携带血管生成素的骨髓基质干细胞移植治疗缺血性心脏病

目的 评价转染血管生成素基因的自体骨髓间充质干细胞移植治疗慢性缺血性心脏病的疗效.方法 腺病毒介导的血管生成素基因转染自体骨髓基质干细胞并移植于置入Ameriod缩窄环的猪慢性心肌缺血模型上,通过冠状动脉造影、心脏彩超、核磁心肌灌注成像、病理学观察等评价治疗效果.结果 置环后的动物均为有效的动物模型.转染血管生成索的骨髓基质干细胞移植后侧支血管增生明显,血管计数增加,Rentrop分数、左室射血分数改善,梗死区缩小而移植细胞的成活率高.结论 携带血管生成素基因的自体骨髓基质干细胞移植治疗缺血性心脏病可明显改善心功能,使局部血液循环改善明显.     

有毒化学品健康危险评价方法

近年来,由于化学品的日益增多和广泛使用,给环境带来了很大的压力,对人体健康产生了相当严重的影响。工业化学品的环境危险引起了国内外环境管理和科研部门的高度重视。在８０年代初,研究化学品的应用所引起的环境危险过程中,逐渐形成了一门新的多学科的方法学—环境...     

负染色腺病毒电镜照片的细节特征提取

目的：利用计算机对负染色腺病毒电镜照片的图像进行分析处理,按照特定的目标,从图像中提取某些特定的信息.方法：对有代表性结构的负染色腺病毒电镜照片,进行C语言编程和PHOTOSHOP软件处理.结果：经综合处理后的负染色腺病毒电镜照片,测量所得的数据,基本上处于病毒的理想模型尺寸的范围内.结论：若用此处理方法处理未知病毒负染色电镜照片,将在未知病毒的辨析和结构形态解释上,提供更多、更详细的未知条件.     

人类肿瘤相关蛋白hyrdC的原核表达、抗体制备及其在胃癌中的初步检测

目的:制备原核表达的hyrdC纯化蛋白及相应单克隆抗体,并以该抗体初步检测胃癌中hyrdC蛋白的表达.方法:用RT-PCR方法获取人hyrdC基因序列,插入原核表达载体pET32a构建重组质粒,纯化得到TRX-hyrdC融合蛋白,将其作为抗原免疫BALB/c小鼠,按常规方法制备抗hyrdC单克隆抗体,以ELISA、Western印迹法筛选及鉴定;采用免疫组织化学法(SP法)比较胃癌组织及瘤旁正常组织中hyrdC抗体水平的差异.结果:测序结果显示克隆的hyrdC ORF与GenBank中登录的序列一致.所获TRX-hyrdC融合蛋白相对分子质量与理论计算值相符,获得2株分泌抗hyrdC单克隆抗体的细胞株;Western印迹法显示该抗体能特异性地结合人hyrdC蛋白;SP法测定显示,hyrdC蛋白在胃癌组织中表达明显高于正常胃组织(P＜0.001).结论:成功制备了抗hyrdC单克隆抗体;SP法测定胃癌组织与瘤旁正常组织中hyrdC抗体水平有显著差异.     

小剂量瑞芬太尼在肺灌洗拔管过程中的临床应用

目的观察手术结束苏醒期持续泵注小剂量瑞芬太尼对大容量肺灌洗手术全身麻醉拔管时应激反应的影响。方法选择在某院2017年5月至6月需行择期大容量肺灌洗术患者共30例,按随机数表法分为两组,A组:全麻苏醒期间维持瑞芬太尼小剂量输注;B组:苏醒拔管期间停用所有麻醉药物,记录AB两组患者在手术开始前、拔管时和拔管后5 min的循环血流动力学变化,记录患者拔管时间、苏醒时间,并观察记录苏醒拔管质量评分。结果 (1)A组麻醉苏醒期发生不耐管及躁动程度明显较B组低,A组躁动评分在拔管以后5 min、15 min均显著低于B组,R amsay评分A组拔管之后5、15 min明显高于B组。(2)两组比较,A组拔管时及拔管后5 min的MAP显著降低,HR显著减慢;与手术开始前比较,B组拔管时及拔管之后5 min的MAP显著升高,HR明显增快,而A组拔管以后5 min的MAP、HR无显著改变。结论大容量肺灌洗手术结束后苏醒拔管期间继续给予小剂量瑞芬太尼持续泵注可以减少尘肺病患者不耐管引起的躁动,改善苏醒拔管质量。     

玉葵清对糖基化终产物诱导的人肾系膜细胞趋化因子表达的影响

目的 探讨玉葵清对糖基化终产物（AGEs）诱导的人肾系膜细胞（HRMC）趋化因子表达及其趋化效应的影响. 方法 糖基化牛血清白蛋白（AGE-BSA）和玉葵清干预HRMC. 结果 AGE-BSA组较BSA组HRMC趋化单核细胞数增加,单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、Fractalkine（FKN）中和抗体组HRMC趋化单核细胞数较AGE-BSA组减少;玉葵清组MCP-1、Fractalkine基因表达、上清中的蛋白含量和趋化单核细胞较BSA组降低（P＜0.05）. 结论 玉葵清减弱AGE-BSA诱导的HRMC趋化因子表达及其趋化效应,可能改善DN肾脏炎症反应.     

