大容量全肺灌洗尘肺患者远期生存质量的评价

目的 评价大容量全肺灌洗(WLL)治疗的尘肺病患者的远期生存质量.方法 采用经过效度和信度检验合格的生存质量调查表,对回顾性队列研究中入列的3个矿区现存活的253名尘肺患者(肺灌洗组54例,非灌洗组199例)进行生存质量横断面调查.比较肺灌洗组和非肺灌洗组患者的生存质量评分.结果 肺灌洗组的生存质量综合评分为32.44±9.21,非灌洗组为38.33±10.48,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).各维度评价中,肺灌洗组在躯体感觉、生理功能、社会活动维度的生存质量评分分别为7.78±2.97,6.61±2.46和6.02±1.86,非灌洗组生存质量评分分别为9.07±2.95,8.20±2.89和7.64+2.57,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01);在心理功能和其他维度上,肺灌洗组与非灌洗组生存质量评分比较,差异无统计学意义(P>0.05).按年龄、接尘年限、尘肺期别、接触粉尘性质分层,肺灌洗组生存质量评分低于非灌洗组,两组的差异有统计学意义(P<0.05).结论 进行WLL治疗后的尘肺患者的远期生存质量好于未进行WLL治疗的尘肺患者.     

尘肺患者大容量肺灌洗液中含尘巨噬细胞数量的观察

目的 探讨尘肺患者肺泡灌洗液中含尘巨噬细胞数量及其影响因素.方法 收集大容量肺灌洗的116例尘肺患者及0+接尘工人的肺泡灌洗液,常规法进行细胞计数.结果 肺泡灌洗液中细胞总数为3.2×108～1.23×1010个;不同工种、尘肺期别、接尘年限、脱尘年限,接尘性质等组间含尘巨噬细胞数比较,差异均无统计学意义(P0.05).结论 未发现肺泡灌洗液中细胞总数与尘肺的期别、接尘年限、脱尘年限、粉尘性质等因素有关,大容量肺泡灌洗能清除肺内大量吞尘巨噬细胞.     

主要组织相容性复合体Ⅱ类基因在多器官功能障碍综合征中的表达及意义

目的探讨主要组织相容性复合体(MHC)Ⅱ类基因在多器官功能障碍综合征(MODS)中的表达及意义。方法建立二次打击猪MODS模型。18只雄性家猪随机分为实验组(M组)和正常对照组(C组)每组9只。M组给予失血性休克、再灌注损伤、内毒素血症复合因素；C组仅进行麻醉和动静脉插管。观察7 d后处死动物,取脾组织用Trizol法提取总RNA。设计SLA- DQA(猪MHCⅡ类基因)引物序列,逆转录构建cDNA,用实时荧光定量PCR(Real Time FQ-PCR)检测SLA-DQA mRNA的表达量。UVP计算机图像分析系统绘出标准曲线。结果M组动物死亡率为7/9,有8例发生MODS,发生率为8/9。C组SLA-DQA mRNA拷贝数为(1．376±1．006)×10~3．M组拷贝数为(1．376±1．006)×10~3,两组差异有统计学意义(P＜0．01)。结论MODS模型复制满意。MHCⅡ类基因在MODS中表达下降,可能与逆转录因子(CIITA)的调控和TNF-α、IL-10等多种细胞因子的释放有关。     

RNA干扰抑制yrdC蛋白表达对人胃癌细胞株BGC-823体外增殖能力的影响

目的:构建针对人yrdC基因siRNA的重组腺病毒Ad-shyrdC并观察其转染人胃癌细胞株BGC-823后对细胞体外增殖能力的影响。方法:筛选高效抑制yrdC蛋白表达的RNAi位点,并构建表达siRNA的重组腺病毒,转染人胃癌细胞株BGC-823后以Western印迹法鉴定细胞yrdC蛋白表达的变化;同时通过MTT法、流式细胞术分别测定BGC-823细胞增殖活性和增殖指数的变化。结果:成功构建了抑制人yrdC基因siRNA的重组腺病毒Ad-shyrdC;转染BGC-823细胞后可明显抑制yrdC蛋白表达,并使所测定的细胞MTT值和细胞增殖指数提示BGC-823细胞增殖活性下降(P<0.05)。结论:腺病毒介导的RNAi能有效地抑制BGC-823细胞中yrdC蛋白表达,并降低其增殖活性。     

