赖氨酸甲基转移酶PR-Set7在亚砷酸钠致人永生化皮肤角质形成细胞DNA损伤中的作用

目的探讨组蛋白甲基转移酶PR-Set7在亚砷酸钠致人永生化皮肤角质形成细胞(Ha Ca T细胞)DNA损伤中的作用机制。方法将处于对数生长期的Ha Ca T细胞暴露于含终浓度分别为0(对照)、1.25、2.5、5、10μmol/L亚砷酸钠的DMEM高糖培养基染毒24 h。采用MTT法测定Ha Ca T细胞的存活情况。另设对照(24 h)组、亚砷酸钠(10μmol/L,24 h)染毒组、PR-Set7小干扰RNA干扰组(Si PR-Set7,50 nmol/L,48 h)和联合暴露(50 nmol/L Si PR-Set7干扰48 h后,10μmol/L亚砷酸钠暴露24 h)组。分别采用q RT-PCR法检测PR-Set7 m RNA的表达水平,采用Western blot法检测H4K20me1和PR-Set7蛋白的表达水平,采用单细胞凝胶电泳法检测DNA损伤水平。结果与对照组相比,5、10μmol/L亚砷酸钠染毒组Ha Ca T细胞的存活率均较低,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,5、10μmol/L亚砷酸钠染毒组Ha Ca T细胞PR-Set7蛋白和m RNA的表达水平均升高,而H4K20me1蛋白的表达水平降低;2.5、5、10μmol/L亚砷酸钠染毒组Ha Ca T细胞尾部DNA%及尾矩升高,差异有统计学意义(P0.05)。随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,Ha Ca T细胞PR-Set7蛋白和m RNA的表达水平均呈上升趋势,而H4K20me1蛋白和m RNA的表达水平呈下降趋势,DNA损伤水平(尾部DNA%及尾矩)呈上升趋势。与对照组比较,Si PR-Set7干扰组Ha Ca T细胞PR-Set7蛋白的表达大幅下降;亚砷酸钠染毒组、Si PRSet7干扰组和联合暴露组Ha Ca T细胞H4K20me1蛋白的表达水平均降低,而尾部DNA%及尾矩均升高,差异有统计学意义(P0.05)。与亚砷酸钠染毒组比较,联合暴露组Ha Ca T细胞PR-Set7蛋白和m RNA以及H4K20me1蛋白的表达均降低,而Ha Ca T细胞尾部DNA%及尾矩均升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论在对Ha Ca T细胞进行PR-Set7干扰后,亚砷酸钠可能通过抑制组蛋白甲基转移酶PR-Set7蛋白及m RNA的表达水平,从而降低H4K20me1的修饰水平,影响Ha Ca T细胞DNA损伤修复能力,使DNA损伤加重。     

亚砷酸钠对人淋巴细胞白细胞介素和穿孔素及颗粒酶B的影响

目的探讨亚砷酸钠体外染毒对人淋巴细胞白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-10、穿孔素(perforin,PFP)和颗粒酶B(granzyme B,Gr B)水平的影响。方法采集健康成年人外周血,密度梯度离心分离出淋巴细胞,分别暴露于含终浓度为0.00(对照)、5.00、10.00、20.00、30.00μmol/L亚砷酸钠的培养基染毒12、24、48 h。采用HE染色法鉴定染毒模型;MTT比色法检测细胞存活率;ELISA法检测IL-6、IL-10、PFP和Gr B的水平。结果与不同时间的对照组相比,5.00μmol/L亚砷酸钠染毒组淋巴细胞的存活率均升高,而10.00~30.00μmol/L亚砷酸钠染毒组淋巴细胞的存活率均降低,差异有统计学意义(P0.05)。与相同浓度亚砷酸钠染毒12 h比较,20.00、30.00μmol/L亚砷酸钠染毒24 h及10.00~30.00μmol/L亚砷酸钠染毒48 h淋巴细胞的存活率均降低,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,10.00~30.00μmol/L亚砷酸钠染毒12 h组和各浓度亚砷酸钠染毒24 h组及20.00、30.00μmol/L亚砷酸钠染毒48 h组淋巴细胞分泌的IL-6水平均较高,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,30.00μmol/L亚砷酸钠染毒12 h组和20.00、30.00μmol/L亚砷酸钠染毒24 h组及10.00~30.00μmol/L亚砷酸钠染毒48 h组淋巴细胞分泌的IL-10水平均较高,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,10.00~30.00μmol/L亚砷酸钠染毒12、24 h组及各浓度亚砷酸钠染毒48 h组淋巴细胞分泌的PFP水平均较高,差异有统计学意义(P0.05)。与相同浓度亚砷酸钠染毒12 h比较,各浓度亚砷酸钠染毒组淋巴细胞分泌的PFP水平均升高,除10.00μmol/L亚砷酸钠染毒24 h外,差异均有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,30.00μmol/L亚砷酸钠染毒12 h组和20.00、30.00μmol/L亚砷酸钠染毒24、48 h组淋巴细胞分泌的Gr B水平均较高,差异有统计学意义(P0.05)。不同浓度亚砷酸钠染毒12、24、48 h后淋巴细胞分泌的IL-6、IL-10、Gr B水平间比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论砷暴露可诱导IL-6、IL-10、穿孔素及颗粒酶B表达水平升高,导致细胞因子分泌平衡紊乱,此可能在砷致免疫系统损伤中发挥重要作用。     

