小儿支气管哮喘的中西医病机及治疗

小儿支气管哮喘(Bronchial Asthma)(哮喘)是儿童常见的慢性呼吸道疾病之一。哮喘以慢性气道炎症为特征,为一组异质性疾病,这与中医"宿根"理论有相通之处。T细胞分化和功能异常是哮喘慢性气道炎症的免疫机制之一,microRNA可能是在基因层面调控T细胞的分化和功能。参与哮喘气道炎症的发生与发展。中医中药可能通过抑制慢性气道炎症从而起到干预小儿支气管哮喘的作用。     

绞股蓝不同有效成分对ox-LDL诱导内皮细胞自噬效应的影响

目的:探讨绞股蓝不同成分(绞股蓝总皂苷、绞股蓝皂苷XILX、人参皂苷GRb3)对氧化低密度脂蛋白诱导内皮细胞自噬效应的影响。方法:采用实时荧光定量PCR法检测自噬相关基因ULK1、Beclin 1的表达;免疫组织化学法分别检测LC3蛋白的表达;Western blotting法检测自噬相关蛋白P-mtor、ULK1、Beclin 1、LC3的表达。结果:与空白对照组相比,模型组ULK1、Beclin 1 mRNA表达减弱;LC3、Beclin 1蛋白表达减弱,P-mtor蛋白表达增多,ULK1蛋白表达减弱,自噬减弱。而Gps、Gp XILX、GRb3处理细胞后,Gps组较模型组ULK1、Beclin 1mRNA表达增强;LC3、Beclin 1蛋白表达增强,P-mtor蛋白表达减少,ULK1蛋白表达增加,自噬增强;GRb3组较模型组Beclin 1 mRNA表达增强;LC3、Beclin 1蛋白表达增强,P-mtor蛋白表达减少,自噬增强;Gp XILX组较模型组,Beclin 1 mRNA表达增加;P-mtor蛋白表达减少,Beclin 1蛋白表达增加。结论:绞股蓝总皂苷、绞股蓝皂苷XILX、人参皂苷GRb3能不同程度的上调ox-LDL诱导内皮细胞的自噬效应,降低内皮细胞损伤。     

补气健脾法改善自身免疫甲状腺炎小鼠免疫失常机制研究

目的:观察益气化痰活血方对自身免疫甲状腺炎(AIT)小鼠甲状腺miR-155/SOCS1/STAT3信号通路的影响,探讨中医补气健脾法干预AIT部分免疫学机制。方法:60只8周龄NOD.H-2h4小鼠随机分为6组。正常组(NG)饲以蒸馏水,模型组(MG)、西药组(硒酵母片,Se G)、益气化痰活血方高剂量组(YG-1,36.40 g·Kg~(-1)·d~(-1))、益气化痰活血方中剂量组(YG-2,18.20 g·Kg~(-1)·d~(-1))、益气化痰活血方低剂量组(YG-3,9.10 g·Kg~(-1)·d~(-1))饲以含0.05%碘化钠水8周成模,再灌胃给药8周。光镜下观察甲状腺细胞形态;RT-PCR法检测小鼠甲状腺miR-155、白细胞介素-17(IL-17)mRNA表达;Western blot法测定小鼠甲状腺细胞因子信号抑制因子(SOCS1)、p-STAT3蛋白表达。结果:(1)与NG组比较,MG组甲状腺淋巴细胞浸润明显;与MG组比较,各给药组甲状腺炎均有不同程度改善。(2)与NG组比较,甲状腺IL-17、miR-155mRNA表达显著上调(P0.01),甲状腺p-STAT3蛋白显著升高(P0.01);与MG组比较,Se G、YG-1、YG-2组甲状腺IL-17mRNA表达均显著下调(P0.01);与Se G组比较,YG-2组IL-17mRNA下调更明显(P0.01);与MG组比较,各给药组miR-155mRNA均显著下调(P0.01),其中Se G、YG-2组无统计学差异(P0.05);各给药组p-STAT3均显著下调(P0.01),与Se G组比较,YG-2组下调更明显(P0.05)。(3)与NG组比较,MG组甲状腺SOCS1蛋白明显下降(P0.01),与MG组比较,Se G、YG-2、YG-3组SOCS1蛋白水平显著升高(P0.01),YG-1组SOCS1蛋白上调(P0.05)。结论:中医补气健脾法可能通过调控miR-155/SOCS1/STAT3信号通路改善AIT免疫失常。     

