胃宁方对人胃癌SGC-7910细胞增殖凋亡的影响

目的观察胃宁方对人胃癌SGC-7910细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法不同浓度不同时间的胃宁方处理人胃癌SGC-7910细胞,MTT法测定细胞增殖情况,流式细胞仪分析细胞周期、凋亡及增殖细胞核抗原(PCNA)、c-Myc、Bcl-2表达。结果胃宁方能抑制SGC-7910细胞增殖,抑制率与浓度呈依赖关系;细胞周期G0/G1期、S期比例增加,胃宁方能诱导细胞凋亡,凋亡率与时间、剂量呈依赖关系;胃宁方作用后PCNA、c-Myc、Bcl-2表达显著下调(P<0.05或P<0.01)。结论胃宁方能抑制SGC-7910细胞增殖,诱导其凋亡;其作用机制可能与下调PCNA、c-Myc、Bcl-2的表达有关。     

蓝萼甲素对小鼠脾细胞内游离钙离子浓度的影响

蓝萼甲素是由唇形科香茶菜属植物香茶菜Rabdosia amethystoieds(Benth.)Hara中分离提取出的二萜化合物。前期的实验研究表明,香茶菜能显著抑制细胞免疫反应而增加体液免疫反应。应用药理与化学密切合作的研究方法,以活性评价为导向,对香茶菜影响免疫功能的活性物质进行追踪分离,获得了具有免疫活性的化学单体蓝萼甲素。在对小鼠脾细胞增殖影响的实验中,观察到蓝萼甲素对伴刀豆蛋白A(ConA)和脂多糖(LPS)诱导的小鼠脾脏淋巴细胞增殖以及混合淋巴细胞培养反应具有抑制作用[1]。为进一步探讨蓝萼甲素对免疫功能的影响,本实验应用钙荧光指标…     

钾通道在重组改构人肿瘤坏死因子抑制肺癌细胞增殖中的作用

背景与目的 随着膜片钳技术和分子生物学技术的发展，及其在肿瘤细胞膜离子通道研究中的应用，肿瘤细胞膜离子通道已逐渐成为肿瘤基础研究的热点。本研究旨在探讨钾通道（K^＋通道）在重组改构人肿瘤坏死因子（rmhTNF）抑制肺腺癌细胞A-549增殖、促进凋亡中的作用。方法 以人肺腺癌细胞系A-549为研究对象，采用全细胞膜片钳技术记录应用rmhTNF前后细胞膜K^＋电流特性变化，分析rmhTNF对细胞膜K^＋电流的影响；用MTT法检测rmhTNF对细胞增殖的影响；流式细胞仪检测rmhTNF作用后细胞周期分配及凋亡率。结果 经rmhTNF作用48h后肺癌细胞膜上跨膜K^＋电流幅值明显降低（P＜0．01），且与rmhTNF存在剂量依赖关系。MTT实验显示rmhTNF抑制肺癌细胞的体外增殖，随rmhTNF浓度的增加，抑制率由14．56％增至38．68％。流式细胞仪检测细胞周期分配发生变化，G1期由53．02％增至72．93％（P〈0．01），且细胞凋亡率由2．08％增至8．68％（P＜0．01）。结论 rmhTNF可抑制肺癌细胞膜K^＋通道的表达。rmhTNF通过使A-549细胞周期受阻于G1期，激发细胞凋亡而抑制肺癌细胞增殖。在rmhTNF抑制人肺腺癌A-549细胞增殖、促进其凋亡的作用中细胞膜K^＋通道起着一定的作用。     