由cAMP激活的鸟苷酸交换蛋白（Epac）调控内皮细胞表面膜联蛋白A2的表达

目的 本研究旨在探讨内皮细胞内Epac1是否参与调控细胞表面ANXA2的表达。方法 本研究细胞实验以人静脉内皮细胞（HUVECs）为细胞模型,采用原子动力学检测方法,结合免疫荧光,分别从原子及蛋白水平验证Epac1是否参与细胞表面ANXA2表达的调控作用。分别提取15只Epac1基因敲除小鼠和15只C57BL6野生型小鼠血浆,检测每组样品ANXA2的表达水平。结果 （1）免疫荧光测得处理组（ESI09）相对荧光强度为17.59 ± 0.69,处理组（ESI09）相对荧光强度为6.32 ± 0.32,两组间数据结果有差异且有统计学意义（P<0.01）;原子动力显微镜法测得处理组（ESI09）测得力值为35113.07 ± 9866.65 pN,对照组（DMSO）测得力值为106277.70 ± 14233.77 pN,两组间数据结果有差异且有统计学意义（P<0.01）;由以上数据可得药物性抑制内皮细胞Epac的功能使其表面ANXA2表达量下调;（2）蛋白印迹法及酶联免疫吸附法测得处理组（ESI09）和对照组（DMSO）内皮细胞分泌ANXA2有差异,药物性抑制内皮细胞Epac1功能使内皮细胞胞外分泌ANXA2能力下降低;（3）酶联免疫吸附法测得Epac1基因敲除小鼠组血浆ANXA2平均含量为138.81 ± 38.93 ng/ml,显著低于野生型小鼠组血浆ANXA2平均含量281.46 ± 49.66 ng/ml（p<0.05）。结论 Epac1参与调控内皮细胞表面ANXA2的表达。     

重组MMP-2对人肾系膜细胞Fkn基因表达和分泌的影响

目的观察重组基质金属蛋白酶-2(MMP-2)对人肾系膜细胞(HRMC)趋化因子Fkn mRNA表达的影响。方法用重组MMP-2干预体外培养的HRMC,逆转录PCR检测Fkn mRNA表达,ELISA法检测HRMC上清液中Fkn蛋白含量。结果 HRMC的Fkn mRNA表达水平随MMP-2浓度增加而增加(P<0.05),上清液中Fkn蛋白含量随MMP-2浓度增加而降低(P<0.05)。结论重组MMP-2可以增加Fkn mRNA的表达,而降低上清液中Fkn蛋白含量。     

hvrdC基因表达水平对胃癌细胞SGC-7901增殖影响的实验研究

目的 观察胃癌SGC-7901细胞株中hyrdC基因的不同表达水平对细胞增殖的影响.方法 分别将已构建的携带hyrdC基因的Ad-hyrdC重组腺病毒和靶向抑制hyrdC基因表达的AdshyrdC重组腺病毒,转染人胃癌SGC-7901细胞株,同时设空病毒Ad-null组和正常对照组,利用绘制生长曲线法和MTT法观察各组间胃癌细胞增殖的差异;将各组胃癌细胞接种裸鼠皮下构建裸鼠荷瘤模型,比较各组胃癌细胞瘤体生长率的差异.结果 Ad-hyrdC组胃癌SCC-7901细胞增殖显著快于Ad-shyrdC组、Ad-null组和正常对照组,48 h后细胞数与Ad-shyrdC组、Ad-null组和正常对照组比较有统计学差异(P<0.05):Ad-shyrdC组胃癌SCC-7901细胞的光吸收值明显低于Ad-hyrdC组、Ad-null组和正常对照组(P<0.05):Ad-shyrdC组瘤体生长率较Ad-hyrdC组、Ad-null组以及正常对照组明显减慢(P<0.05),Ad-hyrdC组瘤体生长率较Ad-shyrdC组、Ad-null组以及正常对照组明显加快(P<0.05).结论 hyrdC基因具有促进胃癌细胞生长的功能,而靶向沉默hyrdC基因表达可抑制胃癌细胞的生长,hyrdC基因有望成为胃癌基因治疗领域的新靶点.     

CD133在人肺腺癌组织中的表达及其临床关系

目的研究CD133在肺腺癌中的表达,探讨CD133表达与患者临床信息的相关性。方法取83例肺腺癌组织石蜡标本,用免疫组化法检测CD133的表达,结合患者年龄、性别、吸烟指数等信息进行统计分析,探讨CD133的表达与患者相关资料的关系。结果 83例中CD133阳性率为81.9%,同时具有表达的不均一性。结论 CD133在肺腺癌中广泛表达,表达强度具有不均一性,其表达与患者淋巴转移及病理分化程度相关,与年龄、性别、吸烟指数未见相关性。     

CD133阳性人肺腺癌细胞的干细胞特性研究

目的流式分选得到CD133(+)人肺腺癌细胞并评估其干细胞特性。方法取10例新鲜人肺腺癌组织制成单细胞悬液,收获CD133(+)和CD133(-)肺腺癌细胞,通过实验观察CD133(+)和CD133(-)肺腺癌细胞在侵袭性、成瘤性及化疗耐药性等方面的差异。结果 10例中有8例发现CD133表达,其阳性表达率最高为13.12%,CD133(+)和CD133(-)细胞在侵袭性、致瘤能力及对化疗药物的耐受能力上有明显差异。结论 CD133(+)较CD133(-)人肺腺癌细胞具有更强的侵袭性、致瘤能力及耐化疗能力,可能富集肺腺癌干细胞。