预混顺序对复合型磷酸钙骨水泥晶体特征的影响

目的：探讨基本原料的预混合顺序对复合型磷酸钙骨水泥（CPC）晶型转化和晶体形态的影响。方法：按照不同预混合顺序,以壳聚糖、磷酸四钙、磷酸盐缓冲液及四环素为基本原料,合成复合型磷酸钙骨水泥,采用X射线衍射（X-ray diffraction,XRD）、场发射扫描电镜（FSEM）检测晶体特征。结果：XRD结果显示,壳聚糖及四环素对复合型磷酸钙骨水泥的相转化有抑制效应;FSEM显示,壳聚糖有助于晶体颗粒的凝聚,有利于晶体的有序形成。结论：原料的预混合顺序对复合型磷酸钙骨水泥的晶体结构和相转化存在影响,从而可能影响到材料的生物学活性。     

壳聚糖纳米粒子的制备及其在医药领域的应用

壳聚糖由于其优异的理化性质和生物学活性而受到广泛关注,纳米材料在生物医学领域中表现出良好的应用前景。本文介绍了壳聚糖纳米粒子的制备方法,并对近年来壳聚糖纳米粒子在医药领域的应用进行了综述,最后提出壳聚糖纳米材料在生物医学上应用的展望。     

TST联合壳聚糖痔疮抗菌凝胶治疗混合痔的临床研究

目的探讨TST联合壳聚糖痔疮抗菌凝胶治疗混合痔的临床效果。方法选取80例混合痔患者进行研究,根据治疗方法不同分为试验组和对照组各40例,对照组采用自动痔疮套扎术(RPH术)联合壳聚糖痔疮抗菌凝胶进行治疗,试验组采用选择性痔上黏膜吻合术(TST术)联合壳聚糖痔疮抗菌凝胶治疗,治疗后对两组手术时间、住院时间、住院费用、切口愈合时间、满意度及术后并发症(疼痛、出血、尿潴留、肛门狭窄、水肿、脱垂、肛门功能)进行比较。结果试验组总有效率(97.5%)明显高于对照组(80.0%),差异具有统计学意义(P0.05);试验组手术时间、住院时间、住院费用、切口愈合时间与对照组存在明显差异,具有统计学意义(P0.05);试验组并发症发生率明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);试验组满意度(97.5%)明显高于对照组(80.0%),差异具有统计学意义(P0.05)。结论对混合痔患者进行TST联合壳聚糖痔疮抗菌凝胶治疗可以减少治疗时间,减少并发症发生,满意度比较高。     

胆甾醇琥珀酰基壳聚糖锚定脂质体用作表阿霉素载体的体外实验

背景:多糖"锚定"脂质体在抗肿瘤药物、蛋白以及基因的传输领域有着极其重要的理论及应用价值,国外已有较多机构在进行相关的研究.目的:通过"锚定"的方式制备胆甾醇琥珀酰基壳聚糖锚定脂质体,并以表阿霉素作为模型药物,考察其对包载药物体外释放性质的影响.设计、时间及地点:体外实验,于2006-09/2008-05在天津市生物医学材料重点实验室完成.材料:以壳聚糖为原料,合成胆甾醇琥珀酰基壳聚糖,并采用胶体滴定法测定其胆甾醇基取代度.方法:采用pH梯度法制备表阿霉素脂质体,然后通过共孵育的方法合成了取代度为2.80%,5.58%和8.00%的载药胆甾醇琥珀酰基壳聚糖锚定脂质体.主要观察指标:荧光分光光度计检测药物浓度;透射电镜观察脂质体形态;亚微米粒度及电位分析仪检测脂质体的粒径大小、分布和电位;动态透析法考察包载药物表阿霉素在胆甾醇琥珀酰基壳聚糖锚定脂质体中的体外释放特征.结果:胆甾醇琥珀酰基壳聚糖锚定脂质体为规则球状形态,呈现典型的核壳结构,粒径为245.4～279.7nm,zeta电位为 21.09～ 25.48mV;和载药脂质体及壳聚糖包衣脂质体相比,CHCS锚定脂质体能明显延缓表阿霉素的体外释放,在胆甾醇基取代度2.80%～5.85%范围内,表阿霉素的释放速度随着取代度的增加呈降低的趋势.结论:胆甾醇琥珀酰基壳聚糖锚定脂质体有着比普通脂质体及壳聚糖包衣脂质体更高的稳定性,能显著延缓包载药物的释放速度.     

