共转染抑癌基因p16、p53对白血病细胞株HL-60及K562的抑制作用

人类髓系白血病细胞株ＨＬ 6 0、Ｋ5 6 2同时有ｐ16、ｐ5 3抑癌基因的缺失[1,2 ] 。已有研究将正常的ｐ5 3或ｐ16基因单独导入这两种细胞 ,可以不同程度地抑制肿瘤细胞的生长[1,2 ] 。如果同时将缺失的ｐ16、ｐ5 3两种基因导入ＨＬ 6 0及Ｋ5 6 2细胞中 ,可能有更好的抑制作用。材料和方法1　质粒与试剂　含野生型ｐ16ｃＤＮＡ的质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ｐ16由ＧｏｒｄｏｎＰｅｔｅｒｓ教授 (ＩｍｐｅｒｉａｌＣａｎｃｅｒＲｅｓｅａｒｃｈＦｕｎｄ .Ｌｏｎｄｏｎ)惠赠 ,含野生型ｐ5 3ｃＤＮＡ的质粒ｐＣ5 3 ＳＮ3及真核表达载体ｐＣＮｅ…     

我国福建汉族人HSP70基因多态性分析

目的了解福建省汉族人HSP70基因多态性分布，进而为探讨HSP70基因多态性与疾病的相关性提供遗传背景资料。方法应用聚合酶链反应技术、限制性内切酶分析检测了127名福建汉族正常人的HSP70基因3个多态性位点，并比较了部分不同地区和人群之间的基因型与等位基因频率。结果福建汉族人HSP70-1基因型（GG，GC和CC）分布频率分别是55．1％、40．2％和4．7％；HSP70-2基因型（从，AG和GG）分布频率分别是44．1％、铝．8％和6．9％；HSP70-hom基因型（Tr，TC和CC）分布频率分别是59.8％、37．0％和3．2％；HSP70-1等位基因频率G和C分别是75．2％和24．8％；HSP70-2等位基因频率A和G分别是68．5％和31．5％；HSP70-hom等位基因频率T和C分别是78．3％和21．7％。福建汉族人HSP70-1的基因型分布和等位基因频率同日本、墨西哥人群比较差异无统计学意义，与美国和西班牙人比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。福建汉族人HSP70-1的GG纯合型（55．1％）显著高于美国（42．6％）和西班牙（33．0％）人群；福建汉族人HSP70-2的基因型分布和等位基因频率与日本人比较差异无统计学意义，与墨西哥、美国和西班牙人群比较，差异有统计学意义（P〈0．05），福建汉族人HSP70-2的AA纯合型（44．1％）高于墨西哥（23．O％）、美国（38．8％）和西班牙（20．O％）人群；福建汉族人群的HSP70-hom基因型和等位基因频率分布同日本、墨西哥、美国和西班牙人群的基本一致，差异无统计学意义，福建汉族人群的HSP70基因型和等位基因频率分布同中国台湾汉族人基本一致，差异无统计学意义，与武汉地区汉族人某些位点存在差异。结论福建汉族人HSP70基因多态性分布不同于某些地区的人群，具有种族和地区差异。     

生物钟相关基因在原发性肝细胞癌中的表达及临床意义——基于TCGA数据集分析

目的：探究生物钟相关基因在原发性肝细胞癌（简称肝癌）中的表达及意义。方法：从美国癌症和肿瘤基因图谱数据库（The Cancer Genome Atlas,TCGA）中下载肝癌数据424例,包括374例肝癌患者样本及50例正常对照样本。运用DECenter软件对51个生物钟相关基因进行差异表达分析,比较生物钟基因在肝癌患者及正常样本之间的表达情况。运用DAVID在线工具分析差异基因的GO及KEGG功能富集通路,并通过STRING数据库构建差异基因之间蛋白质相互作用网络。了解生物钟基因肝癌发生发展过程中的主要作用。结果：在374例肝癌患者样本的51个生物钟相关基因中,有21个基因在肝癌样本中表达上调（P<0.05）,3个基因表达下调（P<0.05）。生物钟基因高表达样本主要富集于Wnt信号通路、Hedgehog信号通路及Hippo信号通路（P<0.001）。参与调节昼夜节律和细胞代谢的10个生物钟基因在蛋白质相互作用网络中相关性最为紧密（P<0.001）。GO分析差异基因集中作用于调节昼夜节律、细胞代谢过程、基因表达等通路（P<0.001）。结论：生物钟相关基...     

