温敏型壳聚糖/甘油磷酸钠缓释胰岛素凝胶系统的制备

目的:初步探讨制备温敏性壳聚糖/甘油磷酸钠载胰岛素凝胶系统.方法:应用壳聚糖与甘油磷酸钠制备具有温敏性的载有胰岛素的凝胶体系,从凝胶体系的pH值、粘度测定、胶凝时间研究不同配比、不同pH值对壳聚糖/甘油磷酸钠(CS/β-GP) 体系凝胶化性能的影响.结果:壳聚糖凝胶在室温(25℃)下呈液态,56% 甘油磷酸钠(β-GP)与3%壳聚糖(CS)在pH值6.8-7.2,37℃下凝胶化时间(GT) 从1h缩短到8-12min,凝胶形态良好,并且在负载胰岛素溶液后C/GP凝胶形态未受影响.结论:一定配比CS/GPS 体系在37℃具有快速凝胶化性能,在加入胰岛素后并未改变其温敏特性,为后续的温敏性壳聚糖/甘油磷酸钠载胰岛素凝胶系统的体外释药实验打下了基础.     

壳聚糖基温敏水凝胶对牙周膜成纤维细胞相容性的影响

目的:体外评价壳聚糖季铵盐/甘油磷酸(CS-HTCC/GP)温敏水凝胶的细胞相容性.方法:体外培养人牙周膜成纤维细胞(HPDLCs),采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定不同浓度的CS-HTCC/GP温敏凝胶浸提液对1、3、5d细胞增殖和碱性磷酸酶(ALP)活性的影响.采用扫描电镜和透射电镜观察对细胞超微结构的影响.采用SSPS13.0软件包对数据进行统计学分析.结果:免疫组化显示,培养的细胞波形丝蛋白染色阳性,角蛋白染色阴性,证明体外原代培养细胞及传代细胞均为中胚层组织来源,且无上皮来源细胞混杂.不同浓度的CS-HTCC/GP温敏水凝胶浸提液均有促进HPDLCs增殖的作用,在第3天和第5天,差异有高度显著性(P＜0.001).各组均可提高ALP活性.第2组和第3组在第5天与第1天ALP表达的提高有高度显著差异(P＜0.001).扫描电镜和透射电镜观察水凝胶浸提液对HPDLCs的超微结构无影响.结论:CS-HTCC/GP温敏水凝胶具有良好的细胞相容性,具有用于牙周局部药物释放系统载体及组织工程支架的潜力.     

氟化钠-壳聚糖凝胶对乳牙釉质早期龋再矿化实验观察

目的:探讨氟化钠壳聚糖凝胶促进乳牙釉质早期龋模型再矿化的可行性.方法:乳前牙试件使用乳酸羧甲基纤维素凝胶预处理,制备早期龋模型;早期龋的乳前牙试件随机分成4组(n=6),3组分别进行氟化钠壳聚糖凝胶、壳聚糖空白凝胶、多乐氟处理,1组作为空白对照,处理完成后进行pH循环,SEM、EDS检测循环完成后的试件表面.结果:SEM观察,氟化钠壳聚糖凝胶能更好的保护釉质表层结构不受破坏,而多乐氟和空白对照组,则表现出釉质表层的崩解.同时氟化钠壳聚糖凝胶有更多的矿化物结晶在釉质表面形成.EDS检测钙离子的沉积比例,氟化钠壳聚糖凝胶组明显多于其余各组(P＜0.05).结论:氟化钠壳聚糖凝胶可以提高乳前牙早期龋的再矿化水平.     

