从现代生物学角度探讨动脉粥样硬化“痰浊-痰结-痰瘀”病机演变规律

中医认为脾失健运、痰瘀互结是动脉粥样硬化的关键病机。"痰浊-痰瘀-痰结"在动脉粥样硬化(AS)病机演变过程中发挥重要作用,体现了AS形成的中医病机及演变特点。基于古今文献梳理,根据AS发展的不同阶段,结合"痰"与"瘀"不同阶段呈现的交互状态,诠释在现代知识医学背景下AS的"痰浊-痰瘀-痰结"理论内核,为中医药防治AS的研究提供理论依据及研究思路。     

香砂六君子汤调控CircRNA-0067835对脾虚高脂血症大鼠胆固醇外排的影响

目的 探讨香砂六君子汤对脾虚高脂血症大鼠脂质沉积的影响及分子生物学机制.方法 30只SD大鼠随机分成空白对照组、高脂组、脾虚高脂组、香砂六君子汤高剂量组及香砂六君子汤正常剂量组.使用不节饮食加游泳直至力竭的复合方法15 d,建立脾虚模型.随后饲喂高脂饲料10周,检测大鼠血脂水平,确定高脂血症模型复制成功后,香砂六君子汤...     

左、右归丸对大鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导中转化生长因子β1及Smad2/3的影响

背景：滋补肾阴左归丸、温补肾阳右归丸均可协同诱导剂诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,但其机制尚有待探讨。 目的：观察左、右归丸含药血清对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中转化生长因子β1及其信号转导蛋白Smad2/3表达的影响。 方法：运用全骨髓贴壁法分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞;分别以空白血清对照组,左归丸、右归丸、阳性对照药补佳乐制备的大鼠含药血清加诱导剂（地塞米松、维生素C、β-甘油磷酸钠）,以及诱导剂组为对照共5组对骨髓间充质干细胞进行干预。采用Western blot法检测Ⅰ型胶原蛋白表达,用免疫组化法检测转化生长因子和Smad2/3在细胞内的表达。 结果与结论：左归丸、右归丸含药血清诱导骨髓间充质干细胞成骨后Ⅰ型胶原蛋白、转化生长因子β1、Smad2/3蛋白表达高于空白组、诱导剂组,差异有显著性意义（P〈0.05）,且左归丸优于右归丸（P 〈0.05）。提示左、右归丸含药血清能通过转化生长因子β1调节Smad2/3信号通路促进骨髓间充质干细胞成骨分化,且左归丸组效果更好,表明中医“滋肾阴”法更能有效的促进骨髓间充质干细胞的成骨分化。     

高血压阴虚证大鼠主动脉铁死亡相关基因表达研究

目的探究高血压阴虚证大鼠主动脉铁死亡的潜在机制。方法 10只SPF级WKY大鼠作为对照组。将20只SPF级SHR大鼠随机分为两组,每组10只,分别为高血压组、高血压阴虚证组。高血压阴虚证组采用温燥伤阴法复制阴虚证模型,造模药物由淡附片、肉桂、吴茱萸组成,3种药物按照1∶1∶1比例混合,煎煮浓缩,每毫升药液含生药1 g,按照1 mL/100 g灌胃,灌胃30 d。实验结束后,HE染色观察大鼠主动脉组织形态,RT-qPCR法观察主动脉组织铁死亡相关因子p53、GPX4及xCT/SLC7A11 mRNA水平,WB法观察主动脉组织铁死亡相关因子p53、GPX4及xCT/SLC7A11蛋白表达情况。结果 HE染色显示高血压组和高血压阴虚证组血管内皮细胞肿胀,高血压阴虚证组损伤更显著。与对照组相比,高血压组和高血压阴虚证组主动脉组织p53 mRNA和蛋白表达水平显著上升,GPX4、xCT/SLC7A11 mRNA和蛋白表达水平显著下降。与高血压组相比,高血压阴虚证组主动脉组织p53 mRNA和蛋白表达水平显著上升,GPX4、xCT/SLC7A11 mRNA和蛋白表达水平显著下降。结论高血压阴虚证大鼠主动脉铁死亡程度更显著,血管内皮损伤更严重。     

