A型肉毒毒素多表位串联体的设计、表达、纯化及鉴定

目的:设计、表达两个A型肉毒毒素多表位串联体.方法:从文献报道的A型肉毒毒素(botulinum neurotoxin type A,BoNT/A)的表位及生物信息学方法预测得到的B细胞表位中遴选表位,并加入适当的辅助性元件,设计多表位串联体A、B.对其基因进行优化后,经重叠PCR方法合成串联体A、B的全长基因.分别插入原核表达载体pQE-30,再转化E.coli M15[pREP4]感受态细胞中进行诱导表达,以金属螯合亲和层析法纯化重组蛋白,并进行鉴定.结果与结论:成功设计并构建了两个多表位串联体A、B,并在E.coli中以包涵体形式获得高效表达.Ni-NTA法纯化后分别获得纯度大于92.2%、99%的重组串联体A、B蛋白,并经透析复性法复性.Western印迹和间接ELISA显示纯化、复性后的重组蛋白与抗天然BoNT/A马血清有特异性结合反应.     

细胞凋亡与白血病

细胞凋亡（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）或程序性细胞死亡（Ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｃｅｌｌｄｅａｔｈ,ＰＣＤ）是细胞发生的积极的死亡过程。是细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束自己生命的过程。不仅存在于正常组织与器官,调节着机体细胞生长与更新间的平衡稳定,也存在于各种肿瘤组织,与肿瘤的发生有着密切的联系,它与白血病的关系也越来越引起人们的重视,我们就此问题进行综述。１　基本概念细胞凋亡与坏死不同,是机体清除生存组织中单个细胞的一种死亡形式。坏死是病理状态,始于细胞膜的损伤,内容物流出,可以…     

老药“变脸”谁在愚弄百姓？—— 老药换新颜，究竟为哪般

许多药品冠名五花八门．且价格差别比较悬殊。“一药多名”多见于西药尤其是抗生素类药品．有的药品甚至有数十个商品名。“一药多名”不要说消费者，就是执业的医生和药师也很难记全。“一药多名”给医生开处方、药剂师调配，护士执行医嘱等带来诸多不便。厂家挖空心思换个“好名字”,多做些广告后,销售量就大幅度上升。     

宣教材料在飞行人员健康教育中的应用

目的探讨健康宣教彩页和保健手册在飞行人员健康教育中的作用。方法观察组在进行集体宣教和一对一口头宣教的基础上,发放健康宣教彩页和保健手册;对照组仅进行集体宣教和口头宣教。结果观察组对健康教育的满意度高于对照组;自行编制的健康教育试题观察组得分高于对照组。结论健康宣教彩页和保健书籍的应用,能够提高飞行人员健康教育效果和满意度。     

1例以酮症酸中毒起病的初发2型糖尿病的护理

正随着人口老龄化、人们生活方式的改变,我国糖尿病的患病数量正逐年增加。根据国际糖尿病联盟的数据,中国2013年糖尿病的患病人数为9 840万,居全球首位。预计到2035年,中国的糖尿病患病人数将达到1.43亿~([1])。糖尿病已经成为一种严重威胁人类健康的重要疾病。根据糖尿病的临床表现和病理生理机制,目前主要将糖尿病分为1型和2型两大类~([2])。     

基于镧系高敏荧光的生物毒素现场快速检测方法的研究

目的 利用时间分辨荧光技术建立一种可快速、准确地对蓖麻毒素、A型肉毒毒素及产气荚膜梭菌ε毒素进行定量检测的方法.方法 首先合成了一种可见光激发的镧系荧光微球,通过比较不同粒径的铕离子荧光微球,筛选出最佳粒径的微球偶联标记效价最高的捕获抗体,分别与相应检测抗体平行组合,确定最优的配伍组合条件建立检测方法.其次,对该法的敏感性、精密性、定量能力和特异性进行评价.结果 所建立的时间分辨荧光免疫层析法(TRFIC)可在20 min内完成对3种生物毒素的定性/定量检测.3种毒素的最低检出限均可达0.5 ng/ml,定量范围为0.5～50 ng/ml,3种毒素间及与黄曲霉毒素B1、T-2毒素均无交叉反应,批内重复性和批间重复性变异系数均小于15％.结论 该研究建立了一种基于可见光激发的TRFIC,在生物毒素的检测中获得了较高的最低检测限,与配套的小型便携式检测仪器一起使用,具有检测快速、可远程传输结果的优势,未来在生物反恐、生物武器核查等领域具有较高的应用价值和应用前景.     

