缺血后处理改善微循环、减轻骨骼肌缺血再灌注损伤的实验研究

目的:观察缺血后处理(I-postC)对大鼠后肢骨骼肌微循环和缺血再灌注(I/R)损伤的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠24只,随机分为3个实验组,即I/R组、I-postC组和预处理(IPC)组(n均=8),左后肢作为自身对照。无创动脉夹夹闭右侧股动脉4h,松夹再灌注2h建立大鼠后肢I/R模型。于再灌注结束时分别检测大鼠胫前肌血氧饱和度(StO2)、微循环、血流动力学变化以及骨骼肌湿、干重比值(W/D)和骨骼肌组织丙二醛(MDA)含量。结果:(1)再灌注I-postC减轻I/R对心功能的抑制,I-postC组+dp/dtmax和-dp/dtmax较I/R组分别增高18.5%和21.3%(P<0.05),I-postC组W/D较I/R组降低4.9%(P<0.05);I-postC组MDA较I/R组降低40.9%(P<0.05)。(2)再灌注I-postC组实验侧细静脉血流速度较I/R组增加8.3%(P<0.05),细动、静脉收缩减轻(细动、静脉内径较I/R组分别增加14.8%和29.1%,P<0.05),与IPC的保护效果接近(P>0.05)。结论:I-postC显著减轻骨骼肌I/R损伤,其保护机制与改善微循环有关。     

钙调神经磷酸酶在大鼠不同组织中的分布及活性

目的:观察钙调神经磷酸酶(CaN)在大鼠不同器官组织中的活性和蛋白分布。方法:取正常大鼠不同器官组织,应用Westernblot及免疫组织化学方法测定CaN催化亚单位α亚型(CnAα)在各组织中的蛋白含量及分布,并用[³²P]标记的底物肽测定各组织的CaN活性。结果:①Westernblot结果显示,CnAα在大鼠脑组织中有丰富表达,心脏、骨骼肌和肺中亦有表达,但肾脏及主动脉未检测出有CnAα表达。②免疫组织化学显示,大鼠脑组织、心肌细胞胞浆内、肺内巨噬细胞及细支气管周围的结缔组织、主动脉外膜、肾小血管周围结缔组织及肾远曲小管及集合管的外壁中存在免疫反应阳性产物。③CaN活性在脑组织最高,其次为骨骼肌、心肌和肺组织,主动脉和肾脏最低。结论:钙调神经磷酸酶在体内具有广泛分布,可能参与多种器官组织的功能调节。     

肾上腺髓质素2对大鼠脑微血管内皮细胞增殖的影响

目的：研究肾上腺髓质素2（AM2）对大鼠脑微血管内皮细胞增殖的影响。 方法： 分离并培养SD大鼠脑微血管内皮细胞，经Ⅷ因子相关抗原的抗体鉴定和常规处理后，随机分为对照、AM2（10^-7 mol/L、10^-8 mol/L和10-9 mol/L）、ADM、ADM+AM2、10%胎牛血清和10％胎牛血清＋AM2 10-7 mol/L等8组，以［3H］-TdR掺入法测定MEC增殖反应。 结果： 10^-7-10^-9 mol/L各浓度AM2、ADM以及AM2和ADM合用对于静止状态的脑微血管内皮细胞［3H］-TdR掺入与对照组比较均无明显差异（均P>0.05）。10%胎牛血清刺激组脑微血管内皮细胞［3H］-TdR掺入比对照组高87.5%（P<0.05），10^-7mol/L AM2抑制胎牛血清诱导的脑微血管内皮细胞［3H］-TdR掺入增加（P<0.05）。 结论： AM2抑制血清诱导的脑微血管内皮细胞增殖。     

