荷丹调脂方对小鼠脂质代谢的影响

目的?研究荷丹调脂方对高脂血症小鼠血浆脂质代谢异常的调节作用。方法?通过高效液相-二维线性离子阱高分辨静电场组合质谱仪(UPLC-LTQ/Orbitrap XL)的脂质组学研究方法,考察药物干预对脂质代谢的影响,寻找潜在生物标志物,探讨荷丹调脂方调节脂代谢的作用途径。结果?正常组、模型组、荷丹调脂方组血浆脂质谱明显分离。鉴定了血浆中与荷丹调脂方影响的11种生物标志物,主要包括磷脂酰胆碱（PC）、溶血磷脂酰胆碱（LysoPC）和甘油三酯（TG）。荷丹调脂方干预对部分异常脂质代谢具有明显的改善作用。结论?荷丹调脂方能有效缓解高脂饮食诱导的磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰胆碱和甘油三酯代谢紊乱,表明荷丹调脂方调血脂的作用机制可能与调节这些代谢途径有关。      

基于LC- MS的四氯化碳致大鼠急性肝损伤的脂质组学研究

目的:基于液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术从脂质组学的角度探讨四氯化碳(CCl_4)致大鼠急性肝损伤的作用机制。方法:取Wistar大鼠12只,随机分为正常组和模型组,每组6只。模型组大鼠单次腹腔注射50%CCl_4诱导急性肝损伤,给药剂量为1 ml/kg;正常组大鼠腹腔注射等体积橄榄油。给药24 h后,采集血清样本,分离肝大叶。生化分析仪检测血清ALT、AST、TG、HDL和LDL水平;HE染色后光镜下观察肝组织病理形态学变化;LC-MS检测血清样本,采用多元统计分析(主成分分析和正交偏最小二乘法判别分析)比较两组间脂质代谢谱差异,并筛选差异性脂质代谢物。结果:与正常组比较,模型组大鼠ALT和AST水平显著升高(P0.01),TG含量明显降低(P0.05)。HE染色可见模型组大鼠的肝细胞肿大、坏死,伴有明显的炎症浸润。脂质组学分析显示,两组间脂质代谢谱差异明显,共找出80个差异性脂类成分;进一步经S-plot图比对,筛选出34个差异最为显著的脂质代谢物,其中15个属于磷脂酰胆碱类,6个属于三酰甘油类,4个属于磷脂酰乙醇胺类,2个属于溶血磷脂酰胆碱类,2个属于鞘氨醇类,5个属于血小板激活因子。结论:脂质组学研究揭示CCl_4诱导急性肝损伤的机制与磷脂及三酰甘油代谢紊乱相关。     

磷脂酰乙醇胺N-甲基转移酶在肝脏疾病中的作用研究进展

磷脂酰乙醇胺N-甲基转移酶(PEMT)能够催化磷脂酰乙醇胺(PE)转化为磷脂酰胆碱(PC),并参与肝细胞内多种代谢反应,与肝脂质代谢、内质网应激反应及细胞自噬等过程均密切相关。越来越多的研究表明PEMT酶活性的异常能促进脂肪肝炎、肝衰竭、肝癌等多种疾病的发展。文章对PEMT在肝脏疾病中的作用作一综述。     

基于代谢组学和网络药理学探讨针灸治疗缺血性脑卒中作用机制

[目的] 联合网络药理学和代谢组学分析针灸治疗缺血性脑卒中的作用机制。[方法] 借助Swiss Target Prediction数据库、Gene Cards数据库查找作用靶点;Cytoscape 3.9.1软件构建药物-成分-靶点网络;STRING数据库获得PPI网络图;最后利用David平台进行KEGG信号通路富集分析。采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MS)分析各组大鼠代谢轮廓变化,借助Metabo Analyst数据库查询相关代谢通路。[结果] 假手术组和模型组共筛选出49个基于血清的代谢生物标志物(P＜0.05),主要代谢途径为甘油磷脂代谢、亚油酸代谢、α-亚麻酸代谢、乙醚脂质代谢、赖氨酸降解、花生四烯酸代谢,其中包含的代谢产物主要是磷脂酰胆碱、溶血磷脂酰胆碱、脂肪酸及磷脂酰乙醇胺。[结论] 针灸治疗可能通过多靶点、多通路来改善脑血管微循环、促进血管生成、减少脂质沉积、减缓炎症反应等改善机体免疫。结合文献数据,认为针灸的治疗具有组分多、目标多、路径多的特点,对于缺血性脑卒中有一定疗效。     

