2’-岩藻基乳糖对益生菌定殖及抗炎能力的影响

目的:探究2’-岩藻基乳糖（2’-Fucosyllactose,2’-FL）对乳酸菌和双歧杆菌增殖、粘附肠道细胞以及抗炎作用的影响。方法:以2’-FL和实验室的30株乳酸菌和双歧杆菌为研究对象,通过测定生物量、产酸和细胞粘附倍数的变化筛选出2’-FL可以增强定殖能力的菌株,再利用脂多糖诱导的RAW264.7细胞炎症模型进一步筛选出其中的潜在抗炎菌株,最后探究2’-FL和潜在抗炎菌株的联合抗炎效果。结果:30株实验菌株中,2’-FL仅能促进两歧双歧杆菌FL-276.1和FL-228.1的增殖,提高乳酸菌ML-1、FN515、FN518、FN249、ML329和双歧杆菌FL-276.1粘附Caco-2细胞的能力。其中两歧双歧杆菌FL-276.1、FL-228.1和鼠李糖乳杆菌FN518可以显著（P<0.05）降低脂多糖诱导的Raw264.7细胞炎症因子NO、TNF-α、IL-6和IL-1β的分泌。2’-FL可以显著降低NO、IL-6和IL-1β的分泌。2’-FL与上述3株菌联用具有协同抗炎作用,但协同效果具有菌株差异性,其中FL-276.1与2’-FL协同抗炎效果最好。结论:2’-FL可以提高乳酸菌和双歧杆菌的定殖能力,并协同发挥抗炎功能,但效果具有菌株差异性,这一结果可以为预防早产儿坏死性小肠结肠炎提供新的选择。     

益生菌对2型糖尿病小鼠的调节作用

目的:研究益生菌对2型糖尿病小鼠的降糖效果以及潜在的降糖机制。方法:以实验室34株益生菌为研究对象,利用α-葡萄糖苷酶抑制活性筛选具有降糖功效的菌株,并通过体外表面疏水性、自聚性衡量菌株益生特性,将筛选出的目标益生菌应用于动物模型,探究其降糖功效及潜在机制。采用高脂饮食结合链脲佐菌素方法建立2型糖尿病小鼠模型,所有小鼠连续灌胃8周后,检测其血糖水平、葡萄糖耐受量、糖化血红蛋白、胰岛素水平及胰岛素抵抗状况、血清炎症因子水平、胰高血糖素样肽-1以及粪便中短链脂肪酸含量。结果:在体外筛选实验中,副干酪乳杆菌J5和干酪乳杆菌K11有着良好的抑制α-葡萄糖苷酶活性和肠道黏附能力。动物实验中,干酪乳杆菌K11能够显著降低小鼠的血糖水平(P<0.05),改善糖耐量受损以及胰岛素抵抗(P<0.05);显著降低小鼠血清中肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-6含量;明显提高血清中胰高血糖素样肽-1水平和粪便中短链脂肪酸的含量(P<0.05)。结论:干酪乳杆菌K11可显著调节2型糖尿病小鼠的血糖,作用机制可能与其调节肠道菌群产物短链脂肪酸、促进胰高血糖素样肽-1分泌并调节炎症因子有关。     

阳离子交换树脂静态吸附法特异性分离乳清中乳铁蛋白的关键技术

乳铁蛋白(lactoferrin,Lf)是一种对婴幼儿有重要生理功能的活性乳蛋白,掌握Lf特异性分离技术对打破国外技术垄断、降低成本、促进我国婴幼儿配方奶粉发展具有重要意义.该研究以乳清为原料,基于最大吸附量、吸附率、特异吸附为指标,对不同吸附剂做了筛选,探讨了工艺参数对吸附效果的影响及洗脱液离子浓度对洗脱效果的影响,...     

