自身启动子调控miR-7真核表达载体的构建及其意义

目的 构建带有miR-7自身启动子的miR-7重组真核表达载体,研究其对人肺癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响.方法 预测miR-7启动子序列,设计含有该序列和miR-7前体序列目的片段的引物,PCR扩增后亚克隆入pGL3.0-Basic载体以构建miR-7自身启动子调控的真核表达载体pGL3.0-Basic-miR-7-promoter(命名为p-miR-7-pro);将所构建载体转染人肺癌95D细胞,Real-time PCR探针法检测95D细胞中miR-7的表达水平;MTT和克隆形成实验分别检测95D细胞的增殖和克隆形成能力;划痕法观察95D细胞体外迁移能力的变化;FACS检测95D细胞的凋亡情况.结果 酶切和测序结果证明成功构建p-miR-7-pro真核表达载体,转染95D细胞后可有效表达miR-7;与对照组相比,p-miR-7-pro转染组95D细胞的体外增殖能力受到明显的抑制(0.60 ±0.03 vs 0.19 ±0.05,P＜0.05);同时其迁移能力也显著降低(473 ±7 vs 99 ±2,P＜0.05);而细胞凋亡则显著增加(9.233 ±0.586％vs 12.967 ±0.643％,P＜0.05).结论 成功构建由自身启动子调控的miR-7真核表达载体,为后续研究miR-7在肺癌基因治疗中的作用提供重要实验基础.     

通过改变钽含量来降低乙烯-乙烯醇共聚物引起的CT射束硬化伪影:在一标化的主动脉内漏模型中进行评价

<正>目的旨在建立一个主动脉覆膜支架模型来模拟内漏的治疗,并找到乙烯-乙烯醇共聚物中合适的钽含量(TC)以尽量减少CT射束硬化伪影,但仍允许该材料透视可     

谷氨酰胺强化低剂量肠内营养支持治疗对重症颅脑损伤患者的影响

目的探讨早期低剂量肠内营养联合谷氨酰胺支持治疗重症颅脑损伤患者的机制。方法将200例急性重症颅脑损伤患者随机分为观察组(早期低剂量肠内营养+谷氨酰胺支持治疗组)和对照组(早期低剂量肠内营养组)各100例,均于起病后48h给予肠内营养支持治疗。分别于治疗前及治疗后第7天抽取静脉血,检测血清炎性反应指标:C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-a(TNF-α)水平的变化及反应肠道黏膜屏障功能指标:血清二胺氧化酶(DAO)水平、肠脂肪酸结合蛋白(IFABP)、尿乳果糖/甘露醇(L/M)水平的变化,比较治疗后7天生化指标及临床效果。结果治疗前2组CRP、IL-6、TNF-α水平差异无统计学意义(P>0.05);治疗后第7天,2组血清CRP、IL-6、TNF-α水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前2组DAO、IFABP、L/M水平差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后第7天,2组患者IFABP、L/M水平低于治疗前,DAO水平高于治疗前,且观察组优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后第7天观察组谷草转氨酶、血清肌酐、ICU住院费用低于对照组,ICU住院时间短于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),2组VAP发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论早期低剂量肠内营养联合谷氨酰胺治疗可下调急性炎性反应,减少各脏器炎性打击,保护肠道黏膜屏障功能,有助于患者临床结局的良好转归。     

早期低剂量肠内营养对重症颅脑损伤患者炎性反应的影响

目的：探讨早期低剂量肠内营养对重症颅脑损伤患者血清C反应蛋白（CRP）、白细胞介素－6（IL－6）、肿瘤坏死因子－α（ TNF－α）及尿乳果糖／甘露醇（ L／M）水平的影响。方法将急性重症颅脑损伤患者200例随机分为观察组与对照组各100例。入院48h后开始给予肠内营养支持治疗。对照组患者采用正常剂量,鼻饲营养方式,每天热量供给30～35kCal／kg,蛋白质1．5～1．8g／（kg? d）。观察组采取低剂量供能方式,每天热量供给16～20kCal／kg,蛋白质1．2～1．6g／（ kg? d）。连续治疗1周后,分别于治疗前及治疗后第7天抽取静脉血,检测血清CRP、IL－6、TNF－α水平及L／M变化。结果治疗前2组患者炎症指标CRP、IL－6、TNF－α水平及L／M差异均无统计学意义（P＞0．05）。治疗后第7天2组患者CRP、IL－6、TNF－α水平及L／M与治疗前比较明显减少,且观察组低于对照组,差异均有统计学意义（ P＜0．05）。结论早期低剂量肠内营养支持治疗可减少重症颅脑损伤患者急性炎性反应,减轻肠壁黏膜炎性损伤,减少肠黏膜乳果糖排出率,降低肠黏膜通透性,提高临床治愈率。     

基于支持向量机的5种大黄苷元治疗脑缺血的配伍研究

目的筛选大黄中5种能够治疗脑缺血的大黄苷元(芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚)的最佳配伍。方法采用均匀设计法将大鼠分为14组,每组15只。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,以神经功能症状评分、脑梗死面积为指标,探讨不同配伍的大黄苷元对脑缺血大鼠的影响,同时基于支持向量机(SVM)建立大黄苷元药效预测模型。结果经SVM回归分析,得到大黄苷元最优配伍为芦荟大黄素6.653 4 mg/kg、大黄酸26.000 8 mg/kg、大黄素11.004 2 mg/kg、大黄酚3.841 4 mg/kg和大黄素甲醚3.862 0 mg/kg。结论不同配比的大黄苷元能有效改善大鼠脑缺血的各个指标,采用均匀设计结合SVM的模拟预测方法优选出了5种大黄苷元组分的最佳配比。     

