型并将部分样品进行基因测序。结果：检测结果表明HLA－DR基因分型芯片可准确分辨出DR位点等位基因30大类，耗时3h 。结论：基因芯片用HLA－DR的基因分型，分辨率高，特异性强，重复性好，操作简便，对比常规的PCR－SSP和PCR－SSO方法，HLA－DR基因芯片方法更为直观，并具有集成化优势。可以在一张芯片上同时检测HLAⅠ类的A、B位点，并实现一张芯片多人份，适合于临床应用和骨髓库，脐血库的建立。     

人类白细胞抗原-A基因芯片分型研究

目的 探索人类白细胞抗原-A（HLA-A）基因芯片分型，为器官移植临床配型服务。方法 根据中国汉族南方人常见的HLA-A位点基因及其多态性的独特序列，设计并合成48条特异性的寡核苷酸分型探针，将其点在玻片上，制成芯片。基因组DNA通过组间特异性引物扩增，并用荧光素Cy5标记。标记后的产物与结合在芯片上的探针进行杂交，通过荧光扫描仪获得杂交产生的荧光信号值，再经过计算机软件自动分析，确定样品的HLA-A基因亚型。用该方法对120份样本进行HLA-A基因分型。结果 120份待检样本，其中6份因PER无产物，不能分型。1份信号杂乱，不能分型。其余113份样本分型成功。实际检出A抗原特异性结果为A2（含A203）：56；A11（含A1101）：52；A24：33；Al：8；A30（含A3001）：7；A33：21；A26：1；A29：2；A31：3；A68：2；A3：9；A32：1。未检出A＊3002基因型。整个检测耗时约4．5h。芯片检测的重复率为100％。结论 HLA-A基因芯片是一种理想的分型方法，具有特异性高、重复性好、操作简便、所需样本量少、结果判读容易、一次可作多份样本的优点，适合临床器官移植配型应用。     

HLA-DRB1基因芯片与PCR-SSP分型的比较

目的：比较基因芯片和PCR-SSP用于汉族南方人群HLA-DRB1基因分型的结果，评价分型芯片的准确性。方法：77份待分型样本，分别用等位基因特异的PCR-SSP和基因分型芯片对DRB1分型。芯片分型通过组间特异引物扩增基因组DNA，扩增用荧光标记。扩增标记后的产物与分型芯片的探针杂交，通过杂交产生的荧光信号确定样品的HLA-DRB1基因亚型，比较两种方法分型所获得的结果，不吻合的样本全部经第三方验证或测序。结果：77份样本，两种方法分型全部成功。分型结果的吻合率为93％。不吻合样本6份，其中SSP定型纯合子4份，芯片分型全部为杂合子。经第三方验证，证实芯片对纯合子和杂合子的分型全部正确。另外2份不吻合的样本经测序，证实SSP分型错误1份，芯片分型错误1份。芯片的重复率为96％。结论：基因芯片是一种理想的分型方法，具有特异性高、重复性好、操作简便、所需样本量少、一次可作多份样本的优点。