二陈汤合桃红四物汤含药血清对ox-LDL诱导内皮细胞损伤的保护作用及机制

目的观察二陈汤合桃红四物汤含药血清对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮细胞损伤的保护作用并探讨其可能的机制。方法培养EA.hy926细胞,随机分为对照组、ox-LDL组、干预组、抑制剂组。流式细胞仪检测各组细胞凋亡水平,比色法检测细胞内丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性,ELISA检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平,Western blot检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化AKT(p-AKT)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达水平。结果与对照组比较,ox-LDL组细胞上清液中TNF-α和IL-6水平显著升高(P0.01),细胞内MDA含量显著升高(P0.01),SOD活性明显降低(P0.05),上清液中NO水平显著降低(P0.01),活性氧(ROS)含量和细胞凋亡率明显升高,PI3K、eNOS蛋白表达水平和AKT蛋白磷酸化水平显著降低(P0.01)。与ox-LDL组比较,干预组细胞上清液中TNF-α和IL-6水平显著降低(P0.01),细胞内MDA含量显著降低(P0.01),SOD活性明显升高(P0.05),上清液中NO水平显著升高(P0.01),ROS含量和细胞凋亡率明显降低,PI3K、eNOS蛋白表达水平和AKT蛋白磷酸化水平显著升高(P 0.01)。与干预组比较,抑制剂组细胞上清液中TNF-α和IL-6水平显著升高(P0.01),细胞内MDA含量显著升高(P0.01)、SOD活性明显降低(P0.05),上清液中NO水平明显降低(P0.05),细胞内ROS含量升高,PI3K、eNOS蛋白表达水平和AKT蛋白磷酸化水平显著降低(P0.01)。结论二陈汤合桃红四物汤含药血清能有效保护ox-LDL诱导的内皮细胞损伤,其机制可能与激活PI3K/AKT/eNOS信号通路有关。     

化瘀祛痰方对动脉粥样硬化家兔肝脏细胞线粒体自噬相关基因表达的影响

目的:通过观察化瘀祛痰方调控线粒体自噬相关基因表达对动脉粥样硬化家兔肝脏脂质沉积的影响,从线粒体自噬的角度揭示化瘀祛痰方干预动脉粥样硬化的分子生物学机制。方法:普通级健康雄性新西兰纯种白兔60只,随机分为正常对照组15只,造模组45只,正常组喂饲普通饲料,造模组喂饲高脂饲料,自由摄食,饮水不限。8周后,将造模组45只家兔随机分为模型组、化瘀祛痰组、辛伐他汀组,化瘀祛痰组、辛伐他汀组给予相应正常组及模型组给予等量生理盐水。四周后,腹主动脉取血,分离血清,全自动生物化学分析仪检测血清中TC,TG,LDL-C及HDL-C的含量,HE染色比较各组兔肝组织结构和形态变化,Western-bolt检测各组兔肝组织自噬相关蛋白Clp X,PHB1及Sir T3的表达。结果:与正常组相比,模型组血清中TC,TG,LDL-C水平明显升高、HDL-C水平明显降低;与模型组相比,化瘀祛痰组及辛伐他汀组血清中TC,TG,LDL-C水平明显降低、HDL-C水平明显升高。HE染色显示正常组家兔肝细胞索排列正常,肝细胞形态正常,核圆、大、居中,胞浆内无脂滴蓄积,小叶内无炎症细胞浸润;模型组家兔肝脏脂肪变性明显,肝细胞肿大变圆,胞浆疏松,内含大的脂肪滴,部分细胞可见细胞核挤向胞膜,细胞浆内可见大小不等的圆形脂肪空泡和炎性细胞;化瘀祛痰组及辛伐他汀组家兔肝脂肪变性的程度降低,脂质空泡的数量减少,肝细胞体形态较为正常。与正常组相比,模型组家兔肝组织中细胞自噬及线粒体自噬相关蛋白Clp X,PHB1及Sir T3表达降低,化瘀祛痰组及辛伐他汀组的家兔肝组织中细胞自噬及线粒体自噬相关蛋白Clp X,PHB1及Sir T3的表达明显升高。结论:化瘀祛痰方可能通过调控线粒体自噬相关基因改善动脉粥样硬化家兔肝脏脂质沉积。     

