磷酸甘露糖异构酶基因快速初筛方法的建立

建立磷酸甘露糖异构酶(PMI)基因环介导等温扩增快速检测方法。设计了两对内引物和两对外引物,优化后的反应条件为:FIP,BIP浓度为0.8μmol/L,F3,B3浓度为0.2μmol/L,镁离子浓度为2.0 mmol/L,甜菜碱浓度为1.6 mmol/L,反应时间为40 min,反应温度为62.0℃。SYBR Green法检测需2 h,电泳法检测共需2.5 h。与实时荧光和普通PCR比较特异性良好,转基因成分检测限达到0.01%。结果表明该检测方法简单且快速。     

质谱方法在过敏原研究中的应用

食品过敏已经成为全球范围内重要的食品安全问题,迫切需要高灵敏度、高特异性的方法对食品中的过敏原进行快速、可靠的检测。检测食品中过敏原最常用的是核酸的方法和酶联免疫的方法,质谱技术的发展,为过敏原的研究提供了新的手段。质谱分析具有灵敏度高、样品用量少、分析速度快等优点,因此,质谱方法逐渐应用于食品过敏原的检测。本文从榛子、花生和牛奶角度,总结质谱技术在过敏原检测中的一些应用。     

等温扩增方法检测耐高温α-淀粉酶基因

建立耐高温α-淀粉酶Amy797E基因环介导等温扩增快速检测方法。LAMP引物,优化反应条件,FIP,BIP浓度为0.8μmol/L,F3,B3浓度为0.2μmol/L,镁离子浓度为2 mmol/L,甜菜碱浓度为1.4 mmol/L,反应时间为40 min,反应温度为62℃,SYBR Green法检测需2 h,电泳法检测共需2.5 h。与实时荧光和普通PCR比较特异性良好,转基因成分检测限达到0.01%。     

质谱方法在转基因成分检测中的应用

随着电离技术的发展,蛋白组学技术越来越多地应用于转基因作物的安全性评价。目前用得最多的两种方法有基质辅助激光解析电离化/飞行时间质谱和液相电离喷雾质谱法,本文对这2种方法的原理以及在转基因分析中的应用进行综述。     

α-乙酰乳酸脱羧酶克隆表达方法

双乙酰是啤酒生产工艺中重要的风味物质,为控制啤酒生产中双乙酰的含量,缩短啤酒熟化时间,基因工程技术改造啤酒酵母已应用得非常广泛。综述国内外基因工程技术克隆表达方法,介绍检测策略。