神经导管支架修复外周神经损伤的研究与现状北大核心

背景:近些年来,医学和组织工程学突飞猛进的发展为制作神经导管材料提供了更多选择。目的:综述神经导管在外周神经损伤中的应用。方法:由第一作者检索2010至2016年中国知网数据库和PubMed数据库,中文检索词为"神经导管,外周神经",英文检索词为"nerve conduit,peripheral nerve"。结果与结论:制作神经导管的材料,主要分生物型和非生物型2大类,其中生物型主要包括肌肉、羊膜、静脉、小肠黏膜下层等;非生物型材料包括壳聚糖、胶原蛋白、丝素蛋白、聚乳酸、聚己内酯、聚苯胺及硅胶管等。目前,部分材料已被批准进入临床阶段。神经导管在修复周围神经损伤的应用中还存在或多或少的问题,比如,修复缺损的长度受限,力学性能和机械性能与神经再生不完全匹配,降解速度与神经再生速度不一致,神经导管的生物相容性欠佳等。     

羧甲基壳聚糖温敏凝胶诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化北大核心

背景:壳聚糖生物材料能够诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化,壳聚糖衍生物羧甲基壳聚糖是否也能够诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化尚不清楚。目的:探讨羧甲基壳聚糖温敏凝胶对骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的影响及其可能的机制。方法:取传至3代的大鼠骨髓间充质干细胞用不同质量浓度(0,50,100,150,200,500 g/L)羧甲基壳聚糖温敏凝胶浸提液培养,对照组不添加羧甲基壳聚糖温敏凝胶浸提液。MTT法检测不同质量浓度羧甲基壳聚糖温敏凝胶浸提液对骨髓间充质干细胞增殖的影响,Western blot检测150 g/L羧甲基壳聚糖温敏凝胶浸提液对骨髓间充质干细胞NSE、Nestin、GAFP、Vimentin、NF-M、MAP-2、β3-tubulin以及Notch通路信号分子Notch1,Jag1表达水平的影响。结果与结论:(1)羧甲基壳聚糖温敏凝胶浸提液促进骨髓间充质干细胞增殖,在质量浓度为150 g/L时,增殖率达到最高水平;(2)150 g/L羧甲基壳聚糖温敏凝胶组NSE、Nestin、GAFP、Vimentin、NF-M、MAP-2、β3-tubulin的蛋白表达水平明显高于对照组,表明羧甲基壳聚糖温敏凝胶能够诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化;(3)羧甲基壳聚糖温敏凝胶组Notch1和Jag1的蛋白表达水平明显低于对照组,表明其在诱导分化过程中能抑制Notch信号通路的活性。     

壳聚糖液保存人体解剖学标本的实验研究

目的探索对人体无刺激性的标本保存液。方法通过使用以壳聚糖为主要成分的保存液和5%福尔马林溶液传统的保存液,分别对5种人体解剖学标本进行保存一年后作比较,观察标本的组织结构形态、对4种常见细菌的抑制效果及对兔眼的刺激。结果标本的组织切片结构正常,柔软性、吸湿性好,对4种常见细菌的抑制效果较强,对兔眼的刺激明显减小(P0.01)。结论壳聚糖液是一种较为理想的防腐保存液     

载乳铁蛋白壳聚糖微球/nHA/Co复合材料的制备

目的:制备载乳铁蛋白壳聚糖微球/nHA/Co复合材料作为组织工程材料拟修复骨缺损。方法:通过乳化交联法法制备载乳铁蛋白壳聚糖微球,化学沉淀法制备纳米羟基磷灰石,改良酸酶法提取Ⅰ型胶原,应用京尼平交联制备复合材料,SEM检测材料的微观结构,测定壳聚糖微球对乳铁蛋白的载药率和包封率。结果:复合材料及各组成成份扫描电镜观察均具有较好的微观形态,壳聚糖微球对乳铁蛋白的载药率为(1.06±0.06)%,包封率为(88.2±2.9)%。结论:载乳铁蛋白壳聚糖微球/nHA/Co复合材料具有较好的微观形态。     