抗菌肽17BIPHE2通过阻滞肺腺癌A549细胞周期促进其凋亡

目的探讨抗菌肽17BIPHE2抑制人肺腺癌A549细胞增殖机制。方法 MTT比色法检测0~40μmol·L-1的抗菌肽17BIPHE2对A549细胞和正常肺上皮BEAS-2B细胞增殖的影响;流式细胞仪检测17BIPHE2对A549细胞细胞周期、线粒体膜电位、细胞内钙离子的影响;TUNEL染色和流式细胞仪检测17BIPHE2诱导的A549细胞凋亡。结果抗菌肽17BIPHE2可选择性抑制肺腺癌A549细胞增殖(P0.05),对正常肺上皮BEAS-2B细胞无明显抑制作用;A549细胞经不同浓度抗菌肽17BIPHE2处理24 h后,细胞周期阻滞于S期(P0.05);同时抗菌肽17BIPHE2能够明显降低A549细胞中线粒体膜电位(P0.05),随着17BIPHE2浓度不断增加,A549细胞内钙离子浓度也明显升高(P0.05);结论抗菌肽17BIPHE2可能通过阻滞A549细胞细胞周期,降低线粒体膜电位、升高细胞内钙离子浓度从而诱导A549细胞凋亡。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定喀斯特地区地表水中10种全氟及多氟化合物

目的建立喀斯特地区地表水中10种PFASs的超高效液相色谱-串联质谱测定方法。方法水样经WAX固相萃取柱富集和净化后,采用Agilent ZORBAX Extend C18柱分离,以2 mmol/L乙酸铵溶液-甲醇梯度洗脱,在多重反应监测模式下分段扫描,内标法定量。结果各物质在1.0~50 ng/ml范围内线性关系良好,R2值均大于0.99,仪器检出限为0.001~0.01 ng/L。在2、10和50 ng/L的加标水平下,10种PFASs回收率在70%~130%范围内,RSD%低于20%。在分段模式下,可在13 min内完成10种物质的快速检测,各物质之间相互干扰小,基线平稳。应用该方法分析贵州某高原湖泊水样,检出10种PFASs,主要以短链的PFBA、PFBS为主。结论该法分析速度快、灵敏度高、检出限低、稳定性高,可用于地表水中全氟化合物。     

河南省2012-2016年乙型肝炎监测试点数据分析

目的 规范河南省乙型肝炎（乙肝）病例报告方法,提高乙肝病例监测工作质量。方法 选取郑州市新郑市、安阳市林州市、焦作市山阳区、漯河市召陵区、商丘市永城市和信阳市平桥区6个乙肝监测试点（监测点）,通过国家法定传染病报告系统,2012-2016年河南省报告的乙肝病例作为研究对象,2011年数据作为对照数据,分别对不同年份报告法定传染病报告系统的乙肝病例分类情况、HBsAg阳性时间、ALT值报告情况等进行描述性统计分析,对疑似急性乙肝病例进行抗-HBc IgM检测。以2016年监测点数据为基础,估算河南省2016年急性乙肝报告发病率。结果 河南省6个监测点乙肝报告病例从2011年的17 436例下降到2016年2 632例,下降了84.90%（14 804/17 436）;乙肝未分类病例从36.87%（6 370/17 275）下降至0.08%（2/2 632）。2012-2016年,河南省CDC共收到初筛抗-HBc IgM阳性血清777份,经过复核,29.34%（228/777）的疑似急性乙肝病例血样抗-HBc IgM阳性。依据2016年6个监测点急性乙肝报告发病率,估算河南省急性乙肝报告发病率为1.13/10万（95% CI：0.81/10万~1.45/10万）。结论 2012-2016年河南省监测点乙肝病例报告质量和临床诊断病例的准确性均不断提高。监测点应该进一步提高急性乙肝报告病例的血样采集率,改进检测方法。     