斑马鱼模型评价如意珍宝丸抗炎镇痛作用研究

目的 采用斑马鱼模型研究如意珍宝丸抗炎镇痛作用.方法 用硫酸铜诱导转基因中性粒细胞荧光斑马鱼炎症模型,冰乙酸诱导AB系斑马鱼外周疼痛模型,佛波酯诱导AB系斑马鱼中枢疼痛模型.利用图像处理软件分别进行图像分析并计算如意珍宝丸对斑马鱼的抗炎镇痛作用.结果 如意珍宝丸10、33.3和100μg/mL组抗炎药效分别为9％(P>0.05)、33％(P<0.01)和84％(P<0.01),对外周疼痛的缓解率分别为0.2％(P>0.05)、13％(P>0.05)和33％(P<0.05),对中枢疼痛的缓解率分别为5％(P>0.05)、23％(P>0.05)和46％(P<0.01).结论 如意珍宝丸具有明显的抗炎及外周、中枢镇痛作用.     

胆固醇增高所致糖尿病人红细胞膜的改变

临床上,糖尿病人除了一般的体征外,实验室检查并有胆固醇的增高,而胆固醇可致红细胞膜的结构发生改变,使红细胞形态变形能力降低,其作用:1、使红细胞膜的流动性改变正常红细胞膜脂质主要包括胆固醇,磷脂和糖脂,约占膜总重量的40%,磷脂可分为磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE),磷脂酰丝氨酸(PS)和神经鞘磷脂(SM).这些脂质排列成厚约75—90A°的双分子层,其中外层主要由PC和SM磷脂构成,而内层主要由PS和PE磷脂构成,胆固醇也主要分布在膜的外层,因此红细胞膜内外两层脂质的分布呈不对称性.正常红细胞胆固醇与磷脂的摩尔分子比等     

热毒宁注射液对兔急性肺损伤的防治作用

目的 研究中药热毒宁(RDN)对于内毒素性急性肺损伤(ALI)兔的肺局部致炎因子及表面活性物质(主要成分为磷脂酰胆碱,PC)的影响及意义.方法 3组健康兔,静脉注射内毒素建立急性肺损伤模型,应用RDN预处理后,不同时间点检测外周血液IL-8、IL-10、TNF-α的含量及支气管肺泡灌洗液(BALF)内的PC和磷脂酰乙醇胺(PE)的含量,并用流式细胞仪测定外周血及BALF内的多核粒细胞(PMN)凋亡、坏死细胞比例及呼吸爆发功能.结果 内毒素诱导的ALI兔血和BALF中的致炎因子含量较对照组显著升高,肺通透指数升高,PC下降,PE增加(均P<0.05).BALF中PMN成活比例增加,凋亡延迟,呼吸爆发明显增强.而RDN的使用均可抑制上述各变化(P<0.05),并明显改善肺病理表现.结论 RDN的预处理可防治内毒素诱导的兔ALI的发生与发展.     

牦牛角对LPS诱导发热大鼠模型的解热活性评价及机制研究

  目的  基于脂多糖(LPS)诱导发热大鼠模型评价牦牛角解热活性并探讨其作用机制, 以期为牦牛角新资源药材与开发利用提供科学依据。  方法  以大鼠肛温变化值及体温反应指数评价牦牛角解热活性; 采用ELISA试剂盒测定下丘脑中PGE₂、cAMP的含量及血清中TNF-α与IL-1β的含量, 并结合超高压液相色谱飞行时间质谱法(UHPLC-Q-TOF-MS)检测发热大鼠血浆中内源性标志物, 探索牦牛角解热机制。  结果  牦牛角给药后1、2、3 h大鼠体温明显下降(P < 0.05), 低剂量组TNF-α及cAMP水平均显著降低(P < 0.01), 高剂量组cAMP水平显著降低(P < 0.01), 牦牛角给药组均能抑制IL-1β与PGE₂水平。从空白组与模型组血浆样本中共鉴定出15个潜在差异代谢物, 牦牛角高剂量给药后可显著回调其中11个代谢物, 主要包括磷脂酰乙醇胺、鞘磷脂、腺嘌呤、琥珀酸、L-苏氨酸、4-羟脯氨酸、磷脂酰胆碱、溶血性磷脂酰乙醇胺等, 主要涉及甘油磷脂代谢通路。  结论  牦牛角解热活性确切, 其作用机制可能与抑制内源性致热源与中枢体温正性调节介质释放、调节脂质代谢密切相关。      

