41例新生儿溶血病患者血型血清学检测结果分析

目的：探讨不同的免疫性血型抗体与新生儿溶血病的关系,为新生儿溶血病提供诊断依据。方法采用微柱凝胶技术对41例新生儿溶血病的患者进行ABO血型、Rh(D)血型、直接抗人球蛋白、游离、放散和不规则抗体筛查及抗体鉴定试验,确定患者体内是否有免疫性IgG抗体及IgG抗体特异性。结果41例新生儿溶血病患者中,ABO血型不合者38例,占92.68%,其中由免疫性IgG抗原A抗体引起者21例,由免疫性IgG抗原B抗体引起者17例。Rh血型不合者3例,占7.32%,其中2例由抗-D引起,1例由抗-E引起。41例新生儿溶血病的患者中,直接抗人球蛋白试验阳性者20例,阳性率为48.78%,游离试验阳性者36例,阳性率为87.80%,放散试验阳性者41例,阳性率为100%。结论母婴血型不合的新生儿溶血病主要发生于ABO血型系统,以母亲为O型,患者为A型或B型最为常见；放散试验对新生儿溶血病的诊断最有价值。     

平卧菊三七提取物抗氧化活性研究与抗氧化特征成分的HPLC-MS/MS分析

目的:采用DPPH体系测定平卧菊三七地上部分不同极性部位提取物的抗氧化活性,并利用液质联用(HPLC-MS/MS)技术分析了活性较高的乙酸乙酯部位的抗氧化特征性成分。方法:对平卧菊三七地上部分提取物用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位及水部位。考察平卧菊三七地上部分不同极性部位提取物对清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的能力以及通过液质联用电喷雾四级杆飞行时间质谱仪(HPLC-ESI-Q-TOF-MS)技术对其活性部位中的化学成分进行定性分析。采用液质联用(LC-MS/MS),C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)以甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,使用ESI负离子模式下采集数据。通过质谱数据分析,并与对照品及文献对照,对其进行成分鉴定。结果:平卧菊三七地上部分不同极性提取物对DPPH自由基都具有清除力,其中乙酸乙酯部位的清除能力最强。通过其质谱数据分析,并与对照品及相关文献对照,共鉴定出11个化合物。结论:应用DPPH抗氧化活性筛选及HPLC-ESI-Q-TOF-MS技术能够快速准确地发现平卧菊三七地上部分抗氧化活性成分,为进一步研究平卧菊三七的药效物质基础提供参考。     

基于网络药理学探讨“红花-桃仁”药对防治冠心病的作用机制＊

目的 采用网络药理学的方法，筛选“红花-桃仁”药对防治冠心病的作用靶点，揭示“红花-桃仁”防治冠心病的中医配伍机制。方法 通过查阅文献（PubMed、CNKI）、中药系统药理学数据库（TCMSP）检索“红花-桃仁”的所有化学成分，以ADME参数（OB ≥ 30％和DL ≥ 0.15）及药效活性为标准，筛选“红花-桃仁”的活性化合物，然后通过BATMAN-TCM数据库，筛选活性化合物的作用靶点，建立靶点数据集；使用 Cytoscape3.6.1软件构建“活性化合物-靶点-疾病”复杂网络关系图；运用STRING数据库、生物学信息注释数据库（DAVID）进行蛋白互作关系分析、基因本体（GO）功能富集分析和基于京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析研究其防治冠心病的配伍机制。结果 共检索出255个化合物，其中38个化合物作为活性化合物；共检索出718个作用靶点，通网络拓扑特征评价筛选出10个潜在作用靶点与药对防治冠心病的配伍机制最为密切，利用DAVID数据库对10个潜在作用靶点进行基因GO功能富集分析和KEGG通路富集分析，筛选出66个生物过程和18条信号通路参与“红花-桃仁”药对防治冠心病的作用。而与“红花-桃仁”药对防治冠心病最为密切的信号通路包括肿瘤坏死因子信号通路、疟疾、非洲锥虫病、NOD样受体信号通路等，同时其主要涉及的生物过程包括脂多糖介导的信号通路、序列特异性DNA结合转录因子活性的正调控、蛋白磷酸化的正调控、蛋白激酶B信号转导、一氧化氮生物合成过程的正调控等；其防治冠心病的机制主要是通过上调或下调这些生物过程和信号通路，发挥多成分、多靶点、多途径相须协同增效的生物学效应。结论 网络药理学为揭示“红花-桃仁”防治冠心病的中医配伍机制提供了新的思路和方法，也为“红花-桃仁”药对的深入研究及开发利用提供了现代科学内涵。     

