黄连解毒汤对健康大鼠肠道菌群结构影响的研究

[目的]研究黄连解毒汤对健康大鼠肠道菌群结构的影响。[方法]雄性Wistar大鼠20只依据体重分为空白对照组和黄连解毒汤组,每组各10只。黄连解毒汤组按照700mg/kg的剂量给予黄连解毒汤提取物溶液灌胃,空白对照组大鼠给予相同体积的0.9%氯化钠溶液灌胃,两组均连续给药7d。7d后采用Illumina高通量测序技术检测两组大鼠的肠道菌群,寻找其中的差异菌群并对其进行生物学分析。[结果]在门水平菌群变化中,与空白对照组比较,服用黄连解毒汤临床剂量7d可以显著降低健康大鼠肠道中放线菌门和厚壁菌门细菌所占总菌的比例,两组差异具有统计学意义(P0.05)。在属水平上,可以显著性降低健康大鼠肠道中Adlercreutzia菌、消化链球菌和克里斯滕森菌所占的比例,两组差异具有统计学意义(P0.05,P0.01)。[结论]通过肠道菌群实验发现,黄连解毒汤临床剂量服用7d后可对健康大鼠的肠道菌群产生一定的调节作用。     

基于“经验-成分-活性-电子感官”的中药饮片质量综合评价体系的探讨北大核心CSCD

中药饮片质量优劣评价严重制约下游产业链高质量发展,是推动中药“优质优价”“优质优先”战略的重要抓手。当下,中药饮片质量评价的主要手段还停留在化学成分评价层面,囿于前期研究基础及条件限制,往往忽略了传统经验鉴别在饮片质量评级中的核心价值,传统的鉴别经验可以认为是基于临床经验的对药材质量的固化及映射,传统经验鉴别应成为中药饮片质量评价的重要依据。通过现代科学手段,从化学、效应、表征等多个维度对经验鉴别进行客观化研究,是当前饮片评价体系亟待解决的问题。综上,该研究提出构建以经验评价为核心、以可真实反映经验鉴别的化学成分为内涵、以生物效应评价为支撑、以电子感官评价为出口的中药饮片“经验-成分-活性-电子感官”综合评价体系,以期将中药饮片质量的传统经验评价量化为化学、生物学、感官模拟的客观化评价体系,为基于临床的中药饮片质量评价研究提供参考。     

αB-晶状体蛋白对急性高眼压大鼠视网膜神经节细胞保护作用机制的研究

目的　研究αＢ-晶状体蛋白对钾离子通道ｋｖ１．１、ｋｖ１．３及凋亡抑制因子Ｂｃｌ-ｘｌ和凋亡因子Ｃａｓｐａｓｅ-３的影响,探讨αＢ-晶状体蛋白对急性高眼压大鼠视网膜神经节细胞（ｒｅｔｉｎａｌｇａｎｇｌｉｏｎｃｅｌｌｓ,ＲＧＣ）保护作用的机制。方法　６０只ＳＤ大鼠随机分为Ａ组（急性高眼压组）、Ｂ组（急性高眼压＋玻璃体内注射生理盐水５μＬ组）、Ｃ组（急性高眼压＋玻璃体内注射１０×１０－６ｇ?Ｌ－１αＢ-晶状体蛋白５μＬ组）,每组２０只,右眼为实验眼。注射后７ｄ和１４ｄ时,应用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和实时定量逆转录聚合酶链反应（ＱＲＴ-ＰＣＲ）法检测ｋｖ１．１、ｋｖ１．３、Ｂｃｌ-ｘｌ和Ｃａｓｐａｓｅ-３在视网膜上的表达水平。结果　注射后７ｄ和１４ｄ时,Ｃ组ｋｖ１．１、ｋｖ１．３通道蛋白和凋亡因子Ｃａｓｐａｓｅ-３蛋白表达水平和ｍＲＮＡ相对表达量均较Ａ组、Ｂ组低,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０.０５）;Ｃ组Ｂｃｌ-ｘｌ蛋白表达水平和ｍＲＮＡ相对表达量较Ａ组、Ｂ组高,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）;相同时间点不同因子Ａ组、Ｂ组间两两比较,差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。结论　αＢ-晶状体蛋白通过抑制急性高眼压后ＲＧＣ上钾离子通道ｋｖ１．１、ｋｖ１．３的表达,从而提高凋亡抑制因子Ｂｃｌ-ｘｌ的表达、降低凋亡因子Ｃａｓｐａｓｅ-３的表达,减少细胞凋亡,保护ＲＧＣ。     