基于高效液相色谱-质谱联用技术的HBV相关性肝纤维化血清代谢标志物筛选

目的：探讨乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）相关肝纤维化和慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）患者血清代谢谱差异,寻找与HBV相关肝纤维化的潜在标志物。方法：采用高效液相色谱-质谱联用技术分析16名HBV相关肝纤维化和16名CHB患者血清代谢谱;应用统计分析及数据库检索,鉴定出2组间差异代谢物;利用MetaboAnalyst 4.0软件对差异代谢物进行代谢通路分析和富集分析,筛选出富集的主要代谢通路及通路上差异代谢物;最后,利用受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线评价主要差异代谢物的诊断性能。结果：2组共筛选并鉴定出54种差异代谢产物。代谢通路和富集分析发现,鞘脂代谢通路[-log(P)=9.75,impact=0.42]和甘油磷脂代谢通路[-log(P)=10.90,impact=0.06]是HBV相关肝纤维化的主要富集代谢通路,其中神经鞘磷脂、1-磷酸-鞘氨醇、（神经）鞘氨醇、神经酰胺4种差异代谢物富集于鞘脂代谢通路,而磷脂酰胆碱、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰肌醇、磷脂酸、磷脂酰甘...     

磷脂酰胆碱,磷脂酰乙醇胺的柱层析分离

本文报道以薄层层析为先导,用柱层析法分离磷脂酰胆碱(PC)和磷脂酰乙醇胺(PE)。实验表明利用普通的柱层析法分离PC和PE是可行的,为不用昂贵仪器设备分离制备不同磷脂纯品提供了可能性。     

基于液相色谱-质谱联用的血清代谢组学在中医上火研究中的应用

[目的]利用代谢组学表征上火人群血清代谢组的特异性变化,为进一步探索上火的发病机制提供参考依据。[方法]采集30例上火和24例非上火人群血清样本,采用液相色谱-质谱联用(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)技术对血清中代谢物进行检测,并结合正交信号校正-偏最小二乘法判别分析(orthogonal signal correction-partial least squares discriminant analysis,OSC-PLS DA)和t检验挖掘上火后发生显著变化的血清代谢物,进一步进行结构鉴定,解释上火状态下的人体代谢变化的病理生理机制。[结果]结合单变量和多变量统计分析手段筛选出上火与非上火人群中存在显著差异的代谢物,部分代谢物结构已经确认,主要是脂类物质,包括2种磷脂酰胆碱(34:1和38:7)、2种溶血磷脂酰胆碱(18:1和16:0)、1种磷脂酰乙醇胺(34:2)、1种溶血磷脂酰乙醇胺(18:2)、2种鞘脂(44:2和40:2)、1种甘油三酯(53:3)及胆红素等。[结论]利用LC-MS技术从整体水平上探讨上火人群血清代谢谱的变化,发现多种脂质和胆红素有一定程度地下降,可能与上火人群体内炎性反应和氧化应激的发生有关。     

Genisein对内毒素致急性肺损伤的保护作用

目的 探讨genistein[5，7，45—三羟(基)异黄酮]对内毒素(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)的保护作用及其可能作用机制。方法 将大鼠随机分为以下4组：生理盐水组(S组)、genistein组(G组)、LPS组(L组)和genistein预处理组(Gpre组)。肺湿干重比(W／D)和支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量作为肺损伤指标。髓过氧化物酶(Myeloperoxidase，MPO)活性及BALF中细胞学分析来评估中性粒细胞的聚集和活性。检测TNF—α在肺脏蛋白质和mRNA水平的变化。观察肺组织病理学上的改变。结果 genistein预处理显著抑制LPS诱导的肺损伤指标升高、中性粒细胞在肺脏的聚集和激活以及TNF—α的表达。预先给予genistein改善了LPS所致形态学上广泛的损伤。结论 genistein预处理能够减轻LPS诱导的大鼠急性肺损伤。这种有益效果可能部分通过genistein抑制中性粒细胞聚集、激活和TNF—α的表达而实现的。     