细胞凋亡与增殖细胞核抗原在小鼠生后肾脏皮质发育中的表达

目的观察小鼠出生后肾脏皮质发育过程中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear anti-gen,PCNA)的表达及细胞凋亡的特征,探讨出生后小鼠肾脏皮质发育过程中细胞增殖与凋亡的规律及其关系。方法应用免疫组织化学技术和原位末端标记法(TUNEL法)分别检测出生后1、3、7、14、21、28和70天小鼠肾脏皮质中PCNA阳性的细胞和凋亡细胞。结果(1)小鼠生后肾脏皮质发育中PCNA的表达有一定的规律,早期PCNA阳性表达丰富,随着肾脏发育成熟表达逐渐减弱直至成年基本消失。(2)小鼠出生后肾脏皮质发育中也存在着大量细胞凋亡现象,且凋亡高峰一般出现在增殖高峰之后。结论细胞增殖与凋亡在小鼠生后肾脏皮质发育的整个过程中普遍存在,早期细胞增殖旺盛,增殖高峰之后出现凋亡高峰,晚期两者活动均减弱。     

siRNA抑制HER2/neu过表达肺腺癌细胞生长和增殖

背景与目的：30％NSCLC存在HER2／neu过表达，与肿瘤发生、转移、肿瘤血管形成、抗凋亡及化疗耐药等有关。本文通过RNA干涉抑制肺腺癌细胞SPC—A-1 HER2／neu过表达，观察肿瘤细胞周期、增殖及集落形成能力的变化。方法：构建针对HER2／neu的siRNA重组质粒，稳定转染SPC—A-1，通过RT—PCR和Western Blot检测HER2／neu表达；FCM分析细胞周期；MTT法观察细胞增殖，绘制细胞生长曲线；平板集落形成实验检测肿瘤细胞的集落形成能力。结果：成功构建了HER2／neu的siRNA重组质粒，稳定转染靶细胞后可显著降低HER2／neu表达；与亲代细胞相比，G0／G1期细胞增加17．1％，S期细胞减少12．8％；细胞生长速度减慢，集落S1抑制率达到49．0％。结论：针对HER2／neu的siRNA可以显著降低肺腺癌细胞过表达HER2／neu，肿瘤细胞阻滞于G0／G1期，造成细胞增殖减慢，集落形成能力明显下降。因此，siRNA对过表达HER2／neu肺癌的治疗具有潜在应用价值。     

信号传导和转录激活因子3在恶性肿瘤中的作用

在多种人类恶性肿瘤组织及细胞系中发现有信号传导和转录激活因子3（STAX3）的异常高表达，异常活化的STAT3通过调控其下游基因如Bcl-xL、Cyclin D1、VEGF等的表达，参与细胞的增殖、凋亡，调节新生血管的生成，在肿瘤发生发展中起重要的作用。目前以STAT3为靶点的肿瘤治疗研究已取得了初步的成果。     

The Biological Effect of Hepsin on the Proliferation and Invasion of PC-3 Prostate Cancer Cells

OBJECTIVE Recent studies have shown that hepsin, a type of transmembrane serine protease, is highly upregulated in prostate cancer, but, little is known about its role in progression and invasion of this cancer. We constructed a hepsin-expressing plasmid and transfected it into PC-3 cells to investigate the effect of the hepsin gene on the biological behavior of the PC-3 cells. METHODS Plasmid pHepsin-IRES2 was transfected into prostate cancer PC-3 cells using Fugene6, and the cells with stable hepsin expression were screened and selected with Zeocin (600 mg/L). The hepsin mRNA level was measured by real-time PCR and the growth curve of the PC-3-transfected cells assessed using MTT and BrdU assays. A Boyden chamber was used to examine the difference in invasion and metastases between transfected and non-transfected cells. RESULTS The hepsin mRNA level in pHepsin-IRES2 transfected -PC-3 cells was significantly higher than that found in the control PC -3 cells. While the growth curve of the hepsin gene transfected PC -3 cells showed that there was no significant effect on proliferation, the invasive ability of the pHepsin-IRES2 transfected PC-3 cells, as compared with control cells, was significantly increased (P<0.05). CONCLUSION The results suggest that even though hepsin has no effect on the proliferation of prostate cancer PC-3 cells, it does promote cellular invasion and metastasis.Therefore hepsin may have a role in the development of prostate cancer.     