心电导联线检测盒的研制

根据维修需要研制了一种心电导联线检测盒，能使心电导联线的每根线在电路中分别形成回路，通过LED指示其通断。实践证明这种检测盒简单实用，可显著提高心电导联线的维修效率。     

表达大鼠caspase-3 siRNA腺病毒的构建及其对神经元凋亡的影响

目的 构建表达大鼠caspase-3 siRNA腺病毒,体外观察其抑制内毒素诱导神经元凋亡的效果.方法 合成正、反义寡核苷酸并克隆入pShuttleH1载体,与含caspase-3及绿色荧光增强蛋白序列的质粒pEGFPC1-Cas3共转染293细胞,流式细胞仪分析荧光强度;pShuttleH1-siCas3线性化后转化到含pAdEasy-1的BJ5183感受态细菌中获取重组质粒,脂质体转染293细胞获取重组腺病毒Ad-siCas3;TCIDs.法测定病毒滴度;感染海马神经元,观察内毒素诱导神经元caspase-3 mRNA的表达及凋亡情况.结果 目的基因序列正确,pShuttleH1-siCas3可明显减弱pEGFPC1-Cas3绿色荧光,Ad-siCas3滴度为1.06×1010 pfu/ml.转染病毒的海马神经元内毒素诱导的凋亡效应及caspase-3 RNA的表达明显减弱.结论 成功地构建了表达大鼠caspase-3 siRNA腺病毒,具有良好的抑制神经元凋亡作用.     

沉默血管生成素-2表达对人肺腺癌细胞生物学特性的影响

背景与目的促血管生成素-2(Ang-2)是一类调节血管生成的重要细胞因子,与肿瘤的发生发展有密切的联系.本研究通过腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)介导的RNA干扰(RNAinterference,RNAi)抑制肺腺癌细胞A549Ang-2的表达,观察其对癌细胞生物学特性的影响.方法构建H1启动子驱动的表达针对Ang-2的小干扰RNA(siRNA)重组腺相关病毒(AAV-Ang-2shRNA),转染A549细胞,同时以正常A549细胞及其转染空病毒(AAV-Null)的A549细胞作为对照,观察RNAi沉默Ang-2表达在体外及体内对A549细胞生长、致瘤、增殖、凋亡及肿瘤微血管密度的影响.结果体外实验结果表明重组腺相关病毒转染A549细胞48 h后Ang-2蛋白表达比对照组明显降低(P＜0.001);细胞生长明显减慢(P＜0.001).RNA干扰后A549细胞细胞周期分析结果提示A549细胞对照组、AAV-Null对照组和AAV-Ang-2thRNA验组的增殖指数(proliferation index,PI)分别为0.51±0.43、0.48±0.29和0.26±0.31.AAV-Ang-2shRNA验组与对照组比较,PI明显减少(P=0.001).体内实验结果表明,AAV-Ang-2shRNA实验组在胸腺缺陷小鼠成瘤体积、瘤质量均明显低于两对照组(P＜0.01).各组微血管密度分析结果分别为46.4+13.1、44.2+13.6和34.9±12.8;AAV-Ang-2shRNA实验组肿瘤组织内新生血管数目明显低于对照组(P＜0.001).各组凋亡指数(apoptosisindex,AI)分别为(5.98±3.11)％、(7.51±4.42)％及(17.06±7.43)％.AAV-Ang-2shRNA组比PBS组、AAV-Null组凋亡百分率明显增高(P=0.005,P=0.007).各组细胞增殖核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)阳性表达率分别为(92.75+9.7)％、(85.8±11.8)％、(69.8+16.5)％;AAV-Ang-2shRNA组PCNA指数低于两对照组(P=0.014,P=0.021).结论腺相关病毒介导的siRNA表达能明显抑制A549细胞中Ang-2的表达,减慢肿瘤细胞的增殖,促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤生长.     

人肺表面活性物质相关蛋白A的提纯与生物活性分析

目的:提取煤工尘肺患者双肺大容量灌洗回收液中肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A).方法:利用离心、透析,制备亲和层析柱提纯SP-A,利用ELISA法鉴定,高效液相色谱法测定含量和纯度,膜天平测定活性.结果:所提纯SP-A含量平均为每人次(1.3692±0.3885)g,纯度(92.20±7.00)%.加入PS+SP-A较单纯加入PS显著改变了膜表面张力,方差分析显示P＜0.05,差异有统计学意义.结论:本试验较好地提纯SP-A并保持活性,方法可行.