米渣肽双酶两步水解法制备过程中物化特性与结构变化

探究双酶法制备米渣蛋白肽过程肽的组成结构变化。基于前期研究基础,采用双酶法以胰蛋白酶+风味蛋白酶,中性蛋白酶+风味蛋白酶4 h内分别连续制备两类米渣肽RDPH-1和RDPH-2。随着反应的进行,发现前者较后者水解更快速且程度更深,4 h时水解度分别为29.09与16.47;米肽产物平均粒度大多<1 000 nm,同时粒度与分子结构随着米肽的酶解与聚集发生动态变化;表面疏水性都呈先下降后上升的趋势,且前者较后者整体大10倍多;RDPH-1较RDPH-2二级结构更稳定,两者的氨基酸组成不同,但主要成分相似,营养价值相当。该法制备米渣肽的过程研究表明,胰蛋白酶和风味蛋白酶更适合酶解米渣得到小分子肽,且具有规律性,对肽的高效制备具有指导意义。     

重组人脑利钠肽治疗老年急性心肌梗死并心力衰竭的效果分析

目的:评价重组人脑利钠肽(rhBNP)治疗老年急性心肌梗死并心力衰竭的疗效。方法:选择2011年1月-2013年1月来本院治疗的100例老年急性心肌梗死并心力衰竭患者,按照随机分组的原则,将100例患者分为观察组和对照组,每组50例。对照组患者采用对症支持治疗(利尿、扩血管),并服用硝酸甘油,观察组患者在对照组对症支持治疗基础上加用rhBNP。分析对比两组患者在临床症状改善和疾病相关指标改善方面的差异。结果:治疗后,两组患者临床症状均明显改善,治疗7 d后,观察组患者心率较低,呼吸困难人数较少,尿量恢复且多于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);疾病相关指标方面,观察组hs-CRP和NT-proBNP较低,且治疗后观察组LVEF明显较高,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05),LVDd组间比较差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论:重组人脑利钠肽治疗老年急性心肌梗死并心力衰竭效果确切,患者症状和疾病相关指标均明显改善,可延长患者的健康生存周期。     

牛乳铁蛋白肽转基因小鼠的构建

目的:探讨牛乳铁蛋白肽在转基因鼠乳汁中的表达及其抑菌活性。方法:将实验室构建并保存的包含山羊β-酪蛋白基因启动子和牛乳铁蛋白肽基因的乳腺特异表达载体PI-bcp-LfcinB,用Xho I和Nru I双酶切,得到含有全部表达盒的显微注射DNA片段,采用常规显微注射技术获得转基因小鼠。并通过对泌乳期转基因雌鼠乳腺组织的RT-PCR检测,确定了牛乳铁蛋白肽在mRNA水平的表达,同时利用琼脂板扩散法检测了转基因鼠乳汁中表达产物的抑菌活性。结果:获得了牛乳铁蛋白肽转基因小鼠,且转基因小鼠乳汁中能够表达具有抑菌活性的牛乳铁蛋白肽。结论:通过转基因动物乳腺可以获得具有生物活性的牛乳铁蛋白肽,为进一步研究抗菌肽转基因牛、培育抗乳房炎奶牛新品种以及通过建立转基因动物生物反应器进行抗菌肽的大量生产奠定了基础。     

诺邓火腿粗肽抗氧化活性及亚硝酸钠清除活性

以诺邓火腿为研究对象,提取诺邓火腿粗肽,测定不同质量浓度粗肽液对羟自由基(·OH)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的清除效果、Fe~(2+)螯合能力、脂质氧化抑制能力及普通条件和模拟胃液条件下对亚硝酸钠的清除能力。结果表明:质量浓度为5.0 mg/m L的诺邓火腿粗肽液对·OH和DPPH自由基的清除率分别为47.81%和67.10%,与相同质量浓度的谷胱甘肽(glutathione,GSH)相比差异极显著(P0.01);质量浓度为5.0 mg/m L的粗肽液对Fe~(2+)的螯合率为31.38%,与GSH相比差异不显著(P0.05);质量浓度为25.0 mg/m L的粗肽液反应结束后144 h时的脂质氧化抑制率达77.86%,与GSH相比差异极显著(P0.01);普通条件和模拟胃液条件下,质量浓度为10.0 mg/m L的粗肽液对亚硝酸钠的清除率分别为(84.31±0.77)%和(80.97±2.00)%,与GSH相比差异极显著(P0.01)。综上所述,诺邓火腿粗肽液具有一定的抗氧化活性和脂质氧化抑制能力,同时具有较强的亚硝酸钠清除活性。     

穴位压豆联合脾氨肽口服冻干粉治疗儿童缓解期哮喘临床研究

目的:观察穴位压豆联合脾氨肽口服冻干粉对临床缓解期哮喘儿童的疗效以及对其肺功能和免疫功能的影响。方法:将115例处于儿童缓解期哮喘患儿随机平均分为观察组和对照组。其中观察组65例采用穴位压豆联合脾氨肽口服冻干粉的方法治疗,对照组50例采用丙酸氟替卡松吸入治疗。观察两组患者的疗效、复发情况、治疗前后肺功能及免疫功能的变化情况。结果:1观察组有效率为92.3%,对照组有效率为64.0%,观察组疗效明显优于对照组(P<0.05);2两组治疗后哮喘发作次数较治疗前明显减少(P<0.05),其中观察组较对照组减少更为显著(P<0.05);3两组患儿经过治疗后第1秒钟用力呼气量与用力肺活量比值(forced expiratory volume in 1 second,FEV1%)和呼气峰流速(peak expiratory flow,PEF)均有明显改善(P<0.05),其中观察组改善更为显著(P<0.05);观察组在经过治疗后最大呼气中期流量(maximum midexpiratory flow,MMEF75/25)较治疗前明显升高(P<0.05),对照组在经过治疗后MMEF75/25无明显变化(P>0.05),观察组治疗后MMEF75/25较对照组明显改善;4治疗后,观察组免疫功能明显高于对照组(P<0.05)。结论:穴位压豆联合脾氨肽口服冻干粉能有效控制缓解期哮喘患儿的病情,降低其复发率,并能有效改善其肺功能,提高患儿免疫功能。     

