绿色荧光蛋白在活体细胞分子生物学研究中的应用

本文详细介绍了绿色荧光蛋白的特性及其在细胞分子生物学活体研究中的应用。     

外源激素对牡丹胚性愈伤组织诱导的影响

为了探讨外源激素的添加对牡丹胚性愈伤组织诱导过程中生理生化特性的影响.以牡丹品种‘凤丹白’叶柄诱导的愈伤组织为材料,研究不同浓度NAA和TDZ对胚性愈伤组织诱导过程中POD(过氧化物酶)、SOD(超氧化物歧化酶)、CAT(过氧化氢酶)和可溶性蛋白的影响.结果表明,抗氧化酶类活性和蛋白质含量与胚性细胞早期发育发生密切相关,在胚性愈伤组织形成时期,POD和CAT活性变化趋势基本一致,而SOD活性变化则相反;SOD活性经过短暂下降后回升,于第15天达到第二个峰值后稳步下降,表明SOD在胚性愈伤组织诱导初期起主导作用;POD与CAT活性出现峰值时间较SOD滞后,推测POD和CAT活性的升高能够促进胚性愈伤组织的形成和早期发育;可溶性蛋白含量于胚性细胞形成前一直保持较高水平,在第15天达到峰值后下降,说明其含量的升高有利于胚性细胞的形成和发育,其累积对形成胚性愈伤组织有促进作用.添加NAA 0.2 mg/L和TDZ 0.5 mg/L对牡丹胚性愈伤组织的诱导效果最好.     

冠心病关联标志物的初步研究

冠心病是心血管系统中的主要疾病之一,其关联标志物的研究对于冠心病的预防和治疗有着重要意义.分别选用来自于冠心病病人和正常人各20例血样,提取血样中单核细胞总蛋白,通过Western blot方法对部分在冠心病发生与发展中起重要作用的分子进行检测.结果显示,在冠心病病人血液中抗动脉粥样硬化分子ABCA1的表达量显著下降,而致动脉粥样硬化的分子CD36和PCSK9的表达量则明显上升,并且CD36在男性冠心病患者血液内的表达量高于女性患者.因而,CD36和PCSK9的过表达及ABCA1表达量的下降可能与中国人群冠心病的发生发展相关,有可能成为冠心病的关联标志物.     

两亲梳型嵌段共聚物的合成及其对PAN膜的改性

以咔唑二硫代甲酸苄基酯（BCBD）为 RAFT 试剂,苯乙烯（St）、N,N-二甲基丙烯酰胺（DMAM）和丙烯酸聚乙二醇单甲醚酯（A-mPEG）为共聚单体,合成了具有不同 mPEG 和 P（A-mPEG）链长的两亲梳型嵌段共聚物 P（St-co-DMAM）-b-PDMAM-b-P（A-mPEG）x,利用1H-NMR 和 GPC 对聚合物结构进行表征．将此共聚物用于聚丙烯腈（PAN）薄膜的表面吸附改性,探讨了PEG链长及含量对改性效果的影响．接触角测试表明,该聚合物可很好地吸附在膜表面,并明显提高膜的亲水性．随PEG链长及其含量的增加,嵌段共聚物的改性效果增加;在适宜条件下,经聚合物吸附改性后,PAN 膜接触角由72.2°降低至24.8°;改性 PAN 薄膜表面牛血清蛋白（BSA）吸附量最低降至0.672,μg/cm2,为未改性PAN膜的11.1%左右．     

鼠神经生长因子联合小牛血清去蛋白颅内注射治疗脑出血

观察鼠神经生长因子联合小牛血清去蛋白注射液颅内注射辅助治疗重症颅脑损伤的疗效分析。选取60例基底节区脑出血患者,出血量为60mL左右,按统计学方法分为观察组与对照组,各30例。两组均行颅内血肿清除术加去骨瓣减压术。观察组颅内注射鼠神经生长因子30ug、小牛血清去蛋白提取物注射液600mg,每6h给药1次;对照组术后常规脱水降颅压治疗,3个月后比较疗效。观察组治疗1周后患者GCS、意识、偏瘫及语言障碍较对照组均明显改善(P均<0.05),治疗3个月后日常生活能力与对照组比较有较大改善,智力评分、语言功能、四肢肢体活动和感觉等神经功能的康复较对照组有较大的提高(P均<0.05)。     

