日本血吸虫成虫38kDa天然分子抗原的分离纯化与免疫保护性的研究

目的研究日本血吸虫成虫可溶性抗原38kDa（SjAWA38kDa）的动物保护作用，并对SjAWA38kDa作为抗日本血吸虫病分子疫苗的可行性进行评估。方法用SDS-PAGE电泳、切胶、电洗脱、超滤等方法分离纯化SjAWA38kDa．继而用SjAWA38kDa免疫昆明小鼠，然后进行尾蚴攻击感染（40尾／只），进行减虫率和减卵率研究。结果SjAWA38kDa天然蛋白质分子能刺激机体产生抗日本血吸虫的作用，其减虫率为33．8％，减卵率为51．7％，有统计学意义（P〈0．05）。结论SjAWA38kDa分子抗原具有刺激机体产生抗日本血吸虫病的免疫保护作用，可以作为抗日本血吸虫病分子疫苗研究的靶标。     

存活素和CD44V6在甲状腺癌组织中的表达及意义

目的探讨细胞凋亡抑制因子存活素（survivin）和黏附分子CD44V6在甲状腺癌中的表达及其与甲状腺癌侵袭转移的关系。方法采用S-P免疫组织化学染色法，检测100例甲状腺癌和10例正常甲状腺组织中Survivin、CD44V6表达情况。结果Survivin在正常甲状腺组织中无表达，在70例甲状腺乳头状癌（PTC）及30例甲状腺滤泡癌（FTC）中阳性表达率分别为45．7％（32／70）、53．3％（16／30）；CD44V6在70例甲状腺乳头状癌及30例甲状腺滤泡癌中阳性表达率分别为50．0％（35／70）、66．7％（20／30），显著高于正常甲状腺组织；在甲状腺癌组织中Survivin表达与CD44V6表达具有显著相关性（7=0．386，P〈0．05），且两者表达与甲状腺癌的临床分期及有、无淋巴结转移显著相关。结论Survivin和CD44V6表达与甲状腺癌侵袭转移密切相关，且呈协同效应。     

抗日本血吸虫病天然分子疫苗免疫猪血清筛选日本血吸虫尾蚴cDNA文库结果分析

目的通过天然分子疫苗免疫猪血清作为探针筛选日本血吸虫尾蚴cDNA文库,应用表达序列标签获得日本血吸虫新基因.方法制备天然分子免疫猪血清,将筛选的尾蚴cDNA文库中大肠杆菌XL1-Blue侵入大肠杆菌BM25.8后环化成质粒,筛选出已转入质粒的菌株.提取质粒DNA,进行测序,得到一个表达序列标签(EST).通过NCBI网站的BLASTx及BLASTn公共数据库,编辑分析EST序列并进行同源性比较.结果从26个克隆样品中筛选出8个阳性克隆,其中有一个新基因(GenBank登录号DQ097517),该基因全长861 bp,有完整的阅读框架,与蜜蜂(Apis mellifera)SMC3蛋白编码的mRNA基因序列同源性最高.结论疫苗免疫猪血清可作为筛选日本血吸虫新基因的有效探针,新发现1个日本血吸虫相关基因.     

咳喘穴位敷贴对哮喘大鼠肺组织JAK1、STAT6表达的影响

目的 观察咳喘穴位敷贴对慢性支气管哮喘大鼠肺组织JAK1、STAT6表达的影响.方法 将40只SD大鼠随机分为对照组、哮喘模型组、咳喘穴位敷贴组、地塞米松组,每组10只.除对照组外,其余各组采用卵清蛋白致敏并激发的方法 制备慢性支气管哮喘大鼠模型.造模成功后,咳喘穴位敷贴组大鼠相应穴位贴敷咳喘穴位敷贴进行干预治疗,地塞米松组大鼠腹腔注射地塞米松磷酸钠注射液0.5 mg/(kg·d).治疗14 d后取大鼠肺组织,HE染色观察肺组织形态学变化,免疫组织化学、Real time PCR检测肺组织JAK1和STAT6蛋白及mRNA的表达水平.结果 与对照组相比,哮喘模型组大鼠肺组织可见大量炎性细胞浸润,气道内有大量分泌物,肺泡结构紊乱;与哮喘模型组相比,咳喘穴位敷贴组和地塞米松组大鼠肺组织炎性细胞浸润减少、气道分泌物减少、肺泡排列规则.与对照组相比,哮喘模型组大鼠气道上皮JAK1、STAT6蛋白和mRNA表达明显升高(P<0.01);与哮喘模型组相比,咳喘穴位敷贴组和地塞米松组大鼠气道上皮JAK1、STAT6蛋白表达下调(P<0.05或P<0.01),JAK1、STAT6 mRNA表达下调(P<0.01).结论 咳喘穴位敷贴能够改善支气管哮喘大鼠支气管及肺组织炎症,其机制可能与降低JAK1、STAT6 mRNA和蛋白表达有关.     