类风湿性关节炎患者血清肿瘤坏死因子α的变化

为探讨肿瘤坏死因子 α(TNFα)在类风湿性关节炎 (RA)中的临床意义 ,笔者观察 2 1例 RA患者血清 TNFα水平 ,并与退行性关节炎 (OA)、强直性脊柱炎 (AS)患者血清 TNFα水平做一比较 ,同时对 RA综合治疗患者血清 TNFα水平变化做初步观察。1　对象与方法1.1　研究对象1.1.1　对照组　 14例均为女性健康献血员 ,年龄 2 9.4±5 .2岁 (2 2～ 38岁 )。1.1.2　类风湿性关节炎组　 2 1例 ,男性 9例 ,女性 12例 ,年龄 40 .2± 8.7岁 (2 0～ 6 2岁 )。9例次采用 RA的综合治疗 ,包括一种非甾体类消炎止痛药 (NSA1DS)或 /和小剂量激素 ,二…     

联合转染p53与血管生成抑素基因对人胃癌细胞系SG7901生长的影响

目的探讨联合转染p53和血管生成抑素(AS)基因对人胃癌细胞系SG7901生长的影响。方法用脂质体转染法分别将p53、AS基因、p53和AS基因转染人胃癌细胞系SG7901。以RT-PCR法检测转染后细胞目的基因的表达,通过细胞集落形成实验、MTT生长曲线、细胞周期检测观察其生物学特性变化。结果p53或AS基因均能抑制转染细胞的生长,而联合转染两种基因的细胞生长抑制更明显。结论p53和AS基因具有协同抑制恶性肿瘤细胞生长作用,提示联合多种基因可能有利于恶性肿瘤的基因治疗。     

油酸诱导HepG_2细胞脂肪变性模型的建立

目的:以Hep G2细胞为实验材料,用油酸诱导建立肝细胞脂肪变性模型。方法:用不同浓度的油酸培养Hep G2细胞,采用MTT法确定引起肝细胞脂肪变性的油酸的最佳浓度,用油红O染色观察细胞内脂滴形成情况,并检测细胞内TG的含量和培养液的ALT、AST的水平,实时定量PCR检测CPT-1、FAS、IL-6m RNA的表达。结果:用含0.25m M浓度的油酸的培养基培养Hep G2细胞24h,光镜下可见Hep G2细胞内有脂滴形成,模型组中细胞内TG含量及培养液中AST较对照组增高,差异有统计学意义。模型组较对照组CPT-1m RNA表达增高,FASm RNA表达降低,IL-6m RNA表达增高,差异均有统计学意义。结论:通过油酸建立的体外非酒精性脂肪肝模型,可较好地模拟人脂肪肝的主要特征,为脂肪肝的研究提供了简便的方法。     

与肝癌复发和转移相关的几种生物标记物

肝癌发病率高，术后复发与转移严重制约了肝癌的治疗效果。现已发现许多生物标记物如甲胎蛋白（AFP）、甲胎蛋白异质体（AFP-L3）、血管内皮生长因子（VEGF）、细胞间粘附分子-1（ICAM-1）等与肝癌复发与转移密切相关，通过对这些相关标记物进行联合检测，可在早期预测肝癌复发和转移，从而及时进行再治疗，可提高肝癌的治疗效果。     

UGT1A1基因复合杂合突变致吉尔伯特综合征一例

一例吉尔伯特综合征患儿自幼反复出现巩膜黄染,无其他自觉症状;血清胆红素水平升高,以非结合胆红素为主;排除胆道梗阻、溶血等其他引起黄疸的因素;基因检测发现患儿尿苷二磷酸葡糖苷酸转移酶1A1（UGT1A1）基因存在UGT1A1*28和c.211G>A杂合突变。     