卡巴胆碱对烧伤大鼠肠系膜微循环的影响

目的探讨卡巴胆碱对烧伤大鼠肠系膜微循环的影响。方法采用大鼠烧伤模型,分为对照组、烧伤组和卡巴胆碱治疗组。用活体微循环观测技术观察卡巴胆碱对烧伤大鼠肠系膜微血管管径、血流速度的作用。用激光多普勒血流量仪测肠壁血流量的变化。结果(1)烧伤组大鼠颈动脉平均压和细静脉管径较对照组分别下降19.30%(P<0.01)和9.97%(P<0.05),给予卡巴胆碱治疗后,颈动脉平均压和细静脉管径较烧伤组分别升高17.88%(P<0.05)和29.42%(P<0.001)。(2)烧伤组大鼠肠系膜细静脉血流速度和肠壁血液灌注量较对照组分别下降68.18%和70.66%(P<0.001),卡巴胆碱可明显增加肠系膜细静脉血流速度和肠壁血液灌注量,分别是烧伤组的2.41倍和2.45倍(P<0.001)。(3)烧伤后大鼠毛细血管网开放数较对照组下降55.21%(P<0.001),给予卡巴胆碱治疗后,毛细血管网开放数是烧伤组的1.95倍(P<0.01)。结论卡巴胆碱能使烧伤大鼠肠系膜细静脉舒张,加快肠系膜微血管血流速度,增加肠道的血液灌注量,具有改善肠道微循环的功能。     

尘肺病并发症的观察与护理

尘肺病是由于人体长期大量吸入生产性粉尘而引起的以肺组织纤维化为主的全身疾病[1] 。尘肺病本身不仅影响人体的肺功能 ,而且它的合并症 (肺内感染及肺结核 )造成的多脏器损害 ,直接危害患者的生命[2 ] 。在临床上对尘肺病并发症的观察与有效护理对延长患者生命显得尤为重要。1　临床资料1990～ 2 0 0 0年 ,我院对 35 0例尘肺病住院患者进行统计 ,男 2 70例 ,女 80例 ,年龄为 5 0～ 80岁 ,平均年龄 6 2岁 ;尘肺合并肺内感染 2 80例 (占 80 % ) ,合并肺结核 70例 (占2 0 % )。1.1　慢性支气管炎　最初尘肺患者是以慢支的症状来医院就诊的 ,…     

强化孕产妇系统管理的做法与体会

１９９４年以来,建湖县从强化孕产妇系统工作入手,不断提高管理质量,孕产妇和围产儿的死亡率逐年下降,到１９９７年底,分别由１９９４年的５２,１５／１０万、２１．８６％。降到３４．５６／１０万、１７．６５‰。１９９７年综合考核名列盐城市首位。１孕产妇系统管理的做法１．１健全制度,统一规范根据盐城市所布置,全县均按三、二、一系统管理办法实施。即三统一（统一围产保健记录册、统一登记和统计、统一妇保台帐）,二手册（围产期保健制度手册、高危孕妇管理手册）,一考核（每季一次对各乡镇妇保工作进行全面考核）,使妇…     

大蒜素对乳鼠心肌细胞延迟预处理保护作用及其信号转导机制的研究

目的:研究大蒜素预处理对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的延迟保护作用及其部分信号转导机制.方法:采用细胞存活率、乳酸脱氢酶活性、丙二醛含量作为心肌细胞受损指标,观察终浓度为20μg/ml的大蒜素预处理24h后对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用及蛋白激酶抑制剂H-7、丝裂素激活蛋白激酶抑制剂PD 98059对大蒜素预处理作用的影响;并通过免疫印迹技术(Western blot analysis)测定大蒜素预处理24h后,nPKC-ε、热休克蛋白70(HSP70)和核因子-кB(NFкB)的表达情况.结果:大蒜素预处理能显著提高缺氧复氧损伤心肌细胞存活率,减少LDH漏出和MDA生成,H-7、PD 98059可完全取消这种心肌保护作用.大蒜素预处理可明显增加nPKC-ε、HSP70的表达,H-7能抑制此作用,而PD98059仅对HSP70表达有抑制,NF-кB在各组间均无明显表达.结论:大蒜素能够模拟缺血预处理延迟保护作用,其机制涉及PKC及MAPKs信号途径,可能通过活化nPKC-ε,使下游靶蛋白MAPKs磷酸化而诱导HSP70的高度表达产生延迟预处理心肌保护作用.     