软骨细胞复合胶原/壳聚糖/β-磷酸三钙层状梯度修复体的体外培养

背景：关节软骨缺损的修复涉及到软骨和软骨下骨的双重修复,需要将骨与软骨组织工程结合起来,构建骨软骨双层支架,或者在同一支架上构建组织工程化骨软骨。目的：观察胶原/壳聚糖/β-磷酸三钙层状梯度修复体对软骨细胞的吸附作用及对细胞生物学性状的影响,评价其作为关节软骨工程支架的可行性。时间及地点：体外细胞学实验,于2007-12/2008-06在广东省构建与检测实验室进行。材料：以胶原、壳聚糖、β-磷酸三钙制备复合支架,上层以胶原/壳聚糖为主,下层以胶原/壳聚糖/β-磷酸三钙为主,孔隙率≥90%,孔径100μm。方法：体外培养新西兰大白兔软骨细胞并成骨诱导3周,使之吸附于多孔胶原/壳聚糖/β-磷酸三钙层状梯度修复体上三维立体培养3周。主要观察指标：通过生长曲线、倒置相差显微镜、组织学、扫描电镜及免疫组织化学检测支架在三维立体培养对软骨细胞的表型、增殖及功能的影响。结果：修复体/细胞体外培养3周,修复体上细胞数量明显增多,并分泌细胞基质,包裹在软骨细胞周围,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色阳性。结论：胶原/壳聚糖/β-磷酸三钙层状梯度修复体的细胞相容性良好,有望成为一种比较理想的关节软骨组织工程支架材料。     

复方甲壳胺消毒剂性能的试验观察

为了解复方甲壳胺消毒剂的杀菌性能和毒性 ,采用定量杀菌试验和动物毒性试验 ,对其杀灭微生物效果、稳定性及毒性进行了试验观察。结果 ,以含 180 0mg/L壳聚糖的消毒液对布片上大肠杆菌、金黄色葡萄球菌作用 3min ,以含 5 4 0 0mg/L的消毒液对白色念珠菌作用 5min ,杀灭率可达 99.90 %以上。有机物对杀菌效果无明显影响。置 5 4℃温箱存放 14d ,其对白色念珠菌的杀灭效果无明显变化。毒理试验表明 ,该消毒剂属实际无毒级 ,对皮肤粘膜无刺激性。结论 ,该消毒剂具较好的杀菌效果 ,性能稳定 ,低毒、无刺激性。     

可磷酸化短肽偶联壳聚糖介导兔关节软骨损伤修复的基因治疗

目的 探讨可磷酸化短肽(phosphorylatable short peptide,pSP)偶联壳聚糖(chitosan,CS)(pSP-CS),携载IGF-1和IL-1受体拮抗剂(IL-1 receptor antagonist,IL-1Ra)基因,局部转染促进关节软骨损伤修复的作用。方法构建pBudCE4.1-IL-1Ra、pBudCE4.1-IGF-1及pBudCE4.1-IL-1Ra+IGF-1质粒,以pSP偶联CS形成pSP-CS,将以上重组质粒分别与其复合形成pSP-CS/质粒DNA(pDNA)复合物。取3月龄健康雄性新西兰大耳白兔30只,体重2.0~2.5 kg,双侧后肢随机分为5组(n=12)。假手术组(A组)仅暴露股骨外侧髁关节面,pSP-CS/pBudCE4.1干预组(B组)、pSP-CS/pBudCE4.1-IL-1Ra干预组(C组)、pSP-CS/pBudCE4.1-IGF-1干预组(D组)、pSP-CS/pBudCE4.1-IL-1Ra+IGF-1干预组(E组)制备膝关节外侧髁软骨缺损模型。术后1周,各干预组给予对应pSP-CS/pDNA复合物,共7周;A组注射等量生理盐水。术后观察动物一般情况,8周时处死实验动物,取关节腔灌洗液ELISA分析IL-1Ra及IGF-1含量;实时荧光定量PCR检测缺损区软骨组织聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase 3,MMP-3)、MMP抑制剂1(MMP inhibitor 1,TIMP-1)mRNA表达;阿尔辛蓝-过碘酸雪夫(alcian blue-periodic acid/schiff,ABPAS)染色及Aggrecan免疫组织化学染色鉴定损伤区新生细胞的软骨细胞表型,分析Aggrecan染色吸光度(A)值。结果实验动物术后无感染及死亡。各干预组关节腔灌洗液中检测到大量外源蛋白IGF-1和IL-1Ra,其中D、E组IGF-1含量以及C、E组IL-1Ra含量显著高于A组(P<0.05)。E组Aggrecan和TIMP-1 mRNA表达上调,MMP-3 mRNA表达下调,明显优于C、D组(P<0.05)。C、D、E组缺损处出现不同程度软骨性修复,AB-PAS染色及Aggrecan免疫组织化学染色均为阳性,且E组作用明显优于C、D组(P<0.05);B组缺损处仅被大量纤维组织增生和炎性细胞浸润,未见明显软骨性修复。结论 pSP-CS是一种较理想的基因载体,可携载治疗基因有效进入兔关节软骨组织;IL-1Ra与IGF-1协同作用明显促进损伤软骨修复。     