基于糖脂代谢基因探讨茯苓多糖干预乳腺癌细胞增殖的分子机制＊

目的 筛选乳腺癌中关于糖脂代谢的基因并研究茯苓多糖对其基因表达的影响。方法 选取GEO数据库中包含乳腺癌患者及匹配癌旁组织的2个基因数据集，取差异基因交集。应用DAVID6.8数据库对交集差异表达基因进行基因本体功能分析，在生物学过程中选取糖脂代谢相关基因，构建蛋白相互作用网络。采用CCK8法筛选茯苓多糖对乳腺癌细胞MCF-7的最佳给药浓度。RT-qPCR检测对照组与经茯苓多糖处理组MCF-7细胞中糖脂代谢相关基因的表达。结果 利用GEO2R分析数据后共取到交集差异基因27个。GO功能分析显示，生物学功能主要涉及糖异生、糖代谢过程、脂质代谢过程、脂质储存、脂肪酸代谢过程，共选取到7个糖脂相关基因（PCK1、RBP4、CD36、LEP、LPL、CAV1、ACACB）。RT-qPCR结果显示7个基因在细胞内表达水平经茯苓多糖干预后较对照组均明显变化。结论 研究表明PCK1、RBP4、CD36、LEP、LPL、CAV1、ACACB这些基因是乳腺癌糖脂代谢的关键基因，茯苓多糖能干预其在乳腺癌细胞中的表达。     

基于“脾不升清、脉道不利”理论探讨线粒体功能障碍对动脉粥样硬化的影响及机制

随着生活水平的提高,饮食结构的改变,动脉粥样硬化的发病率逐年上升,现代研究表明脾的功能与线粒体功能息息相关,脾功能失调可导致动脉粥样硬化,线粒体功能失调亦可导致动脉粥样硬化,基于"脾不升清,脉道不利"理论讨论线粒体功能障碍与动脉粥样硬的影响。     

基于网络药理学探讨桂枝加葛根汤防治血脂异常的机制研究及实验验证＊

目的 通过网络药理学技术预测桂枝加葛根汤防治血脂异常可能作用靶点和机制，并进行动物实验验证。方法 通过中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）或中药分子机制的生物信息学分析工具（BATMAN-TCM）检索葛根，桂枝，白芍，生姜，大枣，甘草的化学组分，活性成分的筛选标准以口服生物利用度（OB）>30%，化合物类药性（DL）>0.18或Score cutoff≥20。已筛选出的靶点名称应用数据库Uniprot对其标准化；同时在Genecards和OMIM两个数据库中检索血脂异常相关基因，并将上述预测靶基因合并作为疾病相关基因数据。采用Draw Venn Diagram在线程序将桂枝加葛根汤和血脂异常的靶基因取交集，获得桂枝加葛根汤和血脂异常的共同靶点。采用Cytoscape3.7.1绘制桂枝加葛根汤药物成分和血脂异常疾病靶点的网络图。在R3.6.0软件中安装程集包ggplot2、colorspace、clusterProfiler、pathview、stringi、DOSE等进行GO富集分析和KEGG富集分析。并进一步采用动物实验进行验证，选取SPF级SD雄性大鼠，运用高脂饲料喂养建立高脂血症模型，桂枝加葛根汤干预30天后检测各组大鼠TC、TG、HDL-C、LDL-C水平，qRT-PCR法对TNF信号通路上的关键分子IL-6、IL-1β、PTGS2、MAPK1、MAPK3、MAPK8进行验证。结果 预测出桂枝加葛根汤可能作用靶点222个，动脉粥样硬化疾病相关基因1250个，桂枝加葛根汤和血脂异常的共同靶点119个。GO功能富集分析结果表明分子功能相关条目114个，细胞组分相关条目70个，生物过程相关的条目2143个。同时在KEGG通路富集到165条信号通路。然后对三组间大鼠的血脂水平进行比较，与正常组相比，模型组大鼠血清中HDL-C水平显著降低（P<0.01），LDL-C、TG、TC水平显著升高（P<0.01），可以证明造模成功；与模型组相比，桂枝加葛根汤组血清中HDL-C水平显著升高（P<0.05），LDL-C、TG、TC水平显著降低（P<0.01，P<0.05），说明桂枝加葛根汤可以改善大鼠血脂水平。与正常组比较，模型组肝脏组织PTGS2、MAPK1、MAPK3、MAPK8、IL-6、IL-1β mRNA表达均显著上升（P<0.01）；与模型组比较，桂枝加葛根汤组肝脏组织PTGS2、MAPK1、MAPK3、MAPK8、IL-6、IL-1βmRNA表达上均显著降低（P<0.01，P<0.05）。结论 桂枝加葛根汤通过多靶点、多通路治疗血脂异常，为进一步深入探讨其分子机制奠定基础，拓宽经方桂枝加葛根汤临床应用范围，为后续临床治疗血脂异常提供新的思路。     