豌豆杆支持的水源水生物脱氮实验研究

针对水源水中硝酸盐氮(NO3-N),采用豌豆杆支持的生物脱氮法开展了批实验研究,考察了生物脱氮过程中NO3-N、亚硝酸盐氮(NO2-N)、氨氮(NH4-N)、溶解氧(DO)和pH随反应时间的变化,探讨了豌豆杆的长期性能。实验结果表明:2d后,NO3-N被完全去除,豌豆杆生物脱氮能有效去除水中的NO3-N;0.5 d之后,开始出现NO2-N,并在第2天时达到峰值(2.46mg/L),硝酸盐还原速率比亚硝酸盐还原速率大;模拟水中检出了NH4-N(<2.1mg/L),豌豆杆自身含有的有机氮好氧时在氨化菌的作用下分解、转化为NH4-N;DO降为0mg/L的时间为0.14d,体系中的颗粒铁能快速除氧;溶液pH介于7.65～7.88之间,变动幅度不大,模拟水中HCO3-对OH-起到缓冲作用;随着反应时间的延长,生物脱氮能力降低,豌豆杆不能长期稳定持续的供给有机碳,需要定期更换。豌豆杆作为固体碳源具有潜在的应用价值。     

苏云金芽孢杆菌aiiA基因在枯草芽孢杆菌中的表达

根据NCBI上已公布的枯草芽孢杆菌BS168菌株的β-1,4-glucanase(eglS)基因以及苏云金芽孢杆菌的aiiA基因序列,设计引物并扩增得到eglS基因的启动子、信号肽序列和aiiA基因.构建重组表达载体Ps4-eaiiA,转化枯草芽孢杆菌BS168,得到枯草芽孢杆菌工程菌BS168/Ps4-eaiiA.该工程菌诱导发酵后经SDS-PAGE和Western blotting分析表明:aiiA基因实现了在枯草芽孢杆菌中的表达.对胡萝卜软腐欧文氏菌进行马铃薯的抗病性实验,结果表明aiiA基因在枯草芽孢杆菌中表达的AiiA蛋白对胡萝卜欧文氏杆菌表现出一定的抗病性.     

ASM1模型在污水生物添加强化脱氮的仿真研究

通过定义投加比概念、以及向ASM1模型矩阵中增加新组分Xaa(投加硝化菌)和添加相应的过程方程等方法,对生物添加过程建立教学模型.并针对投加比、泥龄等影响因素,模拟了生物添加强化脱氮的过程.仿真结果显示泥龄仅为6天时,投加比为0.2,硝化菌不到30天就达到稳定,出水氨氮不到15天就接近于零,而投加比为0时,7天后,出水氨氮仍有35mg/L左右;在恒定投加比下,泥龄越长,硝化越好,如投加比为0.01时,泥龄越大,氨氧降解越快,硝化菌浓度越高,当泥龄9.3天时,40天左右,出水氨氮可在2mg/I以下.这些均与实验结果相符,仿真结果表明生物添加法可有效的强化硝化及脱氮,提高投加比可提高主反应器的硝化菌浓度,提高氨氧化速率,在不同泥龄下,投加比对硝化影响不同,加大投加比,可以降低泥龄对硝化的影响.     

PC交联脱细胞牛心包膜的力学性能、稳定性和血液相容性

测定了原花青素(PC)交联的脱细胞牛心包膜(dbpECM)的力学性能、稳定性和血液相容性.实验结果显示,2.5 mg/mL原花青素交联能将拉伸强度从29.1 MPa提高到51.3 MPa,并保持弹性模量基本不变,而抗胶原酶降解能力与戊二醛相当;PC-dbpECM浸泡于D-Hanks溶液中,仅过量未交联原花青素在一周内释放,而交联的PC在PC-dbpECM中保持稳定.1 mg/mLPC即可基本抑制体外钙化.PC或GA交联的dbpECM都有较好的血液相容性,但PC交联明显优于GA.2.5 mg/mL PC交联的dbpECM血小板的粘附率(7.8%)显著低于未交联组(26.1%)和GA交联组(36.6%),表明PC-dbpECM具有较好的抗血栓形成能力.结果表明PC-dbpECM具有良好的力学性能,稳定性和血液相容性,有可能成为制备人工心脏瓣膜的优良材料.