2-羟基-1-萘醛缩对氨基水杨酸希夫碱铬配合物的合成及体外抗肿瘤活性研究

目的合成2-羟基-1-萘醛缩对氨基水杨酸希夫碱铬配合物药物并研究其体外抗肿瘤作用。方法采用常规加热回流法合成化合物,利用紫外吸收、红外光谱、元素分析等方法对其进行表征。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法考察合成的药物对人肝癌细胞HepG-2、人结肠腺癌细胞LS174T、人胃腺癌细胞SGC-7901增殖的抑制作用。结果铬配合物的组成为[C_(36)H_(26)N_2O_8Cr]·2H_2O;对HepG-2、LS174T和SGC-7901细胞都有不同程度的抑制作用,并呈现良好的剂量-效应关系,对HepG-2、LS174T的活性明显大于SGC-7901;对HepG-2、LS174T和SGC-7901癌细胞的半数抑制浓度分别为0.008 0μmol/L、0.012 5μmol/L和0.022 5μmol/L。结论 2-羟基-1-萘醛缩对氨基水杨酸希夫碱铬配合物能抑制Hep G-2、LS174T和SGC-7901细胞的生长,在体外有良好的抗肿瘤活性。     

中药活性成分对肿瘤细胞周期基因的调控作用

细胞周期基因异常表达是肿瘤细胞携带缺陷基因无限增殖的关键，是具有巨大潜力的临床治疗靶点。中药活性成分因其抗癌效果显著，不良反应少等优点而被广泛关注。研究显示有中药活性成分可调控Cyclin、CDK和CKI等基因表达，而抑制肿瘤细胞生长，诱导细胞凋亡。本研究旨在为中药活性成分抗癌治疗的进一步临床应用提供药效基因分子生物学基础。     

基于黄酮类成分含量构成特征和体外抗病毒活性的不同产地黄芩的质-效评价研究

目的:评价黄芩道地药材与非道地药材中主要黄酮类成分含量构成特征及其抗病毒活性,以探讨黄芩药材的质-效关系及药效物质基础。方法:制备8批不同产地黄芩(S1~S8)的水提物冻干粉,采用超高效液相色谱法测定水提物中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素等4种黄酮类成分的含量并计算其含量构成比。按不同产地黄芩的黄酮类成分含量构成比,制备上述4种成分混合物作为对应的黄酮类成分模拟样品(E1~E8)。以利巴韦林为阳性对照,采用MTT法和细胞病变程度法,考察8批黄芩水提物样品及其对应的模拟样品对人喉癌细胞Hep-2的半数有毒浓度(TD50)和对呼吸道合胞病毒(RSV)的半数抑制浓度(IC50),并计算治疗指数(TI)。采用SPSS 17.0软件对黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素含量与其抗RSV活性(IC50值)进行Pearson相关性分析。结果:样品S4(产地为河北承德)的黄芩苷、汉黄芩苷含量最高,样品S6(产地为内蒙古-2)的黄芩素、汉黄芩素含量最高;上述4种成分含量最低的分别为样品S6、S6、S7(产地为北京)、S4。样品S4中黄酮苷类成分含量较高,相应的苷元类成分含量较低,其黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量构成比为1∶0.224∶0.111∶0.013;样品S6中黄酮苷类成分含量较低,相应的苷元类成分含量较高,上述4种成分的含量构成比为1∶0.241∶0.713∶0.106。不同产地黄芩水提物对Hep-2细胞的TC50均高于50μg/mL,对RSV的IC50为11.11~51.74μg/m L,TI为1.86~5.20;其对应的黄酮类成分模拟样品的TC50为23.11~52.23μg/mL,对RSV的IC50为4.87~14.61μg/mL,TI为1.85~4.75。道地产区(河北承德)黄芩(S4)的水提物及其对应模拟样品(E4)的抗RSV作用最强。相关性分析显示,4种黄酮类成分的含量与其抗病毒活性的相关系数均小于0.5,两者无显著相关性。结论:当黄芩中4种主要黄酮类成分的含量构成比为1∶0.224∶0.111∶0.013时,其对RSV的抑制作用较强。道地产区黄芩样品具有较优的黄酮类成分构成特征,该特征可能是道地药材发挥最佳抗病毒疗效的重要物质基础。     