小黄鱼内脏油的提取及其棕榈酸甘油酯低温结晶富集工艺的研究

以小黄鱼内脏为原料,采用稀碱水解法、酶解法和微波辅助法提取鱼油。以提取率为指标,采用气相色谱(GC)检测不同工艺提取的小黄鱼内脏油中脂肪酸组成,比较脂肪酸含量与分布的差异。并以棕榈酸为指标,研究晶体传质模型以及低温富集内脏油中棕榈酸的条件。结果表明:稀碱水解法小黄鱼内脏油的提取率最高,达到84.26%±5.15%;所提鱼油中二十二碳六烯酸(DHA,10.47%±0.28%)、花生四烯酸(ARA,1.16%±0.02%)含量和sn-2位棕榈酸含量(39.94%±1.11%)、相对棕榈酸含量(50.55%±1.06%)均高于酶解法和微波辅助法,适合作为高棕榈酸甘油酯的富集原料。低温结晶富集小黄鱼内脏油的棕榈酸,传质模型预测不同温度下晶体质量方程的决定系数R2>0.97,棕榈酸质量方程的R2>0.94;并确定低温结晶富集棕榈酸的最佳条件为:油/正己烷比例1:6、低温-40℃、结晶时间2.6 h,此时晶体中棕榈酸含量富集至42.62%±2.67%,比内脏油的棕榈酸含量提高了61.01%;sn-2位棕榈酸含量为68.19%±1.47%;棕榈酸得率为80.50%±4.39%。该模型准确模拟了内脏油棕榈酸富集的最佳条件,富集的棕榈酸甘油酯具有应用到婴儿奶粉以提高sn-2棕榈酸的前景。     

降解草酸盐益生菌的筛选及其体内功效评价

过量草酸积累可引起人体高草酸尿症,从而引发肾结石。降解草酸是预防或缓解高草酸尿症的有效方法。从36株源于健康人体肠道和发酵乳制品的乳酸菌中筛选出1株草酸降解率达到83.6%的阴道乳杆菌(Lactobacillus vaginals) 1F-6;利用急性毒性实验模型探究了L.vaginals 1F-6的安全性;建立高草酸尿症小鼠动物模型,通过测定尿草酸含量、尿素氮肌酸酐水平、SOD活性等指标,对L.vaginals 1F-6的降草酸效果进行分析评价。结果表明,灌胃L.vaginals 1F-6后小鼠体重和脏器指数与对照组没有显著性差异,表明L.vaginals 1F-6对小鼠无急性毒性作用;L.vaginals 1F-6可显著降低小鼠尿草酸含量、减少肾脏草酸钙晶体聚集,并有效缓解由草酸在肾脏过度蓄积引发的尿液离子浓度紊乱和肾氧化损伤,起到保护肾脏的作用。     

商业发酵剂中乳酸乳球菌发酵风味特性及其化学表征的研究

为深入分析不同乳酸乳球菌在发酵乳中的风味贡献和特征香气成分,对多种商业乳酸菌发酵剂中分离得到21株乳酸乳球菌,进行单菌株发酵。根据感官评价结果进行香型分析,之后采用气相色谱-离子迁移谱仪（gas chromatograph-ion mobility spectrometry,GC-IMS）技术测定了发酵乳的挥发性风味化合物,并利用化学计量学分析方法进行风味物质的分析。结果表明:这些单菌株发酵乳可划分为奶香味、奶油味、酪香味三个香型。GC-IMS共鉴定出25种化合物,其中醇类9种、酮类8种、醛类3种、羧酸1种、酯4种。通过绘制GC-IMS指纹图谱,明确了不同菌株发酵乳的特征化合物组成。利用主成分分析（principal component analysis,PCA）,将其中4株乳酸乳球菌双乙酰变种的发酵乳进行了很好的区分,且与感官评价结果相一致。采用偏最小二乘回归分析（partial least squares regression,PLSR）对感官香味分型和挥发性成分的相关性进行分析,得到对酪香味影响比较大的挥发性风味成分有正己醛、正己醇;对奶油味贡献较大的成分有乙酸乙酯;对奶香味贡献大的成分较为分散,关键性成分有待于进一步确定。本研究为发挥乳酸乳球菌改善发酵乳风味的作用提供了借鉴和参考。     

