超声微泡联合双特异性抗体对骨髓间充质干细胞干预心肌纤维化的实验研究

目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)在超声辐照微泡(MB)和双特异抗体(BiAb)的辅助下干预心肌纤维化的效果及可能机制.方法 在MB的辅助下,将雄性小鼠MSCs与BiAb输入异丙肾性心肌纤维化雌性小鼠(MSCs+BiAb+MB组).BiAb由能识别间充质干细胞的anti-CD29和能特异性结合损伤心肌的抗肌凝蛋白轻链抗体(AMLCA)制备.另设未治疗组、单纯MSCs组、单纯BiAb组、单纯MB组、MSCs+BiAb组和正常对照组.5周后处死小鼠,实时荧光定量PCR检测心肌Y染色体鉴别基因(SRY)的表达.天狼猩红染色对比心脏胶原纤维含量.免疫组织化学染色法观察心脏热休克蛋白-70(HSP-70)表达.结果 MSCs归巢数最多的是MSCs+BiAb+MB组,其次为MSCs+BiAb组,MSCs组归巢数最少.与未治疗组相比,MSCs+BiAb+MB组、MSCs+BiAb组和单纯MCSs组的心肌胶原纤维含量下降(P＜0.05),HSP-70表达下调(P＜0.05).其中,与单纯MSCs组相比,MSCs+BiAb+MB组的心肌胶原沉积量更低(P＜0.05).单纯MB组、单纯BiAb组与未治疗组的胶原沉积量、HSP-70表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MB可促进骨髓间充质干细胞的归巢,联合BiAb,可进一步增加干细胞的归巢率和修复效果.MSCs归巢后能干预心肌纤维化,其机制可能与HSP-70的介导有关.

Abstract：

Objective To explore the effects of transplantated bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) on myocardial fibrosis with the aid of ultrasound-mediated microbubbles (MB) and bispecific antibody(BiAb) combination.Methods With the aid of MB,isolated MSCs from male mice and the BiAb were transfused into female mice with isoproterenol-induced myocardial fibrosis via tail vein (MSCs + BiAb + MB group).BiAb was producted with anti-CD29 which can recognize MSCs and anti-myosin light chain antibody (AMLCA) which can specifically bind to injured myocardium.There were six groups investigated:MSC + BiAb + MB,MSC,BiAb,MB,MSC + BiAb,untreated,and control groups.Five weeks after treatment administration,the expressions of sex-determining region of Y-chromosome (SRY) in myocardium were detected by fluorescent quantitative PCR.The distribution of collagen was observed by sirius red staining.Heat shock protein-70 (HSP-70) in myocardium was detected by immunohistochemistry.Results The highest homing number of MSCs was in the MSCs + BiAb + MB group,MSCs + BiAb group ranked the second,and lowest in MSCs group.Compared to the untreated group,the MSCs + BiAb + MB,MSCs + BiAb and MSCs groups had less collagen deposition (P ＜0.05),and decreased level of HSP-70.Compared to those of the MSCs group,the collagen deposition were decreased in MSCs + BiAb + MB group (P ＜0.05).Conclusions MB and BiAb can promote the homing number of MSCs in mice.MB can further the homing rate and the repairing efficacy of MSCs.The homing MSCs can prevent the process of myocardial fibrosis.And HSP-70 was involved in the internal mechanism.     

肝靶向性聚集超声分子显像的实验研究

去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor,ASGPR)是哺乳动物肝实质细胞特有的高效内吞受体,肝细胞表面ASGPR的量与肝功能状态明显相关,在肝细胞损害时,其表面的ASGPR会相应减少[1],该指标可以直接反映肝的储备功能.实验中针对ASGPR这一受体,将靶向纳米脂质微囊液态氟烷超声造影剂团注入正常大鼠体内,观察该靶向超声造影剂对正常大鼠的肝特异性显影,为超声造影在体评价肝功能提供实验依据.     