ε-聚赖氨酸对金黄色葡萄球菌生长及生物膜形成的影响#br#

目的 研究ε-聚赖氨酸(ε-poly-L-lysine, ε-PL)对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus, S. aureus)生长及生物膜形成的影响。方法 以金黄色葡萄球菌标准菌株ATCC25923及社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)USA300为试验菌株,常量肉汤稀释法(试管)测定最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC),酶标仪检测吸光度法观察各株金黄色葡萄球菌的生长曲线,96孔板结晶紫染色法检测各株菌生物膜的形成并用扫描电子显微镜(SEM)观察生物膜的形成情况。结果 ε-PL对ATCC25923和USA300的MIC均为31.25mg/mL。ε-PL浓度升高时对两株菌生长的抑制作用随之增强。1/2MIC ε-PL能显著降低ATCC25923和USA300生物膜的形成能力。 结论 ε-PL作为一种安全、高效的天然防腐剂,能有效抑制金黄色葡萄球菌细菌的生长及生物膜的形成,为新型药物的研发提供了理论依据。     

肺内单发空洞CT、病理、临床对照分析

目的分析肺内单发空洞的CT表现,提高对单发空洞的鉴别诊断水平。方法对35例经过手术、病理及临床确诊的肺内单发空洞的CT资料,结合病理、临床进行回顾性分析。结果结核性空洞16例,癌性空洞、肺脓肿各7例,真菌性空洞5例。结论螺旋CT能真实反映肺内空洞的大小、形态、壁特征、灶周、肺野的各种表现,结合临床综合分析对空洞的诊断与鉴别有很大的帮助。     

神经病理性疼痛大鼠中脑导水管周围灰质腹外侧区GABAAα3表达的性别差异

目的探讨不同性别神经病理性疼痛大鼠中脑导水管周围灰质腹外侧区(vLPAG)γ-氨基丁酸A型α3亚基(GABAA_(α3))受体表达的差异。方法大鼠24只,雌(F组)雄(M组)各12只;坐骨神经分支选择性损伤(SNI)复制大鼠神经病理性疼痛模型;记录大鼠在各时间点(术前1 d及术后1、3、7和14 d)的机械痛阈和冷痛阈。Western blot检测vLPAG处GABAA_(α3)受体的蛋白表达。结果与术前相比,F组与M组大鼠均出现明显的机械痛敏和冷痛敏反应,F组较M组机械痛阈更低(P0.05),F组冷缩足次数多于M组(P0.05);术后14 d vLPAG处GABAA_(α3)受体蛋白表达增加,F组明显高于M组(P0.05)。结论神经病理性疼痛雌性大鼠较雄性大鼠更敏感,vLPAG处GABAA_(α3)受体表达的上调可能与大鼠痛阈降低有关。     

药学干预对妇科清洁手术围术期预防应用抗菌药物的影响及价值

目的:通过分析临床药学干预措施对妇科清洁手术围术期预防应用抗菌药物的影响,为临床药学工作的开展提供参考依据。方法:选取2013年3月至2014年2月、2014年3月至2015年2月、2015年3月至2017年2月于郑州市妇幼保健院妇科实施清洁手术的全部出院患者551例、506例和739例分别作为干预前、干预中和干预后组;采用药学干预措施后,对比分析干预前、中、后组抗菌药物应用方面的指标变化、手术部位感染率及不良反应发生率等。结果:干预中、干预后组围术期预防应用抗菌药物使用率、使用强度及抗菌药物费用显著下降,用药指征和术后用药维持时间合理率提升;干预前、中、后3组患者手术部位感染率、住院时间比较差异无统计学意义(P>0.05);3组均无药物不良反应发生。结论:药学干预使抗菌药物在妇科清洁手术围术期的预防应用更加合理规范,是安全可行的,而且对减少抗菌药物不规范暴露,遏制细菌耐药,降低医疗费用,节约卫生资源具有深远的社会意义。     

结核抗体测定诊断结核性胸膜炎的应用分析

目的:分析结核抗体测定诊断结核性胸膜炎的应用。方法:48例结核性胸膜炎患者设为研究组,48例非结核性胸腔积液患者设为对照组,比较结核抗体测定结果。结果:研究组血清TB-Ab阳性率高于对照组(P0.05)。结论:结核抗体测定诊断结核性胸膜炎,应用价值高,可推广。