壳聚糖酶基因在软骨细胞中的表达及对壳聚糖介导基因转染的影响

[目的]探讨携带壳聚糖酶(CSN)基因的重组慢病毒感染软骨细胞后影响CSN活性的因素,及CSN在壳聚糖(CS)/DNA纳米粒介导基因转染软骨细胞中的作用。[方法]构建携带CSN和红色荧光带白(RFP)基因的重组慢病毒(LV-CSN)并感染兔关节软骨细胞,流式细胞仪及荧光显微镜检测其感染率;二硝基水杨酸比色法(DNS)检测对CSN活性的影响因素;以CS/DNA纳米粒介导体外基因转染软骨细胞,检测CSN对CS/DNA纳米粒介导基因转染软骨细胞的作用。[结果]带RFP基因的LV-CSN感染软骨细胞后48 h和第7 d,RFP表达率分别为(91.40±0.98)%和(91.67±1.00)%,二者差异无统计学意义(P=0.583)。p H值、温度及铜离子浓度对CSN的活性有明显影响。LV-CSN感染软骨细胞后CS/DNA组的基因转染效率显著高于裸p DNA组和CS/DNA组(P<0.05),但铜离子可以拮抗这种作用。[结论]在一定时间内LV-CSN感染软骨细胞后可稳定表达CSN,CSN的活性受p H值、温度及铜离子浓度的影响;CSN可提高CS/DNA对软骨细胞的基因转染效率,铜离子则可拮抗这种作用。     

壳聚糖在药物剂型中的应用

壳聚糖来源丰富,具有良好的生物相容性、生物可降解性、无毒性、成膜性和极强的可塑性,已经作为高分子材料,广泛用于药物剂型中。利用壳聚糖制备的缓释制剂可以提高药物安全性、有效性及可靠性,可以调整药物释放速率,减少给药次数。壳聚糖及其衍生物是很好的靶向制剂载体,已被广泛应用于靶向给药系统的研究,可以有效提高药物在靶点的作用,减少给药量,避免药物在到达靶点前被降解,使药物在其他部位的毒副作用降低。壳聚糖作为药物载体虽然由其独特的优势,但在生产和应用上还有不少问题,目前常用戊二醛作为化学交联剂而制备壳聚糖微球,但是戊二醛对蛋白质等生物活性药物的伤害极大,并且对人体也有害,而用离子交联方法制备的微球极不稳定。因此,目前人们研究的重点在于对壳聚糖进行改性,进一步提高其载药能力。     

壳聚糖作为药物载体及基因载体的临床应用前景

甲壳素是存在于自然界中惟一能被生物降解的阳离子高分子材料,近年研究表明,它在调节机体免疫功能,降低血脂、血糖、血压,保护胃肠道等方面发挥着巨大的作用.壳聚糖是甲壳素的N-脱乙酰基衍生物,具有组织相容性好、生物学活性多样、可生物降解、无毒性、易于吸收等特点.壳聚糖作为药物载体能提高药物吸收,稳定药物成分,增加药物靶向性,增强药物缓释;它作为基因载体对DNA有一定的保护,能提高基因的表达时间.在药物载体、基因载体等研究领域壳聚糖将具有广泛的应用前景.