冠心康颗粒对高同型半胱氨酸血症致兔动脉粥样硬化作用的实验研究

目的观察高同型半胱氨酸血症对兔动脉粥样硬化(AS)形成的影响,探讨冠心康颗粒抗AS的作用机制.方法将24只雄性新西兰大耳白兔随机分成3组正常对照组给予基础饲料喂养;同型半胱氨酸模型组在基础饲料中加入质量分数为1%的蛋氨酸;冠心康治疗组在高蛋氨酸饮食中用1.45 mg·kg-1·d-1的冠心康颗粒剂灌胃;每组8只,饮食量为100 g/d.分别于第1、6和10周末自兔耳中央动脉取血,检测总同型半胱氨酸(tHcy)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量.第10周末处死动物,分离升主动脉至髂动脉分叉处.用免疫组化方法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测动脉血管中核转录因子-κB(NF-κB)的表达,光镜下观察主动脉病理形态学变化.结果第6周末和第10周末模型组血中tHcy和血脂水平及主动脉NF-κB mRNA表达均显著高于同期正常对照组(P均＜0.05);光镜下可见血管内膜呈早期AS样改变;免疫组化显示主动脉内皮细胞NF-κB mRNA表达增强.冠心康治疗组血脂和tHcy水平及主动脉NF-κB mRNA表达均显著低于模型组(P均＜0.05);主动脉病理形态学和免疫组化检测也显示病变轻于模型组.结论冠心康颗粒可降低血中tHcy浓度,减轻高同型半胱氨酸血症,抑制主动脉内皮细胞NF-κBmRNA表达,减轻内膜增生程度,具有抗AS的作用.     

高糖诱导人脐静脉内皮细胞衰老

使用正常糖浓度培养液和高糖培养液处理人脐静脉血管内皮细胞48h后,观察细胞形态,β－半乳糖苷酶染色鉴定衰老细胞,PCR—ELISA法检测端粒酶的活性,流式细胞仪检测细胞周期和细胞内活性氧水平。结果发现,与正常糖浓度处理的内皮细胞比较,不同浓度高糖培养液作用48h后的内皮细胞β－半乳糖苷酶染色阳性细胞明显增多,细胞周期多停滞于G0／G1期,S期显著减少,端粒酶活性明显下降,细胞内活性氧水平明显升高（P〈0．05或P〈0．01）。认为高糖环境可加速内皮细胞衰老进程,其作用机制可能与氧化应激有关。     

α-硫辛酸对糖基化终产物诱导血管内皮细胞凋亡的影响

目的观察α-硫辛酸对糖基化终产物诱导血管内皮细胞凋亡的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,以人血清清蛋白作为阴性对照,用含不同浓度梯度(100、200、400mg/L)糖基化终产物的培养液对内皮细胞体外培养60min及α-硫辛酸200μg/ml作用30min后再加入200mg/L糖基化终产物作用内皮细胞60min,采用ELISA法检测内皮细胞8-OHdG水平,瑞氏-吉姆萨染色及Hoechst33258染色观察内皮细胞形态学变化。结果糖基化终产物组内皮细胞8-OHdG水平较对照组明显增加(P0.05),糖基化终产物以剂量依赖方式诱导培养的内皮细胞凋亡,α-硫辛酸干预后内皮细胞8-OHdG水平显著降低,明显减轻内皮细胞凋亡的形态学改变。结论α-硫辛酸抑制糖基化终产物诱导内皮细胞凋亡,其作用机制可能是通过降低细胞氧化应激水平。     

实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠模型的研究

目的:从美国加利福尼亚电鳐的电器官中提取纯化乙酰胆碱受体(AchR),主动免疫Lewis大鼠,复制实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)动物模型.方法:参照国内外文献[3～5],利用免疫亲和层析技术提取纯化AchR,采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测蛋白纯度,观察免疫后大鼠每日表现,并于初次免疫后第4周、第8周作肌电图,实验结束时取血清,检测乙酰胆碱受体抗体AchR-ab,最后处死大鼠,电镜观察神经肌肉接头.结果:模型组大鼠在初次免疫注射后的第17天开始相继出现肌无力症状,并有3只迅速恶化,一周内死亡.模型组其它发病大鼠经肌电图证实,衰退程度均大于15%,而佐剂组与正常组大鼠均无表现.模型组AchR-ab高于佐剂组与正常组值,P＜0.05.电镜观察模型组神经肌肉接头处(NMJ)突触前后膜有改变.结论:从美国加利福尼亚电鳐的电器官中提取纯化乙酰胆碱受体,主动免疫Lewis大鼠,成功复制出EAMG模型,为中药治疗重症肌无力的研究提供了理想的动物模型.     

