病毒载体介导BDNF基因表达在大鼠神经元AD模型中的作用

目的 探讨重组腺伴随病毒（rAAV）载体介导表达人脑源性神经营养因子（hBDNF）基因以及表达的hBDNF对β淀粉样蛋白（Aβ）诱导的AD模型神经元保护效应的机制。方法 使用分子克隆技术克隆了hBDNF基因，并且构建了携带hBDNF基因的rAAV病毒载体（AAV-hBDNF），使用病毒载体转染Aβ诱导损伤的海马神经元。使用MTT检测和流式细胞仪分析观察细胞凋亡变化，同时使用免疫细胞化学技术检测了BDNF蛋白以及Bcl-2抗凋亡蛋白的表达，使用激光共聚焦显微镜观察细胞内游离钙离子浓度（[Ca^2＋]）i的变化。结果 结果显示重组病毒对培养的海马神经元进行了有效的转染，BDNF蛋白表达水平明显增高，表达的BDNF对Aβ诱导的神经元损伤有显著的保护效应，在BDNF治疗组表现出抗凋亡蛋白Bcl-2的表达增高和有效地维持了[Ca^2＋]i平衡。结论 表达的BDNF通过抑制Aβ依赖的细胞内钙超载和增加抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，有效地保护神经元抵抗Aβ神经毒性引起的凋亡。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌blaCTX-M基因型及耐药性检测

目的 了解我院产超广谱13，内酰胺酶（extended-spectrumβ-lactamascs，ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中CTX-M型耐药基因的分布及其耐药情况。方法 用针对SHV、TEM、CTX-M基因的特异性引物进行PCR扩增确定超广谱β--内酰胺酶基因型，对扩增到的CTX-M基因进行DNA序列分析；采用三维实验检测菌株产AmpC酶；采用K—B琼脂扩散法进行菌株的药物敏感性测定。结果34株产CTX-M酶菌中有28株同时产2种或2种以上的B．内酰胺酶，并且其中有一株同时产两种CTX-M酶。序列分析证实35份CTX-M的扩增产物中有17份为CTX-M-14，占48．6％；11份为CTX-M-3，占31．4％；4份为CTX-M-9，占11．4％；2份为CTX—M．19，占5．7％；1份为CTX-M-13，占2．9％。产CTX-M酶菌株对氨苄西林、头孢唑啉、头孢噻肟、头孢曲松、头孢呋辛钠、哌拉西林、环丙沙星、头孢吡肟、头孢哌酮，舒巴坦、头孢他啶、头孢西丁、庆大霉素、哌拉西林，他唑巴坦、氨曲南、亚胺培南和美洛培南的耐药率分别是100％、100％、100％、100％、100％、100％、97．1％、52．5％、53．1％、32．4％、38．2％、75．8％、23．5％、63．6％、0、0。产其它亚型ESBLs的菌株对上述药物的耐药率分别是100％、92．9％。78．6％、71．4％、92．9％、92_3％、57．1％、21．4％、7．1％、78．6％、64．3％、64-3％、38．5％、78．6％、0、0。结论 产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中CTX-M型耐药基因主要是CTX-M-14、CTX-M-3、CTX-M-9、CTX-M-19和CTX—M．13；产CTX-M酶菌株绝大多数同时产其它多种β-内酰胺酶，其对头孢唑啉、头孢噻肟、头孢曲松、头孢呋辛钠、哌拉西林、环丙沙星、头孢吡肟、头孢哌酮，舒巴坦的耐药水平高于不产CTX-M型ESBLs株（P〈0．05）；耐药表型呈多样性，亚胺培南或美洛培南是临床治疗产CTX-M酶菌株感染的首选药物。     

野罂粟不同提取物止泻作用的筛选研究

目的:观察野罂粟(PN)不同提取物及野罂粟总生物碱(TAPN)的止泻作用,筛选野罂粟止泻作用的有效部位。方法:以昆明种小白鼠为研究对象,观察PN不同提取物(1g/kg)对番泻叶致泻小鼠的止泻作用及对正常小鼠小肠炭末推进率的影响;TAPN(0.1g/kg、0.2/g和0.4g/kg)对番泻叶致泻小鼠的止泻作用,TAPN对家兔离体十二指肠自主运动的影响,筛选野罂粟止泻作用的有效部位。结果:氯仿提取物和乙酸乙酯提取物均有不同程度抗番泻叶性腹泻作用,抑制正常小鼠小肠推进运动。不同浓度的TAPN均有不同程度抗番泻叶性腹泻作用,且对小鼠离体小肠自主收缩运动具有抑制作用。结论:野罂粟发挥止泻作用的主要有效部位为其脂溶性生物碱。     

白假丝酵母菌对人阴道上皮细胞TLR4mRNA表达的影响

目的探讨白假丝酵母菌对人阴道上皮细胞Toll样受体4（Toll-like receptor4，TLR4）mRNA表达的影响。方法用白假丝酵母菌热灭活孢子刺激体外培养的人阴道上皮细胞12h和24h，应用实时定量逆转录聚合酶链反应（QRT-PCR）检测细胞TLR4mRNA的表达水平。结果正常人阴道上皮组织和体外培养人阴道上皮细胞均表达TLR4mRNA。白假丝酵母菌热灭活孢子刺激12h，上皮细胞中TLR4 mRNA表达明显高于对照组和刺激24h组P〈0．05，刺激24h组与对照组比较，无明显差异P=0．50。结论人阴道上皮细胞构成性表达少量TLR4，白假丝酵母菌刺激12h时人阴道上皮细胞表达TLR4 mRNA增加，推测TLR4可能在人阴道上皮细胞识别白假丝酵母菌和启动防御感染的早期起一定作用。     