中医药对缺血再灌注损伤心肌保护作用研究进展

缺血性心脏病是临床常见病、多发病,其中急性心肌梗死严重威胁着全球人类的身体健康,目前主要的治疗手段是通过血管再通,实现心肌再灌注,但是在冠脉缺血基础上恢复血流时,组织细胞损伤反而加重,甚至发生不可逆性损伤,此现象称为心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusioninjury,MIRI)。MIRI严重影响缺血性心脏病的治疗效果,加重患者身体负担,有效防治MIRI成为临床工作中亟待解决的问题。近年来中药广泛应用于MIRI,对心肌细胞起到了保护作用,目前现代药理学认为其作用机制主要与减轻心肌细胞线粒体损伤、调节一氧化氮(NO)的表达、减少心肌细胞凋亡、抑制炎症反应、调控细胞自噬等有关,该文对上述作用机制进行归纳总结。     

基于线粒体融合-裂解探讨化瘀祛痰方对动脉粥样硬化家兔心肌纤维化的抑制作用

目的:探讨化瘀祛痰方通过影响线粒体融合-裂解对动脉粥样硬化家兔心肌纤维化的抑制作用。方法:选取SPF级健康雄性家兔36只,随机选取6只为正常组,给予普通颗粒饲料;另30只采用高脂饲料建立动脉粥样硬化模型。模型复制成功后,随机分为模型组、化瘀祛痰方低、中、高剂量组(4.0,8.0,16.0 g·kg^-1)及辛伐他汀组(1.4 mg·kg^-1),各6只。各给药组按剂量给予相应药物,连续给药4周。全自动生物化学分析仪检测各组家兔血清血脂水平,马松(Masson)染色法观察各组家兔心肌纤维化程度,免疫组化法检测心肌组织线粒体融合蛋白1(Mitofusin1),线粒体融合蛋白2(Mitofusin2),视神经萎缩蛋白1(Opa1),发动蛋白相关蛋白1(Drp1),分裂蛋白1(Fis1)表达水平。结果:与正常组比较,模型组家兔血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平明显升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显降低,心肌组织Mitofusin1,Mitofusin2,Opa1表达水平明显降低,Drp1,Fis1表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),与模型组比较,辛伐他汀组及化瘀祛痰方低、中、高剂量组家兔血清TC,TG,LDL-C水平明显降低,HDL-C水平明显升高,心肌组织Mitofusin1,Mitofusin2,Opa1表达水平明显升高,Drp1,Fis1表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),与化瘀祛痰方高剂量组比较,辛伐他汀组及化瘀祛痰方低、中剂量组血清TC,TG,LDL-C水平明显升高,HDL-C水平明显降低,心肌组织Mitofusin1,Mitofusin2,Opa1表达水平明显降低,Drp1,Fis1表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:化瘀祛痰方能有效调节血脂,抑制粥样硬化家兔心肌纤维化,且化瘀祛痰方剂量越高效果越明显,推测其作用可能与调节心肌细胞线粒体融合-裂解相关蛋白Mitofusin1,Mitofusin2及Opa1,Drp1,Fis1表达有关。     