中医定向透药联合穴位贴敷对老年股骨颈骨折术后髋关节功能康复的影

目的观察中医定向透药联合穴位贴敷对老年股骨颈骨折术后髋关节功能康复的影响。方法采用回顾性病例研究,收集2017年1月—2019年12月在我院骨伤科行髋关节置换术的老年股骨颈骨折患者88例,按入院时间顺序分为对照组43例和观察组45例,对照组采用围手术期常规护理,观察组在对照组常规护理基础上行中医定向透药联合穴位贴敷,每日1次,疗程1周。比较2组术后首次下床活动时间、术后住院时间、患肢疼痛长海痛尺评分、术后感染发生率及术后患侧髋关节功能Harris评分变化情况。结果与对照组比较,观察组术后首次下床活动时间、术后住院时间明显缩短(P均<0.01),术后第1天、第3天、第5天患肢疼痛长海痛尺评分,术后感染发生率均明显降低(P均<0.05);术后第7天、术后3个月观察组患侧髋关节功能Harris评分均高于对照组(P均<0.01)。结论中医定向透药联合穴位贴敷能有效减轻术后疼痛,促进患侧髋关节功能康复,减少术后感染并发症发生。     

抗苗勒氏管激素评估卵巢储备功能的临床应用现状

卵巢储备功能指卵巢内存留卵泡的数量和质量,其能间接地反映女性的生育能力。抗苗勒氏管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)作为卵巢特异性的生长因子,由颗粒细胞分泌,是预测卵巢储备功能的一个有效指标。血清AMH的水平可以预测卵泡池的大小、卵巢的反应性及女性的绝经年龄,同时可以评估癌症患者的卵巢储备功能。但AMH的测定值受到多种因素的影响,存在一定的局限性。     

完全植入式静脉输液港相关感染的危险因素

目的了解完全植入式静脉输液港相关感染发病情况,探讨其危险因素。方法选取河南省某三甲医院2013年1月—2016年12月使用完全植入式静脉输液港的2 098例乳腺癌患者为研究对象。采用巢式病例对照研究方法,以监测期间出现输液港相关感染的26例患者为病例组,按照1∶2的比例,随机选取同期进行该类手术的52例患者为对照组,比较两组在一般资料、研究指标方面的差异。采用logistic回归模型进行输液港相关感染的危险因素分析。结果监测期间,输液港植入患者共置管274 838 d,26例患者发生输液港相关感染,发病率为1.24%,日发病率为0.09‰;感染病原体以表皮葡萄球菌为主(占30.77%);有糖尿病史(OR=3.61,95%CI:1.27~10.11)、置港时长≥90 d(OR=4.71,95%CI:1.65~13.22)、手术时长≥40 min(OR=3.60,95%CI:1.34~9.64)为患者发生输液港相关感染的独立危险因素。结论应加强对植入输液港患者的监测和随访,特别是对患有糖尿病、置管时间长、手术时间长的患者更应密切关注,以利于输液港相关感染的预防与控制。     

蓖麻毒素B链蛋白多克隆抗体的制备及胶体金免疫层析快速检测法的建立

目的:结合蓖麻毒素(RT)的多克隆抗体和单克隆抗体,建立检测RT的胶体金免疫层析快速检测方法。方法:将纯化得到的重组蓖麻毒素B链蛋白(rRTB)免疫兔,获得抗血清经正辛酸-硫酸铵分步沉淀法纯化,利用间接ELISA方法鉴定抗体效价和特异性。结合抗重组蓖麻毒素A链蛋白(RTA)单克隆抗体,采用双抗体夹心法,建立检测天然RT的胶体金免疫层析技术,并对该方法进行特异性、敏感性、稳定性等评价;在奶粉、血清、土壤等材料中进行模拟添加RT检测。结果:间接ELISA法测定抗体效价为1:105,并可特异性与rRTB结合;胶体金法能在5~10 min内完成检测,多种不同的蛋白及近缘毒素检测评价显示该法特异性良好,检测灵敏性为50 ng/ml,环境样品的检测敏感性也相同。结论:利用兔抗RTB多抗和抗RTA单抗,建立了适用于现场的快速、特异检测天然蓖麻毒素的胶体金免疫层析方法。