脑性瘫痪的临床与MRI表现分析

目的 探讨脑性瘫痪(脑瘫)患儿脑MRI的表现及其与脑瘫类型、出生胎龄、年龄、高危因素之间的关系。 方法 回顾性分析184例脑瘫患儿的临床与MRI表现。 结果 184例脑瘫患儿MRI异常率为88.6%,早产和足月儿组MRI异常率分别为95.9%和83.6%。痉挛型双瘫、四肢瘫、偏瘫、肌张力低下型、不随意运动型、共济失调型和混合型脑瘫MRI异常率分别为82.1%、100%、100%、80.6%、80.0%、100%和81.8%。各类型脑瘫的MRI异常表现不同:痉挛性四肢瘫的异常MRI表现广泛、弥漫的两侧脑损伤,痉挛性双瘫以脑室周围白质软化(periventricular leukomalacia,PVL)为主(56.7%),不随意运动型多有基底节区病变(75%),共济失调型均有小脑发育不良,偏瘫型多为单侧脑损伤(90%)。不同出生胎龄的MRI特点不同,早产儿脑损伤以PVL多见(71.6%);足月儿脑损伤表现多样性且病变广泛。在不同年龄段中,1岁以内的患儿MRI异常率最高(93.6%),头颅MRI异常率随着年龄增长逐渐降低。高危因素中MRI异常率较高的依次是:出生低体重、早产、缺氧窒息。 结论 MRI 影像改变与脑瘫类型、胎龄、年龄、高危因素密切相关。     

Cisplatin induces cell cycle arrest and senescence via upregulating P53 and P21 expression in HepG2 cells

目的化疗药物能够通过诱导肿瘤细胞衰老从而发挥治疗效果。顺铂作为最常用的化疗药物能否诱导肝癌细胞发生加速
性衰老目前尚不清楚。方法使用MTT法和克隆形成试验检测不同剂量顺铂对HepG2细胞增殖的影响;分别用流式细胞仪及
衰老相关β-半乳糖苷酶染色检测细胞周期及衰老情况;RT-PCR检测TP53、P21及P19基因的mRNA表达水平,Western blotting
检测P53和P21蛋白表达水平。结果顺铂能够诱导HepG2细胞出现不可逆的生长停滞及细胞周期阻滞。2.0 μg/ml顺铂作用
于HepG2后衰老相关β-半乳糖苷酶染色阳性,并呈现时间依赖性。在顺铂诱导衰老过程中,P19基因表达水平升高,在诱导48 h
后达到峰值后逐渐下降,而P53和P21表达水平则持续升高。结论本研究提示顺铂能够诱导肝癌细胞出现衰老样表型,这一结
果为进一步探讨其抗肝癌机制提供了基础。
     

黄连解毒汤在阿尔茨海默病模型大鼠体内药代动力学及对脑内炎症微环境改善的研究

研究黄连解毒汤(HLJDD)中有效成分(生物碱类、环烯醚萜类和黄酮类)在阿尔茨海默病(AD)模型大鼠体内药代动力学过程,并探讨黄连解毒汤治疗阿尔茨海默病的相关性。实验分为正常组(n=6),假手术组(n=4)和模型组(n=12)。假手术组大鼠连续45 d皮下注射D-半乳糖(50 mg·kg-1)造成亚急性衰老模型,模型组大鼠在注射D-半乳糖的基础上,基底核注射Aβ25-35(4.0 g·L-1)和鹅膏蕈氨酸(2.0 g·L-1)。模型组大鼠分为黄连解毒汤单次给药组(n=6)和黄连解毒汤连续给药1周组(n=6)。采用LC-QQQ-MS方法测定不同时间点生物碱类、环烯醚萜类和黄酮类成分的血药浓度。并利用Bio-Plex多因子检测技术检测大鼠脑脊液中7个炎症因子(MIP-2,IL-1β,IL-2,IL-8,IL-10,IL-13,TNF-α)的水平。环烯醚萜类成分在AD模型大鼠体内吸收和消除较快,生物利用度高。原小檗碱型生物碱在血浆中含量较低,其AUC(药时曲线下面积)在给药1周组大鼠中高于单次给药组。黄酮类成分在大鼠体内的药时曲线出现了明显的双峰现象。黄连解毒汤给药后,AD模型大鼠脑脊液中的炎症因子表现出回调趋势,其中IL-1β/IL-10(P0.05)出现显著性差异。基本阐述了环烯醚萜类,生物碱类和黄酮类成分(共41个化合物)在AD模型大鼠体内的药代动力学行为,黄连解毒汤能够通过调节炎症因子的水平改善阿尔茨海默病模型大鼠中枢炎症状态。     