甲状腺功能亢进症患者左心室峰值应变与血浆B型脑钠肽的相关性研究

目的:应用三维斑点追踪成像技术(3D-STI)评价甲状腺功能亢进症(甲亢)患者左心室整体收缩功能,并探讨左心室整体峰值应变与血浆B型脑钠肽(BNP)水平的相关性。方法:选取2015年5-11月本院收治的63例甲亢患者作为研究对象,根据甲亢及甲状腺心脏病诊断标准分为甲亢组31例和甲亢心组32例,另择同期健康志愿者30例作为对照组,三组均行常规和三维超声心动图检查,测量左室舒张末期内径(LVDD)、左室收缩末期内径(LVSD)、室间隔厚度(IVST)、左室后壁舒张末期厚度(LVPWT)、左室射血分数(LVEF)、左室整体峰值纵向应变(GLS)、圆周应变(GCS)、面积应变(GAS)及径向应变(GRS)及血浆BNP水平。结果:GLS、GCS、GAS及GRS值甲亢组均低于对照组(P<0.05),甲亢心组均低于甲亢组及对照组(P<0.05);甲亢组LVDD、LVSD、IVST、LVPWT及LVEF值与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),甲亢心组LVDD、LVSD高于甲亢组和对照组(P<0.01),LVEF均低于甲亢组和对照组(P<0.01),三组间IVST、LVPWT值比较差异均无统计学意义(P>0.05);血浆BNP甲亢组高于对照组,甲亢心组高于甲亢组和对照组,比较差异均有统计学意义(P<0.05);GLS、GCS、GAS及GRS值与BNP水平均呈负相关,其中与GLS与GAS相关性最好。结论:三维斑点追踪技术可早期评价甲状腺功能亢进症患者心脏功能受损情况,其与血浆BNP水平结合可较敏感地反应心功能的变化及心肌损害程度。     

利拉鲁肽对急性心肌梗死PCI术后心肌的保护作用

目的: 探讨利拉鲁肽对急性心肌梗死（AMI）经皮冠状动脉介入术（PCI）术后心肌的保护作用。 方法: 将110例于我院就诊的初发AMI并发应激性高血糖的患者分为两组，各55例；在常规标准治疗的基础上，观察组患者给予利拉鲁肽治疗，对照组患者采用胰岛素治疗；分别于PCI术前以及术后测定血液肌酸磷酸激酶（CK）、血肌酸激酶同工酶（CKMB）、肌钙蛋白T（cTnT）、B型利钠肽前体（NT-pro-BNP）及超敏C反应蛋白（hs-CRP）比较心肌损伤情况；测定术后7 d及30 d的心肌灌注缺损积分、左心室射血分数（LVEF）、左心室舒张末期内径（LVEDD）比较心功能恢复情况。结果: 两组患者术后CK、CKMB、cTnT、hs-CRP均明显升高（P<0.05），NT-pro-BNP明显降低（P<0.05），观察组48 h峰值明显低于对照组（t=5.188、7.081、2.180、5.091、4.748, P<0.05）；心肌灌注缺损积分两组术后30 d指标较7 d时降低，对照组下降明显（t=7.963,P<0.05），术后7 d观察组明显低于对照组（t=6.235,P<0.05）。LVEF、LVEDD术后30 d指标较7 d时升高，观察组LVEF差异显著（t=2.016,P<0.05）；同期组间比较，术后30 d LVEF差异显著（t=2.032,P<0.05），其余差异不明显（P>0.05）。结论:利拉鲁肽可在AMI患者PCI术后对心肌发挥一定的保护作用。     

致炎血管内皮细胞特异性靶向肽Nts-1的融合表达及其靶向性验证

目的构建致炎血管内皮细胞特异性靶向肽Nts-1的表达载体,表达、纯化融合蛋白,并对其靶向性进行初步验证。方法根据大肠埃希菌密码子偏好性,对Nts-1天然基因序列进行同义突变,并在Nts-1序列两端分别插入一个半胱氨酸使其环化后,克隆至p ET14b-EGFP载体中EGFP序列的C-末端,构建重组原核表达质粒p ET14b-EGFPNts-1,转化大肠埃希菌,IPTG诱导表达,表达的融合蛋白his-EGFP-Nts-1经纯化和SDS-PAGE鉴定后,用LPS致炎人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)体外验证其在细胞表面的亲和力。结果成功构建了p ET-14b-EGFP-Nts-1表达载体,纯化后的融合蛋白相对分子质量约32 000,纯度达95%以上。融合蛋白hisEGFP-Nts-1可特异性地靶向于致炎血管内皮细胞表面,其亲和力是由短肽Nts-1介导的。结论成功表达了融合蛋白his-EGFP-Nts-1,并初步验证了其对致炎血管内皮细胞的亲和力,为其生物化学活性及功能的研究奠定了基础。     

骨质疏松治疗促骨形成与抗骨吸收药物序贯或联合应用

与抗骨吸收药物不同,甲状旁腺素是促骨形成机制的骨质疏松治疗药物。近期不少研究采用促骨形成与抗骨吸收药物的联合或序贯疗法,以期望获得更好的治疗效果。考虑到国内缺少相应的临床报道,本文回顾联合与序贯治疗的研究进展,以为临床骨质疏松治疗提供参考。