载Fe3O4液态氟碳纳米粒增强磁共振成像的实验研究

目的 制备载Fe₃O₄液态氟碳(Fe₃O₄-PFOB)纳米粒,并探讨其增强磁共振成像效果。方法 采用薄膜-超声法制备Fe₃O₄-PFOB纳米粒,并检测其理化性质。将24只健康SD大鼠随机分为3组:Fe₃O₄-PFOB纳米粒组(静脉注射Fe₃O₄-PFOB纳米粒)、PFOB纳米粒组(静脉注射PFOB纳米粒)及生理盐水组(静脉注射生理盐水)。对各组大鼠于处理后24 h行肝脏MR扫描。扫描完成后取出大鼠肝脏组织,进行HE及普鲁士蓝染色观察。 结果 所得样品为膜壳装载Fe₃O₄、中心包裹液态氟碳的纳米粒,呈球形,粒径(272.9±19.5)nm。注射Fe₃O₄-PFOB纳米粒24 h后,大鼠肝实质信号显著降低,肝脏-肌肉信号比明显减少,与其余两组比较差异均有统计学意义。普鲁士蓝染色可见Fe₃O₄-PFOB纳米粒组大鼠肝实质内有较多蓝色颗粒分布,其余两组染色阴性。HE染色各组大鼠肝脏均未见明显的形态学改变。结论 Fe₃O₄-PFOB纳米粒能有效增强磁共振成像效果,可以用作MRI阴性对比剂。     

比较脂质微泡与聚合物超声造影剂的微循环流变学

目的 探讨脂质微泡与高分子聚合物超声造影剂在大鼠肠系膜微循环中的流变学特征。方法 对10只大鼠经股静脉分别注射DiI标记的脂质微泡和高分子聚合物超声造影剂,通过倒置荧光显微镜观察两种不同造影剂在大鼠肠系膜微循环中的运动情况;比较注射前后小动脉、小静脉及毛细血管内径的变化,测定红细胞与两种造影剂在微循环内的流速。结果 注射后两种造影剂在大鼠肠系膜微循环内均可随血流移动,仅见少量脂质微泡短暂滞留。注射造影剂前后小动脉、小静脉及毛细血管内径无明显改变(P>0.05);两种造影剂在微循环内的流速与红细胞相似,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 脂质微泡和高分子聚合物超声造影剂具有与红细胞相似的微循环流变学特征,均可作为红细胞示踪剂。     

高压氧联合神经干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤

背景：单纯神经干细胞移植已应用于对受损脊髓组织的修复。目的：以神经干细胞移植同时应用高压氧治疗大鼠脊髓损伤,观察联合作用对脊髓损伤大鼠运动功能恢复的影响。方法：雌性SD大鼠60只,以半切法制成胸段脊髓半横断大鼠模型。随机分成单纯损伤组、神经干细胞移植组及高压氧治疗组,每组20只。伤后第4周取材行病理切片苏木精-伊红染色及BrdU免疫组织化学染色,第8周取材行辣根过氧化物酶示踪,透射电镜观察轴突的再生情况,通过体感诱发电位观察神经电生理恢复情况。造模后1,2,4,6,8周进行BBB评分和斜板实验等运动功能检测。结果与结论：观察伤后4周病理切片,单纯损伤组未见神经轴索通过,神经干细胞移植组可见少量神经轴索样结构,高压氧治疗组可见较多神经轴索样结构。BrdU的阳性细胞数及辣根过氧化物酶阳性神经纤维数,高压氧治疗组最多,神经干细胞移植组次之,单纯损伤组最少,且各组之间差异有显著性意义（P〈0.05）。透射电镜下神经干细胞移植组、高压氧治疗组正中横断面可见新生的无髓及有髓神经纤维。高压氧治疗组大鼠体感诱发电位的潜伏期短于神经干细胞移植组,波幅高于神经干细胞移植组（P〈0.05）,明显优于单纯损伤组（P〈0.01）。伤后4周神经干细胞移植组、高压氧治疗组大鼠后肢运动功能均有较明显恢复,高压氧治疗组较神经干细胞移植组恢复快（P〈0.05）;单纯损伤组亦有所恢复,但程度较轻。提示神经干细胞移植对于脊髓损伤大鼠后肢功能的恢复有促进作用,联合应用高压氧有协同效果。     

声振表面活性剂微泡制备中温度及其他因素间的相互影响

目的 优化表面活性剂微泡的制备工艺,探讨溶液温度、声振功率及声振时间对表面活性剂微泡制备的相互影响.方法 以一定质量比的山梨糖醇酐单硬脂酸酯（Span）和聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯（Tween）溶解于磷酸盐缓冲液.将溶液分为控温组与非控温组,以不同声振功率和声振时间对两组溶液进行声振处理.于光镜下观察两组溶液所产微泡的大小和形态,测量其浓度.选用优化条件下生产的微泡对新西兰大白兔进行耳缘静脉注射,剂量为0.1 ml/kg,观察肝实质增强程度及持续时间.结果 表面活性剂微泡的最佳制备条件为：控温条件下,声振功率800 W,声振时间90 s.注射造影剂后兔肝实质回声强度明显增强,120 s达到高峰,增强持续时间约10 min.结论 通过控制温度,使用更高声振功率、更长声振时间,可以制备更具良好显影效果的微泡.     

