产AmpC酶阴沟肠杆菌耐药的基础与临床

目的 :对我院阴沟肠杆菌产AmpC酶菌株的检出率、耐药性及ampC结构基因序列进行分析 ,探讨阴沟肠杆菌产AmpC酶菌株的耐药性及临床特点。方法 :采用琼脂稀释法对我院临床标本中分离的阴沟肠杆菌进行产AmpC酶株的筛选 ,用酶粗提物头孢西丁三维试验结合PCR法检测AmpC酶 ,并测定产AmpC酶菌株对 9种抗菌药物的MIC值。对 3株高度耐药阴沟肠杆菌产AmpC酶的结构基因和 1株敏感菌行PCR扩增并对产物序列进行分析 ,测序的菌株与E .cloacaep99进行了核苷酸序列比较和推导的氨基酸序列比较。结果 :阴沟肠杆菌产AmpC酶株的检出率为2 4 .6 %。产A…     

和厚朴酚对肝癌HepG2细胞生长抑制及凋亡的作用

目的:研究和厚朴酚(honokiol)对人肝癌HepG2细胞增殖的影响及诱导凋亡作用.方法:用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同浓度和厚朴酚对HepG2细胞的增殖活性的效应,通过显微镜、荧光染色观察细胞形态学变化;DNA片段化检测细胞凋亡;流式细胞术检测和厚朴酚诱导细胞凋亡的凋亡指数(AI),caspase-3、8、9活性的变化.结果:和厚朴酚浓度为40～160 μmol/L时对HepG2细胞增殖有明显的抑制效应,且呈剂量依赖性;细胞加入和厚朴酚诱导24 h后AI明显高于未加入组(P<0.05),caspase-3、8、9活性增高.结论:和厚朴酚在一定浓度范围内能明显抑制HepG2细胞的增殖并能诱导其凋亡,其作用呈浓度依赖性.它可能通过激活caspase途径诱导HepG2细胞凋亡.     

大肠杆菌头孢哌酮抗性基因亚克隆及序裂初步分析

为了确定耐药质粒所编码β－内酰胺酶衍化类型,用人介入临床分离出一大肠杆菌耐药质粒ｐＦＣ包哌酮抗性基因,经分段亚克隆,构建重组质粒ｐＦＢ１、ｐＦＢ２、ｐＦＢ３,对上述３个重要闰分别测序获得的抗生基因序列经Ｉｎｔｅｒｎｅｔ互联网同源性检索,表明该抗性基因部分序列,与肺炎克雷伯氏菌编码超广谱β－内酰胺酶ＴＥＭ－５２的抗性基因序列存在高度同源性（９７％）,提示ｐＦＣ头孢哌酮抗性基因所编码的β－内酰胺酶可能     

大肠杆菌HX88108膜孔蛋白初步研究

为了解大肠杆菌ＨＸ８８１０８耐药机理中有无膜孔蛋白缺失骑车,用十二烷基磺酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳检测了大肠杆菌ＨＸ８８１０８的膜蛋白,并与膜孔蛋白标准株进行比较分析。     

大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因的核苷酸序列测定及分子进化研究

目的 :调查四川大学华西医院分离的ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的TEM型及SHV型ESBLs亚型 ,并探讨其分子进化规律。方法 :对用PCR法扩增的产ESBLs大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的TEM型及SHV型ESBLs基因进行核苷酸序列测定 ,通过网上相似性检索确定其编码的酶的亚型 ,并利用生物信息学的方法探讨ESBLs分子进化的规律。结果检出的ESBLs亚型为SHV 2和TEM 1 9。本研究检出的1 0个blaSHV 2 沉默突变位点分布彼此相同 ,2个blaTEM 19沉默突变位点分布也彼此相同。与国外其它地方检出的blaSHV 2 比较 ,沉默突变位点分布不同。…     