中国南海石珊瑚Stylophora pistilata化学成分研究

目的 研究中国南海石珊瑚Stylopgora Stylophora pistillata的化学成分。方法 运用硅胶、凝胶(Sephadex LH-20)等多种柱色谱手段对化合物进行分离纯化；利用核磁共振、质谱等波谱学手段并结合其理化性质及文献数据鉴定化合物的结构。结果 从石珊瑚Stylopgora Stylophora pistillata的乙醇提取物中共分离鉴定了8个单体化合物：1,3-十四烷酸甘油二酯（1），正二十五烷（2），正二十三烷（3），肉豆蔻酸（4），2, 2"-氧代双(1, 4-二叔丁苯)（5），(R)-2-乙基己醇（6），2, 2"-bis(4-hydroxyphenyl)propane bis(2,3-epoxypropyl)ether（7）和5-hydroxy-3,4-dimethy-5- pentyl-2(5H)-furanone（8）。结论 化合物1～8均为首次从该石珊瑚中分离得到。细胞毒活性测试结果表明，化合物7对人慢性髓原白血病细胞（K562）、人肝癌细胞（BEL-7402）、人胃癌细胞（SGC-7901）、人肺癌细胞（A549）和人宫颈癌细胞(Hela)的增殖显示出一定的生长抑制活性，其余化合物对上述肿瘤细胞均无生长抑制活性。     

细胞程序性死亡-配体1基因启动子区rs10815225多态性与结直肠癌的关联研究

目的探讨位于细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)基因启动子区的rs10815225多态性与结直肠癌的相关性。方法直接测序法分析215例结直肠癌患者和236例体检健康者rs10815225多态性,定量PCR检测65例结直肠癌组织中PD-L1 mRNA的表达变化。结果与GG基因型相比,CG基因型显著降低了结直肠癌的发病风险(OR=0.48,95%CI 0.28~0.83,P=0.01)。双荧光素酶报告基因结果显示,与rs10815225G等位基因相比,rs10815225C对应的荧光素酶活性显著降低(P<0.05)。基因型—表型结果显示,携带rs10815225CG基因型结直肠癌患者中PD-L1 mRNA表达明显低于GG基因型携带者(P<0.05)。结论PD-L1基因启动子区rs10815225CG基因型可能通过降低基因转录活性和PD-L1 mRNA表达,从而降低中国汉族人群结直肠癌的发病风险。     

新生儿血型鉴定困难的探讨

目的探讨分析疑似B亚型的ABO溶血新生儿的血型。方法对患儿进行新生儿溶血病检测,对患儿ABO血型进行血清学鉴定和基因检测。结果 ABO血型血清学鉴定疑似B3,基因检测结果为B101/O01基因型。结论新生儿ABO血型鉴定困难时可以通过基因检测技术来进一步确认,待年龄到一周岁以后复查血型来验证为佳。