化瘀祛痰方干预MAPK信号通路对AS小鼠心功能的影响及其机制研究

目的 探讨化瘀祛痰方通过干预MAPK信号通路改善心功能延缓AS的作用机制。方法 将10只C57BL/6/J小鼠作为正常组,50只ApoE-/-小鼠喂食高脂饲料8周后随机分为,模型组、丹参酮ⅡA组(简称丹参组)、化瘀祛痰方低剂量组(简称化瘀方低组)、化瘀祛痰方中剂量组(简称化瘀方中组)、化瘀祛痰方高剂量组(简称化瘀方高组),每组10只。在造模8周后,以对应药物灌胃8周。超声检测小鼠心功能,取血与心脏,采用全自动生化分析仪检测各组小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)含量,油红O染色观察小鼠肝脏脂质沉积情况,ELISA方法检测小鼠心肌组织TNF-α、ICAM-1、VCAM-1含量,Western Blot法检测小鼠心肌组织JNK、p38、ERK蛋白的磷酸化水平。结果 与正常组比较,模型组小鼠LVIDd及LVIDs增大(P0.05),LVEF及LVFS均显著降低(P0.05);肝脏脂质沉积明显,血清TG、TC、LDL-C水平显著升高(P0.05),HDL-C水平显著降低(P0.05);心肌组织TNF-α、ICAM-1、VCAM-1含量、JNK、p38、ERK的磷酸化水平升高(P0.05);与模型组比较,丹参组、化瘀方低、中、高组LVIDd及LVIDs减小(P0.05),LVEF及LVFS均显著降低(P0.05),肝脏脂质沉积改善,血清TG、TC、LDL-C水平下降,HDL-C水平显著升高,心肌组织TNF-α、ICAM-1、VCAM-1含量、JNK、p38、ERK的磷酸化水平下降(P0.05)。结论 化瘀祛痰方具有通过改善小鼠心功能,延缓AS的作用,其机制与降低TNF-α诱导ICAM-1、VCAM-1的表达,抑制JNK、ERK、p38MAPK等MAPK信号途径引起的炎症反应有关。     

香砂六君子汤对脾虚高脂血症大鼠dyHDL的影响

目的:观察脾虚高脂血症大鼠失功能高密度脂蛋白胆固醇(dyHDL)变化及香砂六君子汤的干预作用,从HDL"质"的变化,揭示香砂六君子汤对脾虚高脂血症大鼠dy HDL的影响及机制。方法:75只SPF级SD大鼠随机分为正常组,高脂组,脾虚高脂组,香砂六君子低、高剂量组(5. 67,11. 34 g·kg-1),脾虚高脂组,香砂六君子低、高剂量组采用饮食不节加力竭游泳的复合方法造模15 d后,正常组喂饲基础饲料,高脂组,脾虚高脂组,香砂六君子、高剂量组喂饲高脂饲料。12周后,香砂六君子低、高剂量组给予相对剂量药物,正常组、高脂组、脾虚高脂组给予相应体积生理盐水。4周后,全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,间苯三酚法检测大鼠D-木糖排泄率,苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏细胞形态变化,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血浆对氧磷酶1(PON1),载脂蛋白A1(apo A1),血清淀粉样蛋白A(SAA)含量,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测大鼠肝脏PON1,apo A1,SAA mRNA表达水平。结果:与正常组比较,高脂组及脾虚高脂组大鼠血清TC,TG,LDL-C水平明显升高(P 0. 05),HDL-C水平明显降低(P 0. 05),高脂组及脾虚高脂组大鼠血浆PON1,apo A1含量明显降低(P 0. 05),SAA含量明显升高(P 0. 05),肝脏组织SAA mRNA显著升高(P 0. 01),PON1,apo A1 mRNA表达显著降低(P 0. 01),高脂组及脾虚高脂组大鼠肝细胞肿大变圆、可见散在的脂肪空泡,且脾虚高脂组大鼠尿D-木糖排泄率明显降低(P 0. 05)。与高脂组及脾虚高脂组比较,香砂六君子汤低、高剂量组血清TC,LDL-C水平明显降低(P 0. 05); HDL-C水平明显升高(P 0. 05),血浆PON1,apo A1含量明显升高(P 0. 05),SAA含量明显降低(P 0. 05),肝脏组织SAA mRNA明显降低(P 0. 05),apo A1 mRNA表达明显升高(P 0. 05),肝脏细胞肿胀明显减轻、脂肪泡沫化减少。与高脂组相比,脾虚高脂组大鼠血浆中PON1,SAA含量明显降低(P 0. 05),肝细胞肿胀明显、泡沫化加重。结论:脾虚状态下高脂血症大鼠脂质紊乱加重,香砂六君子汤干预后紊乱得以纠正,其作用机制可能与调控dy HDL相关mRNA及蛋白表达有关。