非小细胞肺癌分子靶向治疗研究进展

近年来,随着分子生物学技术的迅速发展,从分子、细胞水平上对恶性肿瘤细胞的异常增殖、浸润和转移等机制有了进一步的认识,肿瘤的分子靶向治疗也随之向前迈进了一大步。分子靶向治疗是通过着眼于阻滞特定的靶分子而达到抑制细胞增殖和稳定细胞的作用,它有别于传统的细胞毒药物治疗是在于其具有非细胞毒性和靶向性。这一特点使得分子靶向治疗具有常规治疗(放疗、化疗)所不具备的优势,开辟了肿瘤治疗中一片全新的领域。分子靶向药物的分类通常把癌细胞异常增殖、进展过程中的靶分子分为两大类:一类是由癌细胞表达的异常靶分子,包括增殖因子及…     

女贞子药材及贞芪利咽颗粒中齐墩果酸和熊果酸的测定

女贞子（Fructus Ligusm lucidi）系木犀科女贞属植物女贞（Ligustrum lucidum Ait．）的果实，含有多种化学成分，如齐墩果酸（oleanolic acid，1）、熊果酸（ursolic acid，2）、乙酰齐墩果酸等。1为女贞子中的主要有效成分，含量可达1．1％～14．8％。药理实验结果表明1具有促进淋巴细胞增殖和动物巨噬细胞吞噬功能，并与白介素2（IL-2）具协同作用.2在与1相同的剂量下，亦能明显增强正常小鼠巨噬细胞的吞噬功能。贞芪利咽颗粒为六类中药新药，由女贞子、黄芪、丹参、泽漆四味药材提取加工而成，用于治疗慢性咽炎。其中女贞子为君药，在制剂中应检测其有效成分1、2含量。现行标准中采用TLC法，误差大、重现性差，且难以将二者有效分离。文献采用HPLC法测定女贞子中1、2的含量，但仍未能完全分离，在制剂中会干扰有效成分测定。本研究采用反相HPLC法，以甲醇-水（87：13，含0．2％磷酸和0．04％三乙胺）为流动相，可较好分离女贞子药材及贞芪利咽颗粒中的1、2。     

快杀灵与敌杀死对小鼠骨髓细胞增殖抑制和染色体诱变效应

目的 :检测快杀灵和敌杀死对小鼠骨髓细胞的增殖抑制和染色体诱变效应。方法 :分别按受试药的1/4、1/2和1×LD50(快杀灵和敌杀死的LD50 分别为72.8mg/kg和26mg/kg)3个剂量分5次(每次间隔24h)经口灌胃给小鼠染毒 ,每次灌胃量为20ml/kg;用细胞遗传学方法检测骨髓的细胞增殖指数、染色体结构畸变率和畸变细胞率的变化。 结果 :与阴性对照组比较 ,2种农药的3个剂量都使骨髓的细胞增殖指数显著降低 ,快杀灵作用后骨髓细胞增殖指数为3.38±0.42～3.40±1.16(P<0.00001) ,敌杀死作用后骨髓细胞增殖指数为5.12±0.47～5.97±0.62(P<0.001～P<0.0001) ;快杀灵大剂量组以及敌杀死的3个剂量组各自的染色体畸变率、畸变细胞率均有显著性增高 ,快杀灵大剂量诱导的染色体畸变率和畸变细胞率分别为8.87±1.65(P<0.001)和7.21±2.10(P<0.01) ,敌杀死诱导的染色体畸变率和畸变细胞率分别是11.74±2.81～23.42±2.17(P<0.001～P<0.0001)和9.36±1.52～17.33±3.68(P<0.001～P<0.0001) ;敌杀死引起的染色体畸变类型比快杀灵的多而复杂。 结论 :快杀灵和敌杀死既能抑制骨髓细胞增殖 ,又能诱发染色体损伤。以LD50 为评价标准 ,快杀灵抑制骨髓细胞增殖的效应较强 ,敌杀死诱发染色体损伤的效应较强