从中医抗衰老论治早期糖尿病肾病

糖尿病肾病作为糖尿病并发症之一,现已逐渐发展成为慢性肾病和终末期肾病的主要原因。早期糖尿病肾病病位主在脾肾,以气阴两虚兼有瘀血痰湿为主要病机,是一种衰老导致的病理状态,从脾肾功能与衰老的关系出发,以“补二天,抗衰老”为原则,在益气养阴,活血化湿治法基础上,补益脾肾,固摄涩精,以期防止早期糖尿病肾病病程发展,延长早期糖尿病患者的寿命,提高早期糖尿病患者的生活质量。     

冠脉介入治疗后再狭窄之中医药防治

经皮冠状动脉介入治疗是冠心病治疗的又一重要手段,然而介入后再狭窄问题始终困扰着医学界,成为当前医学界难题之一。张静生教授根据传统中医理论,结合多年临床经验,认为PCI术后再狭窄的形成主要涉及心、脾、肾三脏。病位在心,以气阴两虚为本,气滞、血瘀、痰浊为标。因此,治则以益气养阴为主,兼顾活血化瘀、祛痰、行气,并要注重防治结合,防在治先,顾护脾胃,调理情志。临床实践证实,此法在PCI术后再狭窄的治疗中取得了显著成效。     

单味中药及其有效成分治疗糖尿病肾病研究进展

中药可通过多途径、多靶点干预糖尿病肾病发展进程。在糖尿病肾病的整个病程中,其基本病机由初期的阴虚燥热逐渐发展为气阴两虚,后期阴损及阳,导致阴阳两虚,其病位主要在肾,病久损伤肾络,气血瘀滞,“热”、“虚”、“瘀”贯穿了整个疾病发展过程。临床用药常以补益、清热、活血化瘀药为主。这些中药已被证实通过抗氧化应激、调节自噬、抗炎等减轻患者肾脏组织损伤,进而减缓糖尿病肾病进程。     

阿司匹林抗高糖诱导的内皮细胞衰老过程中对DDAH-ADMA系统及Caveolin-1蛋白的影响

目的观察阿司匹对高糖诱导的内皮细胞衰老模型二甲基精氨酸二甲胺水解酶(DDAH)-非对称性二甲基精氨酸(ADMA)系统和Caveolin-1蛋白表达的影响,探讨阿司匹林抗高糖诱导内皮细胞衰老的机制。方法人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分别培养于正常糖浓度培养液(5.5 mmol/L)、高糖培养液(33 mmol/L)、高糖+阿司匹林(0.01~1 mmol/L)培养液以及含L-NAME(300μmol/L)培养液,48 h后采用β-半乳糖苷酶(β-gal)染色鉴定衰老细胞,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平,Western blot分析Caveolin-1蛋白表达,液质联用仪检测细胞上清液中ADMA的含量并计算DDAH的活性。结果高糖作用内皮细胞48 h后,细胞β-gal染色阳性细胞数明显增多,ROS、ADMA水平以及Caveolin-1蛋白表达升高,DDAH活性降低。0.01~1 mmol/L阿司匹林剂量依赖性地降低β-gal染色阳性细胞数、ROS和ADMA水平以及Caveolin-1蛋白表达,同时升高细胞DDAH活性(P均0.05)。L-NAME(NOS的抑制剂)能完全抑制阿司匹林的上述作用(P0.05)。结论高糖环境下阿司匹林(0.01~1mmol/L)能抑制Caveolin-1表达,改善DDAH-ADMA系统的活性而进一步发挥抗氧化损伤、抗细胞衰老的作用。     

基于网络药理学及代谢组学的逍遥补肾方治疗桥本甲状腺炎的作用机制

目的 探讨逍遥补肾方治疗桥本甲状腺炎（HT）的潜在作用机制。方法 通过网络药理学对逍遥补肾方的成分靶点及HT的相关疾病靶点取交集，构建交集靶点的蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络、药物-成分-交集靶点网络，并筛选出核心成分及靶点。随机将65只大鼠分为正常组（10只），造模组（55只）。高碘水喂养大鼠，联合多次甲状腺球蛋白注射建立实验性自身免疫性甲状腺炎（EAT）大鼠模型，造模成功后随机分为模型组、硒酵母组和逍遥补肾组。硒酵母组给予硒酵母片水溶液[25.2mg/（kg·d）]，逍遥补肾组给予逍遥补肾方溶液[11.79 mg/（kg·d）]，正常组、模型组给予等体积的蒸馏水。连续灌胃8周后收集血清，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组大鼠血清中白蛋白（ALB）、蛋白激酶B1 (AKT1)和肿瘤坏死因子-α (TNF-α)的含量。收集粪便，采用超高液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）进行代谢组学检测。结果 共获得逍遥补肾方治疗HT的6个核心成分，包括槲皮素、山奈酚、β-谷甾醇、豆甾醇、异鼠李素和木犀草素；5个核心靶点，包括ALB、AKT1、TNF、白细胞介素-6 (IL-6)...