超声诊断学双语教学的思考

在超声诊断学双语教学过程中,需明确教学目标,加强教学师资队伍建设,以学生为主体,选用合适的双语教材,采用多样化的教学方法,建立完善的双语教学质量评价体系,才能提高双语教学质量,培养具有较强国际竞争力的高素质超声医学人才.     

原发性腹膜癌临床及预后分析

目的探讨原发性乳腺淋巴瘤（PPC）的临床病理特征、治疗经过及预后相关因素。方法分析11例PPC患者的不同病因的原发性腹膜癌患者生存时间进行比较,分析其临床发病特点、治疗经过及疗效、预后随访结果。结果 11例患者以腹胀、腹水、纳差为主要首发症状,均为女性,中位年龄56岁（46-62岁）,病理为不同分化程度的浆液性乳头状囊腺癌9例,粘液性乳头状腺癌2例。8例施行肿瘤细胞减灭术,3例仅行腹腔镜探查及活检。术中均给予卡铂200mg腹腔保留,术后给予铂类为主的方案化疗至少6周期。1例放弃治疗失访。随访〈2年4例,均无瘤生存。大于2年6例,死亡1例,其2年生存率60%,3年生存率50%。结论 PPC原发于腹膜间皮,是一种起病隐匿,发病率较低,临床症状和体征无特异性,误诊率高的疾病,应重视其术前诊断及鉴别诊断,以减少误诊率。采用肿瘤细胞减灭术和以铂类为主方案的化疗可显著改善预后,提高患者的生存期。化疗方案是预后的影响因素。     

腘绳肌腱移植皮质骨挤压钉固定重建前交叉韧带

目的探讨腘绳肌腱移植同种异体皮质骨挤压钉固定腘绳肌腱重建前交叉韧带的临床效果。方法 2010年1-12月采用Endobutton＋骨挤压钉固定股骨端,门形钉或Rigidfix固定胫骨端重建前交叉韧带（ACL）17例,男14例,女3例,平均年龄28.6（15-49）岁,术前、术后使用Rolimeter测量胫骨前移度并采用Lysholm评分系统评定膝关节功能,术后X-Ray及MRI检查。结果术后随访6.9（3-13）个月。所有患者均无感染、神经血管损伤等并发症发生,X-Ray显示骨挤压钉术后3月后逐渐爬行替代。患者术前双侧膝关节、患侧膝关节术前与术后比较胫骨前移度差异有统计学意义（P〈0.01）;而患侧膝关节术后与健侧膝关节比较胫骨前移度差异无统计学意义（P〉0.05）;患侧膝关节术后1个月、3个月比较,胫骨前移度差异无统计学意义（P〉0.05）。Lysholm评分：术前（31.1±6.3）分,术后（85.2±6.9）分（P〈0.001）,优良率88.2%。结论同种异体皮质骨挤压钉可满足ACL重建初始固定要求,组织相容性好。     

关节镜清理联合静脉抗生素治疗膝关节革兰阳性菌感染的疗效观察

目的探究关节镜清理、关节腔灌洗联合静脉应用糖肽类抗菌药物治疗革兰阳性菌所致膝关节感染的疗效。方法 2008年2月-2010年7月应用关节镜清理、关节腔灌洗联合静脉糖肽类抗菌药物治疗革兰阳性菌所致膝关节感染患者21例,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）感染5例,耐甲氧西林表皮葡萄球菌（MRSE）感染6例,肠球菌感染4例,凝固酶阴性葡萄球菌（CONS）感染6例,药敏试验显示培养菌群均对糖肽类抗菌药物万古霉素及替考拉宁敏感,观察药物治疗过程中不良反应情况,评价临床疗效。结果治疗期间未发现药物过敏反应和其他与药物有关的不良反应记录,治疗有效率为100%。本组患者均获得随访,时间4-29个月,平均17.6个月,随访期间患者均无复发感染症状。结论关节镜清理、关节腔灌洗联合静脉应用糖肽类抗菌药物是治疗膝关节革兰阳性菌感染的一种有效方法。