首页 | 官方网站   微博 | 高级检索  
文章检索
  按 检索   检索词:      
出版年份:   被引次数:   他引次数: 提示:输入*表示无穷大
  收费全文   5881篇
  免费   204篇
  国内免费   425篇
自然科学   6510篇
  2024年   17篇
  2023年   73篇
  2022年   90篇
  2021年   96篇
  2020年   92篇
  2019年   131篇
  2018年   60篇
  2017年   87篇
  2016年   106篇
  2015年   133篇
  2014年   314篇
  2013年   248篇
  2012年   265篇
  2011年   300篇
  2010年   302篇
  2009年   401篇
  2008年   380篇
  2007年   346篇
  2006年   307篇
  2005年   323篇
  2004年   301篇
  2003年   283篇
  2002年   239篇
  2001年   220篇
  2000年   203篇
  1999年   200篇
  1998年   143篇
  1997年   114篇
  1996年   98篇
  1995年   97篇
  1994年   114篇
  1993年   101篇
  1992年   104篇
  1991年   69篇
  1990年   59篇
  1989年   52篇
  1988年   20篇
  1987年   13篇
  1986年   8篇
  1944年   1篇
排序方式: 共有6510条查询结果,搜索用时 14 毫秒
71.
 研究发现斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus,SpltNPV)不能成功感染同属甜菜夜蛾(S. exigua,Se)昆虫,为深入研究SpltNPV在离体Se301细胞中的感染进程以及病毒感染失败的原因,对感染后Se301细胞进行DNA复制、病毒基因转录以及病毒蛋白表达等检测。结果显示被感染的Se301细胞中病毒完成了DNA的复制和病毒早、晚期基因转录,但检测不到极晚期基因多角体基因(polyhedrin)的表达,病毒的蛋白表达受阻从而影响了病毒完成复制周期。 研究发现病毒蛋白表达受阻是SpltNPV在Se301细胞中无法形成子代病毒,完成整个病毒复制的主要原因,这为深入研究其感染失败机理奠定了坚实基础。  相似文献   
72.
以无活性人胰岛素原突变体为分子支架,在C肽位置嵌合特异拮抗血小板GPⅡbⅢa受体的去整合素活性结构位点序列,构建嵌合人胰岛素原突变体.该突变体相对分子质量大小为7.0×103,与钙调素的C末端融合后形成新型重组融合蛋白质,相对分子质量为24.7×103.构建该重组融合蛋白质的大肠杆菌BL21(DE3)表达系统,尝试在大肠杆菌表达体系中,对该重组融合蛋白质进行高效表达.结果表明,该重组融合蛋白质的表达率约占菌体全蛋白的30%,优化后的表达条件为25℃,50μmol.L-1诱导表达16 h.  相似文献   
73.
以人正常胃黏膜上皮细胞系GES-1和不同恶化程度的人胃癌细胞系(低恶化AGS细胞系、中恶化SGC-7901细胞系、高恶化BGC-823细胞系)为研究对象,采用激光共聚焦显微镜的荧光漂白恢复技术及划痕标记荧光染料示踪技术研究不同恶化程度的胃癌细胞系细胞间隙连接通讯(Gap junctional intercellular communication,GJIC)功能的差异;采用荧光定量PCR技术和间接免疫荧光技术检测间隙连接蛋白(Connexin43,Cx43)基因在mRNA和蛋白水平的表达差异,探求其与胃癌恶性程度的相关性.结果表明,在正常胃细胞系和低、中及高恶化胃腺癌细胞系中,细胞间的GJIC功能随着恶性程度的升高而减弱(AGS、SGC-7901)或消失(BGC-823),且Cx43蛋白及mRNA的表达量随着恶性程度的升高而下调(AGS、SGC-7901)或缺失(BGC-823).这提示胃癌恶性程度与胃癌细胞的GJIC功能显著相关(P<0.05),GJIC在胃癌发生中起重要作用.  相似文献   
74.
通过激光共聚焦显微镜对卵泡刺激素受体(FSHR)FSHRA和FSHRB与绿色荧光蛋白(GFP)的融合蛋白的表达和定位进行观察,发现FSHRA和FSHRB不仅在酿酒酵母细胞中有表达,而且表达的蛋白质主要定位在酵母的细胞膜上.  相似文献   
75.
复合改性有机蒙脱土处理印染废水   总被引:1,自引:0,他引:1  
选用当地钙基蒙脱土为原料,经提纯钠化后,用四甲基溴化铵(TMAB)与十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)进行复合改性制得有机蒙脱土,并用IR和XRD对其进行表征.对低浓度铬黑T模拟印染废水进行脱色处理,探讨了脱色工艺条件.结果表明:对50 mL浓度为50 mg/L的铬黑T溶液,在有机蒙脱土用量0.3 g,吸附时间30 m in,温度60℃,TMAB与CTMAB摩尔比为1,pH为2条件下,脱色率可达99.2%.  相似文献   
76.
以单向帘线增强橡胶复合材料为研究对象,采用有限单元法建立二维计算模型.在周期性载荷作用下,对帘线断裂和帘线脱粘滑移引起的橡胶复合材料滞后生热的瞬态温度场进行了数值模拟,并讨论了帘线脱粘滑移摩擦对滞后生热的影响.结果表明,随着帘线断裂数目的增加,温度升高明显;脱粘摩擦生热对温升影响较小;帘线断裂引起的局部应力集中导致的大...  相似文献   
77.
78.
2007年3月美国大量宠物的非正常死亡事件以及2008年中国奶制品的三聚氰胺污染事件,在中国乃至世界均引起三聚氰胺的恐慌。随之,国内一些蛋白饲料原料被检出高含量三聚氰胺、饲料产品中也屡有三聚氰胺被检出,导致了全社会对饲料安全的信任危机,给我国饲料产业造成了极大的经济损失。  相似文献   
79.
比较免疫磁珠法与A蛋白亲和层析法纯化兔抗血清中的IgG   总被引:1,自引:0,他引:1  
优化了免疫磁珠分离法纯化抗血清的实验条件,并与A蛋白亲和层析法比较纯化效果,以求得到一种简便、快速、高效的纯化IgG方法.结果表明:从5只新西兰兔获得210 mL试管凝集效价高达1∶5 120的兔抗鳗弧菌抗血清,磁珠与IgG结合10 min达到平衡,其最大结合量为0.227 mg/mL;免疫磁珠分离法与A蛋白亲和层析法...  相似文献   
80.
采用美国药典提供的模拟胃液、肠液配方,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法(Western blot),分析了太平洋牡蛎肌肉过敏蛋白和非过敏蛋白在体外模拟胃液、肠液消化稳定性的差异.结果表明:在模拟胃液中,非过敏蛋白均能被胃蛋白酶快速降解,而主要过敏蛋白原肌球蛋白在60 min时仍未被...  相似文献   
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司    京ICP备09084417号-23

京公网安备 11010802026262号