养胃解毒合剂对脓毒症模型大鼠肠屏障功能的影响与机制研究

目的:从肠屏障功能角度探讨养胃解毒合剂治疗脓毒症的作用机制。方法:140只SPF级健康雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药正常剂量组、中药高剂量组、西药组、西药+中药正常剂量组、西药+中药高剂量组。采用HE染色技术观测各组大鼠肠道结构,分别采用实时荧光定量PCR技术与Western Blot技术检测肠屏障功能相关基因mRNA与蛋白表达。结果:(1)形态学结果显示:脓毒症模型大鼠肠组织细胞水肿严重,大量炎症细胞浸润,中药高剂量组与西药+中药高剂量组水肿明显改善,炎症细胞明显减少。(2)Western Blot与PCR结果显示:与正常组比较,模型组Occludin、Claudin-1和ZO-1基因mRNA与蛋白表达显著下调;与模型组比较,3种基因mRNA与蛋白在西药组、中药高剂量组、西药+中药正常剂量组、西药+中药高剂量组表达均显著上调;与西药组比较,西药+中药高剂量组Claudin-1和ZO-1基因mRNA与蛋白表达显著上调,Occludin蛋白表达显著上调。结论:高剂量养胃解毒合剂能够改善脓毒症大鼠的肠道屏障功能,与西药合用提高西药疗效,可能是通过上调肠组织Occludin、Claudin-1和ZO-1基因mRNA与蛋白表达水平实现的。     

基于《内经》“心合小肠”理论探讨肠道菌群与冠心病的关系

"心合小肠"理论出自《灵枢·本输》,意为心与小肠互为表里,在生理功能上相互配合,在病理上相互影响,在经络上相互联系。目前研究表明肠道菌群紊乱与冠心病的发生发展存在密切关系,文章试从心与小肠的生理、病理和经络上相互关系三个方面来阐述"心合小肠"的理论含义,并从中医及现代医学两方面探讨肠道菌群与冠心病的关系,为"从小肠论治冠心病"提供理论依据。     

绞股蓝总苷通过miR-210/ISCU途径调节线粒体能量代谢对ApoE-/-AS小鼠的影响及机制

目的 探讨绞股蓝总苷通过影响miR-210/铁硫簇组装蛋白(ISCU)途径,调控线粒体能量代谢,改善动脉粥样硬化模型小鼠主动脉脂质沉积的作用机制。方法 30只健康ApoE^-/-小鼠随机分为模型组、绞股蓝总苷组和辛伐他汀组,每组10只。10只C57BL/6J小鼠作为正常组。模型组、绞股蓝总苷组和辛伐他汀组采用高脂饲料喂养12 w。绞股蓝总苷组和辛伐他汀组分别采用绞股蓝总苷[2.973 g/(kg·d)]和辛伐他汀[2.275 g/(kg·d)]灌胃4 w,模型组、正常组灌胃给予等量生理盐水。造模结束后,全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察动脉粥样硬化斑块形成;采用紫外吸收法检测主动脉线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ;实时荧光定量-聚合酶链反应(PCR)检测主动脉miR-210、ISCU及线粒体DNA(mtDNA) mRNA表达;采用Wes全自动Western印迹定量分析系统检测线粒体能量代谢相关蛋白ISCU、mtDNA表达。结果 与正常组比...     

基于网络药理学和分子对接的补中益气汤治疗桥本甲状腺炎的作用机制研究

目的 基于网络药理学探讨补中益气汤治疗桥本甲状腺炎的作用机制。方法 以TCMSP数据库为基础,根据ADME筛选补中益气汤中黄芪、白术、人参、当归、陈皮、柴胡、升麻、甘草8味中药的主要活性成分,并以SwissTargetPrediction数据库作为补充预测相关作用靶点,通过Genecards、DiGSeE、DisGeNET、CTD、NCBI和MalaCards数据库获取桥本甲状腺炎相关靶点,通过Cytoscape3.9.0软件构建“中药-成分-靶点网络”网络,并利用cytoHubba插件得到核心靶点;应用STRING数据库进行蛋白质相互作用分析;依托Metascape平台进行KEGG信号通路和GO生物富集分析;最后利用CB-DOCK对成分及核心靶点进行分子对接验证。结果 补中益气汤治疗桥本甲状腺炎的核心活性成分164个,包括槲皮素、山柰酚、豆甾醇和β-谷甾醇等;核心靶点177个,包括JUN、MAPK1、MAPK14、AKT1、STAT3和IL-6等;共涉及2281个生物学过程、117个细胞组成和196个分子功能;富集通路196条,包括PI3K-Akt、MAPK、FoxO、HIF-1和T...