抑制中性粒细胞PD-L1表达对脓毒症T淋巴细胞功能的影响

目的: 探讨脓毒症状态下中性粒细胞对T淋巴细胞功能的影响及相关机制。方法: 采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激中性粒细胞,模拟脓毒症状态下的体外模型。分离人外周血中性粒细胞并分离出淋巴细胞,分为对照组、LPS组、中性粒细胞组和LPS+中性粒细胞组4个组。采用流式细胞术检测淋巴细胞凋亡、增殖、活性和炎症细胞因子浓度,以及中性粒细胞表面程序性死亡配体1（PD-L1）的表达;流式细胞术检测使用不同浓度PD-L1抗体后的淋巴细胞活性。结果： 与对照组相比,中性粒细胞组和LPS+中性粒细胞组淋巴活性明显降低,凋亡明显增加,细胞增殖明显降低,CD69和CD71表达百分比、平均荧光强度、γ干扰素和IL-2的释放显著降低(P均<0.01);与LPS组相比,LPS+中性粒细胞组能显著抑制淋巴细胞增殖、活化和细胞因子的释放(P均<0.05);与对照组相比,LPS组PD-L1表达明显增加(P<0.05);与对照组相比,中、高浓度组淋巴细胞存活百分比明显增加(P均<0.05),且呈浓度依赖性。 结论： 脓毒症状态下中性粒细胞通过PD-L1/PD-1通路途径抑制T淋巴细胞的功能。     

玄参提取物对甲亢模型大鼠肝脏代谢组学的影响

目的探讨玄参提取物对甲亢模型大鼠肝脏代谢组学的作用及作用机制。方法通过超高效液相色谱-飞行时间-质谱技术分析优甲乐及玄参提取物作用下的大鼠肝脏代谢物谱。应用正交偏最小二乘判别分析法研究空白组和模型组之间的代谢物谱差异,并通过变量重要性投影(VIP)在肝脏中发现了潜在生物标志物。通过比较潜在生物标志物的含量差异,探讨玄参的干预作用。结果在模型组大鼠肝脏代谢物中发现了21个潜在生物标志物,而玄参提取物显著回调的代谢物有14个,分别参与糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚生物合成、花生四烯酸代谢、嘌呤代谢、α-亚麻酸代谢、亚油酸代谢、谷胱甘肽代谢和甘油磷脂代谢。结论玄参提取物可能通过改善甲亢模型大鼠肝脏中相关潜在生物标志物表达及其相关代谢通路发挥治疗甲亢的作用。     

和厚朴酚通过抑制氧化应激减轻脂多糖诱导的急性肺损伤

【目的】探讨和厚朴酚对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)的影响及机制。【方法】选取40只SPF级BALB/c小鼠,随机分为5组:正常对照组,LPS组,和厚朴酚低、高剂量组,地塞米松组。应用LPS诱导小鼠ALI模型。和厚朴酚腹腔注射后,进行支气管肺泡灌洗液(BALF)中的中性粒细胞计数、白蛋白浓度、小鼠肺泡通透性、肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性检测。采用试剂盒分析各组小鼠肺组织中丙二醛(MDA)、蛋白质羰基含量(PCC)、活性氧(ROS)、谷胱甘肽(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、还原型谷胱甘肽过氧化氢酶(GPx)活性、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性。【结果】LPS组小鼠BALF中的中性粒细胞计数、白蛋白浓度、MPO活性、伊文思蓝(EB)含量增加(P0.05),抗氧化酶活性显著下降(P0.05)。经和厚朴酚干预后,小鼠BALF中中性粒细胞计数、白蛋白浓度、MPO活性、EB含量及脂质过氧化水平显著下降,抗氧化酶活性显著升高(P0.05)。【结论】和厚朴酚可通过抑制氧化应激减轻LPS诱导的ALI。     

β-榄香烯对人膀胱癌BIU-87细胞磷脂膜功能及Bcl-2表达的影响

目的探讨β-榄香烯对人膀胱癌BIU-87细胞磷脂膜功能及Bcl-2表达的影响。方法[32P]Pi同位素参入,提取细胞磷脂进行HPTLC分析细胞磷脂(PC及PE)代谢,考马斯亮蓝法测定细胞膜蛋白水平,分析细胞脂膜流动性及流式细胞仪测定Bcl-2表达的变化。结果随着β-榄香烯浓度的增加,[32P]Pi参入细胞PC、PE量明显降低,膜蛋白水平及Bcl-2表达明显降低,其最大抑制率分别为:41.1%、43.3%、43%、50%,呈明显的量效关系(P<0.05);β-榄香烯明显降低BIU-87细胞膜脂流动性。结论β-榄香烯可以明显抑制BIU-87细胞磷脂代谢、Bcl-2表达及脂膜流动性,提示磷脂(PC及PE)及Bcl-2与膀胱癌BIU-87细胞凋亡有密切关系。     