金黄色葡萄球菌对亲水性氟喹诺酮类药物摄入的研究

为了解金黄色葡萄球菌对氟喹诺酮的耐药机理,作者用荧光测定法研究了细菌对洛美沙星、氧氟沙星的摄入以及能量抑制剂对两药摄入的影响.结果显示:耐药菌SAR、SA701、SA687对上述两种药物的摄入量均低于敏感菌SA2、SA3、SA4;加入能量抑制剂后上述细菌对药物的摄入量均有不同程度的增加.诱导菌对上述两药的摄入量均低于母株,加入能量抑制剂后,其摄入量增加非常明显,但仍未达母株稳态浓度.由此表明细菌对氟喹诺酮摄入减少是细菌对其耐药的机理之一,但泵出增加导致的细菌内药物浓度减少,在不同菌株的耐药机理中所占的地位不同.     

基于3T3-L1细胞的不同黄连炮制品"止消渴"药效比较研究

目的:系统运用生物效应法从细胞途径探索不同黄连炮制品"止消渴"的药效差异,为黄连治疗2型糖尿病的临床有效用药提供科学依据。方法:培养3T3-L1前脂肪细胞,并诱导分化为脂肪细胞,建立胰岛素抵抗模型,观察不同黄连炮制品对细胞增殖、分化的影响,对胰岛素抵抗模型细胞培养液中葡萄糖消耗量的影响。结果:不同黄连炮制品均能明显或部分降低培养液中葡萄糖的含量,提高脂肪细胞葡萄糖的利用率,改善胰岛素抵抗,在一定剂量范围内促进3T3-L1前脂肪细胞的增值,抑制前脂肪细胞的分化;且与黄连生品相比较,萸制黄连、酒蒸黄连和酒炙黄连对上述改善作用更为明显。结论:不同黄连炮制品具有改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗,增强脂肪细胞对葡萄糖摄取和利用的能力,从体外细胞水平上表现出改善胰岛素抵抗的作用,与黄连生品相比较,萸制黄连、酒蒸黄连和酒炙黄连"止消渴"疗效更优。     

慢性乙型肝炎的中医体质研究进展

概述近年中医体质和慢性乙型肝炎的研究进展,从体质学入手探讨慢性乙型肝炎的防治,并对今后慢性乙型肝炎的防治研究提出一些设想。     

HPLC法测定黄连中主要生物碱的方法学研究

目的建立2010年版《中国药典》黄连项下主要生物碱的含量测定方法。方法以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相为乙腈-50mmol/L磷酸二氢钾溶液（50∶50）（混合液中加15mmol/L十二烷基硫酸钠,再以磷酸调节pH为4.0）;流速0.6ml/min;检测波长345nm;柱温：30℃。结果盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的线性范围依次为0.0113-0.7240μg、0.0218-1.3920μg、0.0148-0.9440μg、0.0719-4.6020μg;加样回收率依次为98.61%、99.70%、98.26%、100.20%,RSD依次为1.4%、1.3%、1.3%、1.5%。结论该方法简便、准确、可靠,可作为2010年版《中国药典》黄连质量标准中的含量测定方法 。     

黄连及其炮制品水分灰分和浸出物的测定

目的 对不同来源的黄连及其炮制品的水分、灰分和浸出物进行测定,为2010年版<中国药典>黄连及其炮制品制订相关的质量标准.方法 按2005年版<中国药典>附录IX H水分测定法第1法、附录IX K灰分测定法、附录X A浸出物测定法测定.结果 黄连原药的水分不得过14.0%,总灰分不得过5.0%,50%乙醇热浸出量不得少于18.5%;黄连饮片的水分不得过12.0%,总灰分不得过3.0%,50%乙醇热浸出量不得少于17.0%;酒黄连饮片的水分不得过10.0%,总灰分不得过3.5%,50%乙醇热浸出量不得少于17.0%;姜黄连饮片的水分不得过11.0%,总灰分不得过3.5%,50%乙醇热浸出量不得少于18.0%;萸黄连饮片的水分不得过11.0%,总灰分不得过3.5%,50%乙醇热浸出量不得少于17.0%.结论 其研究结果可用于2010年版<中国药典>黄连及其炮制品质量标准的制定.