血清铜蓝蛋白水平与慢性乙型肝炎患者临床病理关系的初步研究

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者血清铜蓝蛋白(CP)水平与肝脏炎症活动度分级、纤维化分期的关系,建立肝纤维化分级无创模型并分析其诊断价值.方法 2009年1月至2011年6月于福建医科大学附属第一医院肝病中心确认的CHB患者148例,同步进行肝组织病理学、血清CP及生物化学指标检查.Spearman等级相关分析法判断CP水平与肝脏病理学分级之间的相关性;Logistic回归分析法分析相关指标的诊断意义.构建肝脏纤维化诊断预测模型,受试者工作曲线(ROC)法评价模型的诊断价值.结果 148例CHB患者炎症活动度分级G1、G2、G3、G4的血清CP平均值分别为(212.5±34.9)、(205.5±32.0)、(201.4±37.7)和(172.8±20.4) mg/L,ANOVA分析提示4组炎症活动度分级间CP水平的差异有统计学意义(F=6.309,P＜0.01);纤维化分期S1、S2、S3、S4的血清CP平均水平分别为(217.4±32.3)、(206.0±37.7)、(194.2±29.8)和(179.7±30.4)mg/L,ANOVA分析提示纤维化分期间CP的差异有统计学意义(F=8.608,P＜0.01).Spearman等级相关分析法分析提示,CP与炎症活动度分级(r=-0.316,P＜0.01)以及纤维化分期(r=-0.404,P＜0.01)均呈负相关关系.应用ROC分别建立CP水平对S≥2、S≥3、S=4的诊断曲线,曲线下面积(AUC)分别为0.71、0.70和0.72.经Logistic回归分析,筛选出模型-1(S≥2)、模型-2(S≥3)、模型-3(S=4)组包括CP、甲胎蛋白、胆碱酯酶、PLT、年龄的肝纤维化独立预测因子,最终构建数学模型并计算肝纤维化评分,模型-1、模型-2、模型-3的AUC分别为0.84、0.83和0.87,准确率分别为71.8％、80.3％和79.2％.结论 CHB患者的血清CP水平与肝脏炎症活动度分级、纤维化分期呈负相关关系,随病理分级的增加而呈阶梯状降低.CP水平可作为无创性判断肝脏纤维化状态的一项重要指标,纳入CP而构建的肝纤维化预测模型对CHB肝纤维化肝硬化有较好的诊断价值.     

乙型肝炎病毒相关性肝细胞癌预测模型的优化北大核心CSCD

目的优化已建立的HBV相关性肝细胞癌（HCC）预测模型（REACH—B评分模型）。方法收集2004年10月1日至2014年5月1日于福建医科大学附属第一医院肝病中心初次入院、HBsAg阳性超过半年的患者,分为HCC组和对照组（非HCC组）,回顾性收集相关指标,进行评分评估。用受试者工作特征曲线判断各模型预测价值。结果预测3年HBV相关性HCC发生,共纳入627例患者,其中HCC组151例,对照组476例。REACHB评分模型预测3年HCC发生的曲线下面积（Auc）为0．78（95％CI：0．74～0．82）,敏感度为73．00％,特异度为78．70％。联合甲胎蛋白（AFP）建立R—AFP评分模型,对3年HCC发生的AUC升至0．80（95％CI：0．76～0．83,Z=2．50,P=0．01）,敏感度为71．03％,特异度为79．13％。联合甲胎蛋白异质体3与AFP之比（AFP—L3％）建立R—AFP—L3％评分模型,对3年HCC发生的AUC进一步升至0．83（95％CI：0．80～0．87,Z=2．45,P=0．01）,敏感度为75．01％,特异度为79．32％。预测5年HBV相关性HCC发生,共纳人159例患者,其中HCC组65例,对照组94例。REACH—B评分模型预测5年HCC发生的AUC为0．79（95％CI：0．72～0．87）,敏感度为73．60％,特异度为75．43％。R-AFP评分模型对5年HCC发生的预测价值AUC升至0．84（95％CI：0．77～0．90,Z=2．70,P=0．006）,敏感度为83．12％,特异度为77．89％。结论联合AFP及AFP—L3％能优化REACHB评分模型对3年和5年HBV相关性HCC发生的预测价值。