抗人有机阴离子转运蛋白4多克隆抗体的制备及其在肾脏的定位研究

目的:拟采用一套新的基因免疫系统制备高特异性和高效价的小鼠抗有机阴离子转运蛋白4(hOAT4)多克隆抗体,并用该抗体对hOAT4在人肾小管上皮细胞的表达进行定位研究.方法:应用Accelrys软件分析hOAT4抗原表位,选择其中免疫源性较强的细胞内表位(E278～R345),从人肾组织总RNA中用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增其204 bp的cDNA序列,克隆到pBQAP-OVA构建基因免疫载体,鉴定正确后与辅助载体pCMVi-GMCSF和pCMVi-FlT3L同时免疫小鼠,5周后取血清抗体,ELISA方法测定抗体滴度,人肾组织Western blot和免疫组化鉴定抗体的特异性和定位表达.结果:成功构建基因免疫载体pBQAP-OVA-hOAT4,经酶切及序列分析鉴定完全正确.ELISA方法测得抗体滴度高达1∶3 000,该抗体识别人肾皮质膜蛋白和肾小管刷状缘蛋白65 kD糖基化的hOAT4.人肾组织免疫组化结果提示该抗体识别定位在近段肾小管上皮细胞刷状缘的hOAT4.结论:用基因免疫方法可以成功制备高效价和高特异性抗hOAT4多克隆抗体.     

清开灵制剂的X射线衍射Fourier指纹图谱分析

目的:建立中成药清开灵制剂鉴定分析的指纹图谱分析.方法:利用粉末X射线衍射Fourier图谱分析法,对不同厂家不同剂型的中成药进行分析.结果:获得不同厂家不同剂型的清开灵X射线衍射Fourier指纹图谱,包括衍射图谱几何拓扑和衍射特征标记峰.结论:本方法可用于清开灵制剂的鉴定.     

丁香油酚的包结分离研究

目的 应用主—客体包结原理，实现丁香油中主要化学成分丁香油酚的选择分离。方法采用单晶x射线衍射分析确定主—客体包结物结构。结果 获得主体分子对苯二胺与客体分子丁香油酚以1：2比例形成的包结物。结论 通过主—客体包结方法可从混合物中获得单一化学成分。     

非洛地平与二甲亚砜形成溶剂合物的多态性研究

目的 研究非洛地平溶剂合物存在的晶型多态性。方法 采用溶液挥发法获得非洛地平溶剂合物晶型,命名为晶XIB型(二甲亚砜溶剂合物1∶1);采用X射线衍射技术、热分析技术、傅里叶变换红外光谱技术等对非洛地平晶XIB型进行晶型状态表征。结果 通过与已报道的非洛地平晶XIA型(二甲亚砜溶剂合物1∶1)比较发现,本实验获得的晶XIB型为非洛地平的二甲亚砜溶剂合物的1种新亚型,单晶X射线衍射分析结果显示晶XIB型属于单斜晶系,P2_1/c空间群,晶胞内分别含有4个非洛地平分子和4个二甲亚砜溶剂分子,主体分子与客体分子通过N-H…O氢键相连,差示扫描量热法与热重法分析结果表明晶XIB型为1分子二甲亚砜溶剂合物。结论 非洛地平的二甲亚砜(1∶1)溶剂合物存在多态性,即晶XIA型与晶XIB型,二者在分子排列方式存在明显差异;其理论粉末X射线衍射图谱间亦存在显著差异。     

莽草酸多晶型研究

系统研究莽草酸的多晶型现象,发现该化合物可能存在的不同晶型。通过优化重结晶溶剂种类、数量、温度、时间、压力等参数,发现并制备获得3种莽草酸晶型,利用差示扫描量热法(DSC)、粉末X射线衍射法(PXRD)等方法对各种晶型进行表征分析,通过影响因素实验探索溶剂合物晶型的稳定性及晶型转变规律。最终制备获得A,B,C共3种晶型,均为首次发现的新晶型物质;检测分析结果表明莽草酸3种晶型均不含有结晶溶剂,仅PXRD图间存在显著差异。该研究阐明了莽草酸3种晶型的制备方法、热力学稳定性质、晶型转变规律等,并建立晶型物质的有效定性分析方法。     

药品中核磁共振检测定性能力验证样品制备与评价结果分析

目的：评价参与药品中核磁共振检测定性能力验证实验室的检测能力。方法：制备高纯阿魏酸纯度标准物质;参照国家标准物质研制技术规范采用单因素方差分析考察样品均匀性;采用t检验考察样品分别在高温和光照下储藏7天、14天的运输稳定性,采用标准曲线法考察样品在常温放置12个月的长期稳定性;按照CNAS规定的程序实施本次能力验证。结果：阿魏酸纯度标准物质在均匀性、稳定性方面均能满足药品中核磁共振检测定性能力验证使用的要求。在13家实验室16台仪器的反馈结果中,12家15台仪器的测定结果评定为合格,1家实验室的1台仪器结果为不合格,合格率为93.75%。结论：本次能力验证可以真实地反映参试单位的检测水平,绝大多数参加能力验证的实验室具备了药品中核磁共振检测定性能力。     