LPS对PC12细胞NF-κB的激活时程

[目的]了解脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对PC12细胞中核转录因子(NF-κB)激活过程。[方法]采用LPS(200 ng/mL)刺激培养的PC12细胞0.5~4 h后,以免疫细胞化学染色和W estern b lot方法检测不同时间点NF-κB的激活和表达水平。[结果]LPS刺激PC12细胞0.5 h后,NF-κB开始激活表达,1 h时NF-κB激活表达水平增加,2 h时NF-κB激活表达水平达到高峰,4 h时NF-κB激活表达水平有所降低,LPS各组与正常对照组比较差异有显著性意义(P<0.01)。[结论]LPS可诱导培养的PC12细胞中NF-κB一过性激活高表达。     

血管内皮生长因子受体抑制剂对哮喘模型小鼠的抗肺部炎症作用

[目的]观察血管内皮生长因子受体抑制剂对哮喘模型小鼠肺部炎症的影响.[方法]利用鸡卵清蛋白诱导建立小鼠哮喘模型,观察血管内皮生长因子受体抑制剂(SU 5614)对小鼠肺部感染、支气管肺泡灌洗液中细胞总数和白细胞分类的变化情况.[结果]哮喘模型组小鼠支气管肺泡灌洗液中细胞总数、中性粒细胞计数和嗜酸性粒细胞数明显增加,SU 5614组则明显降低.HE染色显示哮喘模型组小鼠肺部炎症明显,而SU 5614组则明显减轻.[结论]在小鼠哮喘模型中血管内皮生长因子受体抑制剂SU 5614具有明显的抗肺部炎症作用.     

原发性高血压病患者血清磷脂变化的临床意义

目的 :观察血清磷脂酰胆碱 (PC)、磷脂酰丝氨酸 (PS)、磷脂酰乙醇氨 (PE)在原发性高血压病 (EH )患者中的变化 ,以探讨血清磷脂在EH的发病过程中是否起作用。方法 :2 6例EH患者与正常对照组 5 0例。抽取EH患者血压 >14 0 90mmHg时的空腹静脉血。利用高效液相色谱法测定血清中PC、PS、PE的含量。结果 :①EH组与对照组的PC比较无统计学意义 ,P =0 0 795。②EH组与对照组的PS比较无统计学意义 ,P =0 2 2 92。③EH组与对照组的PE比较有统计学意义 ,EH组的PE高于对照组 ,P =0 0 43 8。结论 :EH病人PC、PS和正常对照组无差别 ,可能由于EH病人无血栓形成 ,血小板膜尚无磷脂表面形成。EH病人的血清PE增加 ,可能由于去甲肾上腺素增多、血管壁张力增高等因素使血小板膜PE由膜内到膜外 ,血小板被激活 ,继而导致缩血管物质TXA2 增加 ,这个过程可能是EH发病机制的始动或中间环节之一。     

甲基苯丙胺诱导的斑马鱼位置偏爱模型研究

目的 建立甲基苯丙胺诱导的斑马鱼条件性位置偏爱模型.方法 根据药物依赖实验研究中的条件性位置偏爱(CPP)原理,设计斑马鱼位置偏爱箱.根据斑马鱼的天然位置偏爱特性,决定其偏爱侧与非偏爱侧.模型组斑马鱼腹腔注射甲基苯丙胺后,放于非偏爱一侧(伴药箱);注射生理盐水后,放于偏爱一侧(非伴药箱),共训练5d,观察甲基苯丙胺诱导的斑马鱼位置偏爱效应.结果 空白对照组造模前后斑马鱼在伴药箱的活动时间无明显变化[分别为(287.5 ±80.18)s,(276.3±85.04)s],差异无显著性(P＞0.05).模型组经5d训练,斑马鱼在伴药箱的活动时间明显延长[(465.5±113.49)s],与造模前[ (247.9±95.62)s]相比,差异有显著性(P＜0.01);与空白对照组[(276.3±85.04)s]相比,差异也有显著性(P＜0.01).结论 甲基苯丙胺能诱导斑马鱼形成条件性位置偏爱效应,本实验建立的斑马鱼位置偏爱模型可作为一种新的药物依赖动物模型.