基于分子连接性指数探归肝经中药成分“印迹模板”的特征

该文主要从分子连接性指数相似性角度探讨归肝经中药成分"印迹模板"的特征,为中药归经作用寻找科学依据。该文以普通高等教育"十二五"国家级规划教材《中药学》和《中药化学》为蓝本,通过查阅文献和检索西北农林科技大学中药系统药理学数据库中的TCMSP子库,归纳并总结单归肝经中药所含成分信息,对各成分的分子连接性指数进行计算,并求算出归肝经中药成分的平均分子连接性指数,与单成分分子连接性指数对比,锁定肝经模板分子类别。通过计算单归肝经中药成分平均分子连接性指数为9.47,与黄酮苷类(9.17±2.11)和萜类(9.30±3.62)化合物比较接近。因此,初步推断肝经的模板分子与黄酮苷类和萜类理化性质相近,从而提出黄酮苷类和萜类成分最能与肝经的"印迹模板"较好匹配的假说。     

人体蠕形螨人群感染现场流行病学的调查与分析

目的 了解人群感染蠕形螨情况和流行规律及居住环境中物品污染情况,为科学防治提供依据。方法 应用挤压刮拭法和透明胶纸粘贴法检验人体皮肤;采用透明胶纸法检验物器具。结果 调查发现在校中学生感染率为48．05％,连续4次检查男、女人群感染率差异无显著性;蠕形螨人群感染随年龄增加而增多,对154名在校生的观察,人体蠕形螨感染具有家庭聚集性;宾馆房间物品检测,面巾和面巾挂杆污染率分别为0．07％和0．03％。结论 蠕形螨人群感染具有家庭聚集性,外界物品可作为传播载体,防治人体蠕形螨应包括感染者和与感染者共同生活人群的治疗,对感染者居住环境中的物品应采取消杀等措施进行处理。     

补肾活血方中马钱苷、莫诺苷、芍药苷含量测定及其对免疫性卵巢早衰小鼠的影响

目的研究补肾活血方中马钱苷、莫诺苷、芍药苷含量测定方法及其对免疫性卵巢早衰小鼠激素血清卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、雌二醇(estradiol,E_2)水平的影响。方法 (1)采用HPLC,色谱柱Hypersil ODS C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)梯度洗脱,柱温30℃,流速为1.0 mL/min,进样量10μL,测定补肾活血方中马钱苷、莫诺苷、芍药苷含量;(2)以小鼠透明带3为抗原,皮下多点注射BALB/c雌性小鼠,建立免疫性卵巢早衰模型,分别用补肾活血方、马钱苷、莫诺苷、芍药苷进行干预,并设空白组、模型组为对照,酶联免疫吸附法测定各组FSH、LH、E_2含量。结果 (1)马钱苷、莫诺苷、芍药苷的线性范围分别在58～1 160μg(r=1.000 0)、203～4 070μg(r=0.999 8)及117～2 340μg(r=0.999 4)内,线性关系良好;这3种成分的平均加样回收率分别为98.6%、98.0%、98.8%,RSD分别为2.18%、1.28%、1.77%;在补肾活血方中按生药量计算,莫诺苷、马钱苷、芍药苷的平均含量分别为(4.612±0.057) mg/g、(1.286±0.014) mg/g、(3.065±0.022) mg/g。(2)与空白组比较,模型组E_2水平显著降低(P0.01),FSH和LH的水平均明显升高(P0.01);与模型组比较,补肾活血方组、马钱苷组、莫诺苷组E_2水平均显著升高(P0.01),FSH和LH的水平均显著降低(P0.01),芍药苷组E_2水平显著升高(P0.01),LH的水平显著降低(P0.01),FSH水平降低(P0.05)。结论所建立的HPLC简便、灵敏、准确,可用于补肾活血方中莫诺苷、马钱苷、芍药苷的含量测定;马钱苷、莫诺苷、芍药苷为补肾活血方中可能的药效物质。     

蛋白酶抑制剂对Balb/c小鼠弓形虫病疗效的实验分析

目的:实验分析蛋白酶抑制剂对Balb/c小鼠弓形虫病的疗效,筛选有效的酶抑制剂,拓展临床对弓形虫病防治用药途径。方法:建立弓形虫病(Balb/c)小鼠模型,观察其患病过程,随机分组,给弓形虫病患鼠选用不同的蛋白酶抑制剂进行治疗,分析其疗效。结果:未经酶抑制剂治疗的Balb/c患鼠均在患病后90h内死亡,患鼠腹水涂片检查,弓形虫发育无异常形态变化。使用蛋白酶抑制剂治疗的Balb/c患病小鼠有8只在患病后200h以上死亡,死亡率占26.7%,患鼠腹水检查,弓形虫发育有一定比例的形态异常。有22只患病小鼠被酶抑制剂治愈,治愈率占73.3%。结论:蛋白酶抑制剂对弓形虫发育和入侵细胞有明显影响,对Balb/c小鼠弓形虫病有较好疗效,其中Pepstatin疗效最佳。     

咳喘穴位敷贴对哮喘大鼠Th1/Th2免疫平衡的影响

目的 探讨咳喘穴位敷贴对哮喘大鼠辅助性T淋巴细胞1(Th1)/辅助性T淋巴细胞2(Th2)免疫平衡的影响.方法 60只雄性SD大鼠随机分为6组:正常对照组、哮喘模型组、生芥子组、生炒各半组、炒芥子组、地塞米松组,每组10只.采用卵清蛋白致敏并激发的方法制备大鼠慢性哮喘模型,白芥子不同配比咳喘穴位敷贴散贴敷穴位干预治疗.采用酶联免疫吸附剂测定法(ELISA)测定各组大鼠血清中干扰素(IFN)-γ、白介素(IL)-4、白介素(IL)-13的含量.结果 与正常对照组比较,哮喘模型组大鼠血清IFN-γ含量明显降低,而IL-4、IL-13的含量明显升高(P＜0.01).与哮喘模型组比较,生芥子组、生炒各半组、炒芥子组和地塞米松组的大鼠血清IFN-γ含量明显升高,而IL-4、IL-13的含量明显降低(P＜0.01),各治疗组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 咳喘穴位敷贴能够调节哮喘大鼠Th1/Th2免疫平衡,改善炎症反应,从而改善哮喘病情.