那格列奈纯度标准物质标准值的标定与不确定度评定

目的：建立那格列奈化学纯度标准物质的定值方法与不确定度评估数学模型,为标准物质量值溯源提供依据.方法：参照国际计量标准物质研究方法,采用差示扫描量热法与高效液相色谱法两种不同原理技术方法对标准物质进行定值.结果：国家一级计量标准物质那格列奈化学纯度标准物质的标准值和不确定度为99.6％±0.5％（k=2,P=0.95）.结论：那格列奈化学纯度标准物质为具有准确量值和量值溯源特性的国家一级有证标准物质,该研究可为那格列奈药物的质量评价以及相关制剂的质量控制服务,同时为我国药品的标准化和现代化,与国际市场接轨提供基础物质和物质标准.     

锁定钛板及半肩关节置换治疗肱骨近端骨折的疗效分析

目的 探讨锁定钛板及半肩关节置换术治疗肱骨近端骨折的疗效与适应证。方法 2005年1月至2008年12月共收治51例肱骨近端骨折患者,其中39例获得随方,男12例,女27例;平均年龄65.1岁（17 ～ 80岁）。骨折按Neer分型：二部分骨折23例,三部分骨折10例,四部分骨折6例。受伤至手术时间平均为5.5d(1～9d)。手术方式选择：二部分骨折及年龄＜60岁的患者使用锁定钛板内固定治疗,四部分骨折及年龄＞ 60岁的患者使用半肩关节置换术。本组使用肱骨近端内固定系统(PHILOS)钛板切开复位内固定32例（PHILOS钛板组）,其中二部分骨折23例,三部分骨折9例;采用肱骨头置换术治疗7例（关节置换组）,其中三部分骨折1例,四部分骨折6例。结果 PHILOS钛板组患者手术时间平均为84 min(60 ～ 140 min),失血量平均为155 mL( 100 ～400 mL);关节置换组患者手术时间平均为125 min( 100 ～ 170 min),失血量平均为220 mL(150～450) mL。39例患者术后获平均23个月（16～46个月）随访,无一例出现并发症。PHILOS钛板组28例术后3个月复查X线片示骨折愈合,另4例术后6个月骨折愈合,肩臂手功能丧失量表(DASH)评分平均为20.7分,患者对手术主观满意率为87.5％。关节置换组7例患者DASH评分平均为36.0分,患者对手术主观满意率为71.4％。结论 对于年龄＜60岁的患者及大部分Neer 二、三部分骨折的老年患者,可以选择PHILOS钛板内固定治疗,而年龄＞60岁的四部分骨折患者选择半肩关节置换术可以获得较满意的疗效。     

大黄素国家级纯度有证标准物质研制

目的 通过建立准确的定值分析方法及不确定度的研究,研制具有可溯源性、高准确度量值的大黄素国家级化学纯度有证标准物质。方法 根据我国计量法和一级标准物质研制技术规范与相关技术文件要求,采用高效液相色谱法(HPLC)和差示扫描量热法(DSC)对大黄素纯度标准物质联合定值,并完成不确定度评估。结果 研制的大黄素纯度标准物质符合国家一级有证标准物质要求,其化学纯度标准值与不确定度值为(99.54±0.18)%(k=2, P=0.95)。结论 本实验研制的大黄素国家一级纯度有证标准物质具有量值准确、可溯源的特性,属于国际公认的标准物质,将为我国药品的有效物质和成分标准化与国际化,提供必要的标准物质与物质标准。     

优化《中国药典》罗红霉素HPLC含量测定方法研究

目的:优化高效液相色谱法检测罗红霉素含量的最佳流动相条件,改善现行方法中主峰拖尾现象。方法:选取流动相中缓冲液浓度、pH值、三乙胺含量、乙腈用量为影响因素,以罗红霉素色谱峰拖尾因子(T1)、保留时间(tR)、半峰宽(W1/2)及理论板数(N)为考察指标,设计正交试验优化含量测定方法并与2010年版《中国药典》含量测定方法比较。结果:优化后含量测定方法:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,流动相:0.067mol·L-1磷酸二氢铵溶液(三乙胺含量0.3%,调pH值至7.5)-乙腈(60∶40),检测波长:205nm,柱温:30℃,流速:1.0mL·min-1,进样量:20μL。优化后方法与药典方法的比较结果:T1为1.2、1.9;tR为14.133、12.383min;W1/2为0.400、0.533;N为6916、2987。结论:优化后方法较2010年版《中国药典》方法提高了柱效,延长了保留时间,较好地改善了色谱峰拖尾严重的状况。