大鼠骨髓基质细胞促进自体骨形成的实验研究

目的研究自体骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)体外诱导扩增与仿生纳米壳聚糖-胶原复合支架材料(nano chitosan sodium collagen scaffold,NCSCS)复合修复骨缺损的可行性。方法分离纯化Wistar大鼠BMSCs,诱导BM-SCs向成骨细胞(osteoblast,OB)转化,经碱性磷酸酶、茜素红组织化学染色鉴定,将BMSCs复合仿生纳米壳聚糖-胶原复合支架材料(nano chitosan sodium collagen scaffold,NCSCS)进行扫描电镜观察。制作Wistar大鼠胫骨骨缺损模型,缺损处NCSCS-BMSCs复合物移植后观察骨缺损修复成骨情况。结果扫描电镜下BMSCs细胞在仿生纳米壳聚糖-胶原复合支架材料上大面积生长。BMSCs复合仿生纳米壳聚糖-胶原复合支架材料植入2周后,材料周围可见大量纤维组织,并可见成骨细胞和少量新生的骨样基质,新生骨对照组和实验组比较差异显著(P<0.01);植入6周后,可见到材料与新生骨之间相互混杂,中有纤维相间隔,和原有骨界面尚清晰可辨认,材料部分降解,对照组和实验组比较新生骨有统计学差异(P<0.05);植入12周后,材料几乎降解完全,和天然骨组织界面可见新骨形成,对照组和实验组比较新骨形成无统计学差异(P>0.05)。材料降解在各时间段对照组和实验组比较差别不显著(P>0.05)。结论 BMSCs介导NCSCS修复骨缺损优于单纯的NCSCS修复骨缺损,尤以早期效果为好。     

脂肪干细胞复合壳聚糖支架移植对兔退变早期椎间盘内肿瘤坏死因子α、白介素1β的影响

目的观察脂肪干细胞复合可注射温敏型壳聚糖支架移植对退变早期兔椎间盘内肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)含量的影响。方法 24只新西兰大白兔,雌雄不限,随机分为髓核抽吸组、脂肪干细胞壳聚糖支架复合移植组、单纯支架移植组以及单纯椎间盘暴露组。术后2、4、8周分别将每组处死2只兔,使用ELISA方法检测L2-3、L3-4、L4-5、L5-6椎间盘内TNF-α、IL-1β含量。结果 24只动物均存活。髓核抽吸组与单纯椎间盘暴露组相比,TNF-α、IL-1β浓度升高(P<0.05);复合移植组、单纯支架移植组与单纯椎间盘暴露组相比较,TNF-α、IL-1β浓度均降低(P<0.05);复合移植组与单纯支架移植组相比,8周时IL-1β降低(P<0.05)。结论脂肪干细胞与温敏型壳聚糖支架在兔椎间盘退变早期能抑制TNF-α、IL-1β表达,可能减轻炎症反应。     

半乳糖基壳聚糖5氟尿嘧啶纳米粒的制备及其抑制小鼠结肠癌的实验研究

目的:半乳糖基壳聚糖纳米材料与5-氟尿嘧啶(5-FU)合成5-FU纳米粒,并观察其在体内抑制小鼠结肠癌的疗效.方法:将体外培养的C26细胞接种小鼠肝左叶,成瘤后,分别用0.9％氯化钠液、空纳米粒、5-FU和5-FU纳米粒行尾静脉注射,观察5-FU纳米粒的抗肿瘤效果.用酶联免疫吸附试验法检测血清γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-2(IL-2)含量,用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定小鼠脾自然杀伤细胞(NK细胞)和细胞毒性T细胞(CTL细胞)活性.结果:与0.9％氯化钠液组及纳米粒组相比,5-FU组和5-FU纳米粒组的瘤质量显著降低(P＜0.01),尤其5-FU纳米粒组降低更显著(P＜0.01).与其他各组比较,5-FU组小鼠,外周血IFN-γ和IL-2含量均显著降低(P＜0.01),5-FU纳米粒组与0.9％氯化钠液组比较差异无统计学意义(P＞0.05).5-FU组的脾NK细胞和CTL细胞杀伤活性较其他各组显著降低(P＜0.01),5-FU纳米粒组与0.9％氯化钠液组比较未见降低(P＞0.05),纳米粒组NK和CTL杀伤活性0.9％氯化钠液组增高(P＜0.05).结论:5-FU纳米粒治疗结肠癌模型,具有明显抗肿瘤效应,纳米粒材料具有提高机体免疫功能,减低5-FU对机体免疫的抑制作用.