不同来源牛乳酪蛋白过敏原性评价及酶解消减作用研究

牛乳酪蛋白是引起婴幼儿过敏的重要来源。为分析不同来源的牛乳酪蛋白过敏原性差异,并通过蛋白酶水解实现低水解度下高效消减牛乳酪蛋白过敏的作用,研究了不同来源的酸法酪蛋白、酶法酪蛋白和胶束酪蛋白原料差异以及制备方法对牛乳酪蛋白过敏原性的影响,并分析了蛋白酶水解消减酪蛋白过敏的作用效果。结果表明,不同制备方法获取的酪蛋白过敏原性差异明显,酶法酪蛋白和胶束酪蛋白具有更高的过敏原性。对具有高过敏原性的酶法酪蛋白采用4种单酶水解时,均获得了较低的残留过敏原性,其中菠萝蛋白酶具有最优效果,残留抗原性降低至9%,对应水解度仅为8%。菠萝蛋白酶水解牛乳酪蛋白时更有利于获得低水解度下具有低致敏性的水解产品。     

两歧双歧杆菌FL-228.1增强小鼠先天免疫功能研究

本文以8株潜在功能菌株为研究对象，将其分别干预RAW264.7鼠巨噬细胞和人外周血单核细胞（PBMCs），并检测RAW264.7细胞吞噬活性和自然杀伤（NK）细胞活性变化，将筛选出的潜在益生菌进一步干预BALB/c小鼠，探究其在体内的免疫调节功效。结果表明，在细胞实验中，不同菌株干预均能显著提高RAW264.7细胞吞噬活性（P<0.05），而两歧双歧杆菌FL-228.1和鼠李糖乳酪杆菌FN518能显著提高NK细胞活性（P<0.05），且综合来看，两歧双歧杆菌FL-228.1在体外表现效果最优，进一步开展体内研究。摄入两歧双歧杆菌FL-228.1能促进小鼠胸腺发育并显著提高腹腔巨噬细胞吞噬活性，脾脏中NK细胞活性，血清IgG含量，脾淋巴细胞转化和抗菌肽相关基因Cryptdin-4和CRAMP的表达（P<0.05），但对血清细胞因子TNF-α、IL-10、IL-12和IFN-γ以及抗菌肽相关基因RegIII-γ的表达无显著影响（P>0.05）。综上，两歧双歧杆菌FL-228.1可以通过调节免疫细胞活性、细胞因子表达以及免疫分子抗菌肽相关mRNA水平来提高先天免疫功能...     

聚合酶链式反应技术快速检测原料乳中荧光假单胞菌

目的 利用PCR（polymerase chain reaction）技术建立一种快速、准确检测原料乳中最常见有害嗜冷微生物——荧光假单胞菌的方法。方法 以荧光假单胞菌蛋白酶基因aprX为检测靶标,设计特异性PCR简并引物,建立原料乳中荧光假单胞菌PCR检测体系,对该体系的特异性及检测限进行评价。结果 筛选到特异性引物F3：5’-WSNGGNGGNGAYTTYCAYATGAC-3’;R3：5’-RTCRTTNCCNCCNCCRTCCC-3’,建立了最佳PCR检测体系：引物浓度0.5 μmol/L、Taq DNA聚合酶添加量0.4 μL、dNTPs浓度0.16 mmol/L、Mg²⁺浓度1.6 mmol/L,退火温度56.4 ℃,扩增35个循环。此检测方法对荧光假单胞菌具有特异性,检测限为2.57×10³ CFU/mL。结论 本方法操作简便,特异性强,检测限低,对快速检测原料乳中嗜冷菌,保障原料乳品质与安全具有一定参考意义。