北京地区健康妇女阴道需氧菌群分析

目的:了解正常妇女阴道需氧菌群的构成。方法:对北京地区872例健康体检妇女进行阴道需氧菌群培养,对菌群的构成进行分析。结果:①阴道感染患者的阴道菌群培养的阳性率高于正常妇女(P<0.05),而年龄对菌群培养的阳性率无明显影响;②北京地区正常妇女阴道主要需氧菌群为草绿色链球菌、类白喉棒状杆菌,念珠菌、粪肠球菌和表皮葡萄球菌;③在月经周期的不同时段,阴道需氧菌群的构成亦不相同。结论:了解阴道正常菌群的构成情况将有助于促进阴道感染的临床治疗及研究。     

电针四神聪配合心理疗法治疗神经衰弱

神经衰弱是指大脑由于长期的情绪紧张和神经压力，从而产生精神活动能力的减弱，其主要特征是精神易兴奋和脑力易疲劳、睡眠障碍、头痛等，伴有各种躯体不适等症状，病程迁延。症状时轻时重，病者波动常与社会心理因素有关。笔者近两年来应用电针配合心理疗法治疗该病取得...     

抗击严重急性呼吸综合征的医生与护士心理状态的比较与分析

为分析抗击严重急性呼吸综合征(SARS)的医生与护士的心理状态和差异,在SARS暴发的3个月中共收集了来自多家SARS定点医院的1532份医生和护士的心理健康问卷,应用时勘心理量表与Zung自评抑郁量表进行分析比较。发现无论处于一线还是二线,医生的一般心理健康得分要高于护士,自评抑郁量表得分低于护士,且护士的自评抑郁量表得分要高于常模组。逐步相关回归分析显示,抑郁量表得分同压力源,如“社会对医护人员的支持不够”,“治疗条件和生活环境不好”,“缺乏家庭亲人的支持和交流”等有关,同参加体育锻炼的程度,文化程度呈负相关。医生的心理状态和抑郁状态好于护士。提示应针对不同原因给予干预,同时应对于发现的相关因素予以改善。     

冠心宁注射液治疗急性心肌梗死的预后及对血液流变学的影响

目的观察冠心宁注射液治疗急性心肌梗死(A-MI)的预后及对血液流变学指标的影响。方法AMI30例予以冠心宁注射液20ml,每日1次静脉滴注,15d为1疗程,进行疗效评价,并观察治疗前后血液流变学的指标变化。结果治疗前后全血比黏度、血浆比黏度、红细胞压积及血小板聚集率下降明显。结论冠心宁注射注液可显著改变血液流变学状态,而这种改变有利于提高AMI的预后,有效预防再梗死的发生。     

早期早产临产不同干预措施的探讨

目的探讨对早期早产临产者实施干预的最佳时机和最佳方法.方法选择2003年1月至2006年3月发生在34周前的早产临产病例73例,宫口开大5 cm以下,接受紧急宫颈环扎术和硫酸镁抑制宫缩者(39例)与接受单纯宫缩抑制剂治疗者(34例)进行对比分析.结果紧急宫颈环扎术联合宫缩抑制剂组的保胎天数、34周后分娩率明显高于单纯镁抑制组(P＜0.01).对早产临产干预结局的影响因素为紧急宫颈环扎术.结论单纯采用硫酸镁抑制宫缩对早产临产者进行干预可以延缓分娩,对于宫颈口扩张在5 cm以下的早产临产者,联合实施紧急宫颈环扎术和使用宫缩抑制剂,可以明显增加34孕周以上的分娩率.     

β淀粉样肽与HbcAg/MIR融合蛋白的免疫血清在AD转基因细胞模型中的生物效应

目的 研究β淀粉样肽(Aβ)与乙肝核心抗原主要免疫优势区(HbcAg/MIR)的融合蛋白(c-Aβ-c)在BL21/pET28原核表达体系的表达并进行腹腔内注射表达的融合蛋白免疫小鼠,检测免疫血清的免疫原性以及体外的生物学效应.方法 应用分子克隆技术构建原核表达质粒pET-28a/c-Aβ-c并进行c-Aβ-c融合基因在BL21菌的IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表达的融合蛋白,用纯化的c-Aβ-c融合蛋白腹腔注射免疫动物,ELASA检测其抗Aβ抗体效价,MTT法和流式细胞术检测它应用于Alzheimer's disease(AD)转基因细胞的生物效应.结果 表达的c-Aβ-c融合蛋白主要以包涵体形式存在于细菌的沉淀中,表达水平占细菌总蛋白量的30%以上.免疫小鼠血清中抗Aβ抗体效价达1∶16000,抗血清抑制了AD转基因细胞中Aβ的神经细胞毒性,明显降低了细胞凋亡的比率.结论 c-Aβ-c融合蛋白具有良好的Aβ免疫原性,其动物免疫血清有效抑制Aβ肽的细胞毒性.