一氧化氮合成酶mRNA在中枢和外周组织中的表达和分布

应用反转录－聚合酶链式反应（ＲｅｖｅｒｓｅＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ一ＰｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＲＴ一ＰＣＲ）方法，亚克隆出大鼠小脑和肾脏ＮＯＳｃＤＮＡ，并以此为探针，通过Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ分析和定量ＰＣＲ方法，测定大鼠中枢和外周一些组织中ＮＯＳｍＲＮＡ的含量，证明ＮＯＳｍＲＮＡ广泛存在于中枢和外周组织中，在中枢以小脑含量为最高，在外周组织中以肾脏含量为最高；定量ＰＣＲ方法测定ＮＯＳｍＲＮＡ较Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ分析更为灵敏。     

血管内皮生长因子（VEGF）基因在家兔动脉粥样硬化斑块中的表达

血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）基因在家兔动脉粥样硬化斑块中的表达北京医科大学心血管基础研究所汤乃梅，杨亚东，陈伯荣，柯碧波，周爱儒，唐朝枢，汤健血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）又称血管渗透因子（ＶＰＦ），它能促进内皮细胞增殖和血管的生成与通透性（１）。动脉...     

冠心病基因治疗与细胞治疗研究

近年来 ,心血管疾病 ,尤其是冠心病的基因治疗与细胞治疗研究引起了基础与临床工作者的高度关注 ,并取是了重要进展。心血管疾病基因治疗的基础研究主要集中在 :基因载体、转运体系和治疗性基因。临床研究主要在 :试验方案的设计、安全性和有效性。冠心病的基因治疗包括动脉粥样硬化、治疗性血管生成和血管成形术后再狭窄三个方面 ,其中后二者是当前研究的热点。据报道 ,国外心血管疾病基因治疗的临床试验逐年增加 ,而且应用非病毒载体的比例较高 ,约占 4 7% ,这为其安全性提供了保证。虽然有多种促血管生成因子 ,但在基因治疗中应用最广泛…     

大鼠自发性高血压和心肌肥厚时热休克蛋白70基因表达的研究

本工作采用热休克蛋白７０（ＨＳＰ７０）核酸分子杂交方法，检测了自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）与其正常对照（ＷＫＹ）大鼠离体培养的主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）受热刺激后以及大鼠腹主动脉缩窄后心肌肥厚时左心室ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ的水平，并对ＳＨＲ和ＷＫＹ肝组织基因组ＤＮＡ进行了限制性酶切片断长度多态性（ＲＦＬＰ）分析。结果表明：ａ．３７℃培养的ＳＨＲＡＳＭＣ及整体ＳＨＲ肝组织ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ的基础表达水平均低于ＷＫＹ大鼠，ＳＨＲＡＳＭＣ受热刺激（４２℃１５ｍｉｎ）后２ｈ，ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ表达增加的程度明显大于ＷＫＹ大鼠。ｂ．大鼠腹主动脉缩后造成左室压力超负荷，左心室ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ在压力超负荷４ｈ时已明显升高，１ｄ、２ｄ、１ｗ均维持在高水平，１ｗ后逐渐降低。ｃ．ＳＨＲ和ＷＫＹ鼠肝组织基因组ＤＮＡ经ＢａｍＨＩ酶切后，ＳＨＲＨＳＰ７０基因缺失一条约５．６ｋｂ的片段。提示：ＳＨＲＡＳＭＣ对热敏感性增加；压力负荷增加早期，左心室ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ表达明显增加；ＨＳＰ７０基因结构异常可能与高血压发生有关。     

心血管疾病基因治疗的基础研究Ⅳ．外源基因的在体表达

将ｐＮ２－ＬａｃＺ和ｐＮ２－ＣＭＶ－ＵＫ质粒直接注射到Ｗｉｓｔａｒ大鼠股四头肌，可以在肌肉中检测到这两种基因的表达产物。注射ｐＮ２－ＬａｃＺ质粒后７天，β－半乳糖苷酶的表达量最高，可达２．４８×１０－４Ｕ／ｇ组织，并且可持续表达３周以上。组织化学染色表明部分肌细胞内有ＬａｃＺ基因表达。当用脂质体介导时，注射含３０μｇ质粒的脂质体─ＤＮＡ复合物，β－半乳糖苷酶的活性同直接注射８０μｇ质粒时的活性无差别，直接注射ｐＮ２－ＣＭＶ－ＵＫ质粒后７天，单链尿激酶原含量最高，可达５５０ｎｇ／ｇ组织。基因注射后３个月仍可检测到单链尿激酶原。     

心血管疾病基因治疗的基础研究Ⅲ．重组质粒fPGV－MT－LacZ在大鼠血管平滑肌细胞中的表达

为观察外源性基因在心血管细胞内的表达，本工作构建了含有外源性标记基因ＬａｃＺ的逆转录病毒质粒ｆＰＧＶ－ＭＴ－ＬａｃＺ。应用脂质体（Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ）包裹质粒，转染培养的大鼠主动脉平滑肌细胞，经Ｇ４ｌ８筛选、克隆以及β－半乳糖苷酶的酶活测定，证明外源性基因可以在血管平滑肌细胞中表达。揭示血管平滑肌细胞可作为心血管疾病基因治疗的一种靶细胞。     

生物化学自学考试指导(一)

北京市高等自学考试委员会护理专业的生物化学(简称生化)课程考试即将举行。如何准备生化课程考试是大家十分关心的问题。根据我的体会,谈一些看法供大家参考。首先,我们必须概要地了解一下生化学科的性质及基本内容。生物化学是研究生命化学     

EXPERIMENTAL THERAPY FOR SOLID TUMORS BY IN SITU RETROVIRAL MEDIATED GENE TRANSFER

ＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＡＬＴＨＥＲＡＰＹＦＯＲＳＯＬＩＤＴＵＭＯＲＳＢＹＩＮＳＩＴＵＲＥＴＲＯＶＩＲＡＬＭＥＤＩＡＴＥＤＧＥＮＥＴＲＡＮＳＦＥＲＺｈｏｕｚｈｏｎｇｊｕｎ；周中军；ＺｈｏｕＡｉｒｕ；周爱儒；ＷａｎｇＪｉａｎｍｉｎｇ；王建明；ＴａｎｇＪｉａ...     

自发性高血压大鼠内皮素A型受体基因的表达

应用反转录－聚合酶链式反应方法，测定大鼠ET－A型受体（endothelinareceptor，ETA－R）mRNA在体内的分布，证明ETA－RmRNA不仅存在于血管平滑肌细胞中，亦存在于内皮细胞中；而且广泛分布于脑、心、肾、肺等组织内。发现在原发性高血压大鼠的脑、心、肾组织中，ETA－RARNA水平明显升高，提示ETA－R基因表达增加，可能是高血压发病的一个重要因素。