条件培养液预处理对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的影响及其机理探讨

目的观察短暂缺氧条件培养液对乳鼠心肌细胞缺氧复氧损伤的影响，并探讨其作用机理。方法采用乳鼠心肌细胞缺氧／复氧（A／R）损伤模型。用短暂缺氧条件培养液进行预处理。结果条件培养液预处理能够提高A／R损伤后心肌细胞存活率（7638±4．12vsA／R组56．87±3．17％，P＜0．01），减少细胞MDA产生（0．91±0．05VSA／R组1．61±0．06nmol／mg·pr，P＜0．01），减少LDH漏出（35．12±845vsA／R组56．47±9．15U／L，P＜0．01）及细胞内蛋白漏出（0．32±0．04vsA／R组0．43±0．07，P＜0．01）。PKC抑制剂（H_7）完全阻断条件培养液预处理的上述保护作用。结论条件培养液对乳鼠心肌细胞的缺氧复氧损伤具有保护作用，其机理是通过PKC介导的。     

肌浆网钙ATP酶基因转导对慢性心力衰竭犬心肌蛋白质组影响的初步研究

目的 分析心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(sarcoplasmic reticulum Ca2+ ATPase 2a,SERCA2a)基因转导对慢性心力衰竭(HF)犬心肌蛋白质组的影响,探讨SERCA2a基因转导改善心功能的机制.方法 快速右心室起搏建立HF犬模型并随机分为HF组、HF+绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent pmtein,EGFP)组、HF+SERCA2a组.后两组分别向心肌内注射携带EGFP和SERCA2a基因的rAAV载体.于基因转导30 d时停止起搏后进行超声心动图和血流动力学检查并制备心室肌双向电泳蛋白样品和心肌双向电泳图谱,图像分析软件分析蛋白表达差异点,MALDI-TOF-MS数据库搜索鉴定蛋白质.结果 基因转导30 d时,HF+SERCA2a组犬的症状、超声心动图和血流动力学指标与HF+EGFP组相比有显著好转(P＜0.05);与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05).挑选SERCA2a基因转导后表达量发生明显改变的10个蛋白点进行分析,经质谱鉴定分别为心肌收缩相关蛋白、线粒体能量代谢酶类和应激相关蛋白.结论 以rAAV为载体介导SERCA2a基因转导能够改善HF犬心脏的收缩和舒张功能,其可能的机制是恢复了心肌收缩相关蛋白正常表型或正常表达量,增加了心肌能量的产生,改变了应激相关蛋白的表达.     

钙调神经磷酸酶在醛固酮诱导心肌肥大中的作用

目的观察钙调神经磷酸酶(CaN)在醛固酮(Ald)诱导的心肌肥大信号转导机制中的作用及其调节.方法24只Wistar大鼠随机分为2组实验组和对照组.实验组给予醛固酮腹腔注射后,再随机分为3组,分别给予环孢霉素A、螺内酯、及生理盐水干预,对照组仅腹腔注射生理盐水.测定大鼠血浆中血管活性因子Ald、AngⅡ、ET-1与NO-3的浓度,心重/体重,心肌组织中的CaN活性;心肌组织中肥大相关基因心房利钠因子(ANF)及CaNAβ mRNA的水平,同时用免疫组化方法观察心肌胞浆中CaN的表达.结果醛固酮腹腔注射后血浆中的醛固酮水平明显增高,醛固酮腹腔注射4周可使心肌肥大相关基因ANF mRNA水平明显升高,心肌中CaN活性明显升高,心肌细胞浆中的CaN表达上调;环孢霉素A及螺内酯干预4周,可明显抑制心肌CaN活性,并下调ANF(P＜0.05)的表达.结论CaN参与了外源性醛固酮诱导的心肌肥大的信号通路,醛固酮通过活化CaN,使肥大相关基因表达增加产生心肌肥大.螺内酯通过拮抗醛固酮与受体结合抑制心肌肥大.