电刺激小脑顶核对痉挛型脑瘫患儿移动功能的影响

目的：观察电刺激小脑顶核对于提高痉挛型脑性瘫痪（脑瘫）患儿移动功能的疗效。方法：选择39例（月龄36～60个月）具备独立行走而且踝关节足背屈角偏小的双下肢瘫脑瘫患儿,分为试验组（2l例）和常规治疗组（18例）。试验组进行常规康复训练并添加电刺激小脑顶核;常规治疗组则只采用常规康复训练。共4周,并在治疗前后予以临床痉挛指数（Clinic Spastici-ty Index,CSI）评估、踝关节活动度（ROM）测量以及粗大运动功能量表（GMFM）评分。结果：治疗后,2组患儿CSI分值降低,GM-FM中站（D区）和走跑跳（E区）评分上升,与治疗前相比较,具有明显性差异（P〈0.05）;踝关节活动度比治疗前明显增大,亦有明显性差异（P〈0.01）。试验组的CSI、踝关节活动度和GMFM各项数据表现都比常规治疗组要好,具有明显性差异（P〈0.01）。结论：常规康复训练基础上结合电刺激小脑顶核有利于痉挛型脑瘫患儿移动功能的提高。     

不同颜色玉兰花瓣挥发油化学成分的GC-MS分析

目的:分析并比较白色与紫色玉兰花瓣挥发油的化学成分。方法:采用水蒸气蒸馏法提取,运用毛细管气相色谱-质谱联用法结合计算机检索对其化学成分进行分析和鉴定,用气相色谱面积归一法测定各组分的相对百分含量。结果:从白色与紫色玉兰花瓣的挥发油中分别分离出37个和41个化合物,分别鉴定出了26个和20个,已鉴定挥发油成分占总挥发油含量分别为83.97%和77.06%。结论:白色与紫色玉兰花瓣挥发油的化学成分通过分析和比较有所不同。     

脑性瘫痪胼胝体面积与神经运动发育的相关性研究

目的 探讨脑性瘫痪(CP)患儿胼胝体面积与神经运动发育之间的关系.方法 选取脑性瘫痪患儿63例作为研究组,正常儿童60例作为对照组,应用《0～6岁儿童神经心理发育量表》评价脑性瘫痪患儿神经运动发育.对受试儿童进行头颅MRI检查,正中矢状位测量胼胝体总面积及分区面积,分析胼胝体面积与神经运动发育之间的关系.结果 研究组胼胝体总面积及分区面积小于对照组,差异具有统计学意义;研究组胼胝体总面积与神经运动发育评分存在正相关性,其中粗大运动及适应能力相关明显.结论 脑性瘫痪患儿胼胝体的发育受影响,患儿临床症状越重,胼胝体面积越小,经头颅MRI对其检测可评估脑性瘫痪病情的轻重及治疗效果.     

LPS诱导斑马鱼炎症实热模型构建及脂质生物标志物筛选研究

[目的]基于脂质组学技术,探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的实热炎症对斑马鱼体内脂质代谢的影响,并筛选出与炎症相关的差异脂质标志物。[方法]采用荧光标记转基因中性粒细胞斑马鱼,结合活体成像系统实时监测中性粒细胞炎症迁移过程,计算斑马鱼炎症部位中性粒细胞的个数。通过超高效液相色谱串联质谱(ultra performance liquid chromatography-Q exactive-mass spectrometry,UPLC-QE-MS)技术进行脂质组学检测,根据多元统计分析比较模型组与正常组斑马鱼的代谢谱图,寻找潜在生物标志物。[结果]模型组斑马鱼炎症部位中性粒细胞个数(18个)与正常对照组(2个)比较,差异有统计学意义(P0.001),显示LPS诱发转基因中性粒细胞荧光斑马鱼炎症模型建立成功。模型组和正常对照组的代谢谱图存在明显差异,并根据精确分子量及质谱碎片初步共筛选鉴定出28个差异代谢物,包括16个磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine, PC)、7个磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamines, PE)、2个磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine, PS)、1个磷脂酸(phosphatidic acid, PA)、1个磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol, PI)、1个鞘磷脂(sphingomyelin, SM)。[结论]卵黄囊显微注射LPS能够诱导斑马鱼产生感染性炎症,差异脂质代谢物以PC和PE为主,说明LPS诱导炎症的相关机制及相关的实热症状与PC和PE的代谢有关,可为疾病的早期诊断和预防奠定基础。