吉林省2006-2013年麻疹流行病学特征分析

目的分析吉林省2006-2013年麻疹流行病学特征,为科学指导全省麻疹控制工作提供参考。方法对吉林省2006-2013年麻疹发病情况进行描述流行病学分析,同时分析麻疹病例含麻疹类疫苗(measles-containing vaccine,MCV)接种情况。结果 2006年麻疹暴发流行,通过强化免疫和应急接种,疫情迅速得到控制。但是经过两年低发病后,又出现反弹现象。2010年全省强化免疫后,2011-2012年麻疹发病率下降到1/100万以下,2013年略有升高。结论 MCV强化免疫可以有效控制麻疹疫情,但随着易感人群的积累,麻疹还会出现暴发流行;吉林省麻疹发病主要以局部高发为主,病例多发生在散居儿童;因此麻疹控制中需要科学地实施强化免疫,采取有针对性的措施解决麻疹防控工作中的薄弱环节。     

益骨胶囊含药血清对成骨细胞骨保护蛋白mRNA表达的影响

目的:观察益骨胶囊含药血清对体外培养的大鼠成骨细胞骨保护蛋白mRNA的影响。方法:实验于2004-05/2005-02在广州暨南大学生命科学技术学院细胞与蛋白质工程实验室完成。选取12月龄SD雌性大鼠20只,随机分为2组。中药给药组(益骨胶囊由淫羊藿、当归、白芍、枸杞子等8味中药组成)和蒸馏水对照组,每组10只。运用大鼠灌胃的方法制备含药血清和对照血清,分离、培养新生大鼠的颅骨成骨细胞,传代后分为2组(含药血清组和空白血清对照组),每组8孔,分别在培养24,48h时用反转录聚合酶链反应技术测定特异性电泳条带所显示成骨细胞中骨保护蛋白mRNA的相对表达量,酶联免疫法检测48,72和96h时200mL/L终浓度培养上清中骨保护蛋白的浓度。结果:两组动物各10只,均无亡失,所取血清正常用于细胞培养。①成骨细胞在接种4h后可见部分细胞贴壁、伸展。随培养时间延长,细胞伸出较多突起,细胞形态为单核,多边形及梭形,培养2d细胞基本全部贴壁,主要为梭形或多边形,培养6d左右基本贴满瓶壁,呈铺路石样排列。单层铺满培养瓶后可出现重叠生长,传代细胞大约15d天左右开始形成矿化结节。②特异性电泳条带显示益骨胶囊含药血清培养后24h和48h成骨细胞骨保护蛋白mRNA的表达均高于空白血清对照组犤(0.196±0.015,0.236±0.016),(0.152±0.018,0.206±0.022),P<0.01犦;③200mL/L终浓度的益骨胶囊含药血清培养后48,72和96h成骨细胞骨保护蛋白的表达明显高于空白血清对照组犤(0.1230±0.0128,0.1681±0.0130,0.1983±0.0186),(0.1067±0.0106,0.1385±0.0126,0.1588±0.0121),P<0.01或P<0.05犦。结论:益骨胶囊含药血清具有促进成骨细胞表达骨保护蛋白的作用。提示益骨胶囊能够通过对成骨细胞的影响而对骨吸收环节具有抑制作用,但是否对其他信号通路也有作用尚待研究。     

电针配合手法快针强刺激为主综合治疗麻木为主的腰椎间盘突出症疗效观察

目的观察以电针配合手法快针强刺激为主的综合治疗对麻木为主要表现的腰椎间盘突出症的临床疗效。方法将87例以麻木为主要症状的腰椎间盘突出症患者随机分为2组。对照组43例采用牵引、推拿治疗,治疗组44例在对照组基础上加用电针配合手法快针强刺激治疗。2组均10 d为1个疗程,治疗2个疗程后统计临床疗效。比较2组治疗前后日本骨科学会(JOA)下腰痛评分系统评分、麻木VAS评分。结果 2组治疗后JOA下腰痛评分系统各主观症状、体征评分及日常生活能力受限评分均较本组治疗前升高(P 0. 05),且治疗组各项评分均高于对照组(P 0. 05)。2组第1、2个疗程麻木VAS评分均低于本组治疗前(P 0. 05),第2个疗程低于第1个疗程(P 0. 05),且治疗组第1、2个疗程麻木VAS评分低于对照组同期(P 0. 05)。2组总体疗效比较差异有统计学意义(U=2. 094 8,P=0. 036 2),且治疗组显愈率高于对照组,比较差异有统计学意义(P 0. 05),总有效率高于对照组,但比较差异无统计学意义(P 0. 05)。结论电针配合手法快针强刺激为主的综合治疗对麻木为主要表现的腰椎间盘突出症患者疗效确切,可显著改善患者临床症状体征和麻木程度,值得临床推广。     

胃安宁含药血清对人胃癌MGC-803细胞COX-2mRNA、VEGF mRNA表达的影响

目的:观察胃安宁含药血清在体外对人胃癌MGC-803细胞株COX-2 mRNA、VEGF mRNA表达的影响.方法:分别采用低、中、高不同浓度梯度的胃安宁含药血清干预胃癌细胞MGC-803 48 h,通过RT-PCR法分析胃安宁含药血清对该细胞系COX-2 mRNA、VEGF mRNA的表达情况.结果:与空白血清对照组相比,胃安宁小、中剂量含药血清组中COX-2 mRNA表达量明显降低(P＜0.05),具有统计学意义；而大剂量含药血清组则变化不明显(P＞0.05)；胃安宁含药血清干预MGC-803细胞48 h后,各剂量含药血清组中VEGF mRNA表达量与空白血清对照组比较无统计学意义(P＞0.05).结论:胃安宁颗粒具有一定的抗胃癌转移作用,其机制可能与胃安宁颗粒能抑制COX-2 mRNA的表达相关.