肠杆菌科细菌多重耐药操纵子的研究进展

多重耐药（mar)操纵子是广泛存在于肠杆菌科细菌染色体上的一个压力反应调控中心。mar位点突变或细菌暴露于诱导物时，其编码的转录激活蛋白MarA超表达，后者通过调节众多基因转录及改变细菌对药物的转运，使细菌对多种结构不相关的抗生素、有机溶剂及氧化作用压力的抗性增加，形成多重耐药（Mar)表型。     

耐甲氧西林葡萄球菌HVR基因分型及其与耐药性的关系

目的 为获得成都地区耐甲氧西林葡萄球菌的HVR－PCR基因型,比较HVR基因型与耐药谱的关系,从而指导临床合理选用抗生素,并初步探讨其在分子流行病学分析中的作用。方法 从成都地区四家三甲医院收集到临床分离的葡萄球菌114株。其中86株MRSA、10株MRSE（Mc‘S.epidemidis)、5株MSSE（Mc‘S.epidemidis)、8株MRSH（Mc‘S.haemolyticus)和5株MSSH（Mc‘S.haemolyticus)。用琼脂平皿二倍稀释法测定其MIC值,优良的碱裂解法提取DNA,应用PCR技术,扩增mec基因高变区（HVR区）,聚丙烯酰胺凝胶垂直板和琼脂糖凝胶电泳分型。结果 根据PCR产物片段大小,MRSA、MRSE和MRSH分别被分为4种、3种和2种基因型,其中有9株MRSE的PCR扩增产物片段大小与MRSA相同。MRSA主要为A、D型,分别占52．32％和39．53％;B、C型最为耐药,而D型对多种药物敏感。MRSE的Ⅰ型为高度多重耐药株,而Ⅲ型对多种抗生素敏感。MRSH的a型比b型耐药。结论 HVR－PCR法对于由MRSA引起的院内感染的流行病学调查是一种快速、简单、可靠的分型法,且有利于抗菌药物的选用。这种方法能够部分比较MRSA菌株和耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌（Mc‘CNSt)的mec决定因子,从而探讨其起源。     

金黄色葡萄球菌norA基因探针的制备

目的　研究制备 nor A基因介导的金黄色葡萄球菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制的 Dig- nor A基因探针。方法　采用聚合酶链反应 (PCR)制备 Dig- nor A基因探针。结果　 PCR法制备 Dig- nor A基因探针简便易行 ,可在较短时间内获得大量的探针 ,所得探针有较高的敏感性 ;Dig- nor A基因探针安全、易操作 ,标记探针可长期保存。结论　为进一步研究 nor A基因介导的耐药机制提供了一种手段     

质粒载体pUC19在头孢哌酮抗性基因(CPZ~r)克隆中的应用探讨

目的 :研究质粒pUC19是否为头孢哌酮抗性基因 (CPZr)分子克隆的理想载体。方法 :氯化钙法将质粒pUC19转化至工程菌E .coliDH5获得pUC19转化菌 ;采用试管二倍液体稀释法进行pUC19转化菌对 2 5种抗生素的敏感性测定 ;鸟枪法克隆耐药质粒pFC片段到载体pUC19获得含有CPZr 的重组质粒。结果 :pUC19转化菌对氨苄青霉素高度耐药 (MIC >2 5 6 μg/ml) ,对第一代头孢菌素中度耐药 ,对第二代头孢菌素中的头孢孟多耐药 ,而对头孢呋新敏感 ,在第三代头孢菌素中只对头孢哌酮耐药 (MIC ,6 4μg/ml) ,对其他第三代头孢菌素及 β 内酰胺酶抑制剂均高度敏感 ,同时敏感性测定结果还发现pUC19转化菌对氟喹诺酮类和氨基糖甙类抗性素均敏感。pUC19作为载体克隆到含有头孢哌酮抗性基因 (CPZr)的重组质粒少 ,克隆效率低 ,未能达到预期的目标。结论 :pUC19不适合作为CPZr 的克隆载体。     

大肠杆菌HX88108膜孔蛋白初步研究

为了解大肠杆菌ＨＸ８８１０８耐药机理中有无膜孔蛋白缺失参与,用十二烷基磺酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）检测了大肠杆菌ＨＸ８８１０８的膜孔蛋白,并与膜孔蛋白标准株进行比较分析。结果发现：大肠杆菌ＨＸ８８１０８具有膜孔蛋白ＯｍｐＦ、ＯｍｐＣ,其耐药与膜孔蛋白缺失所致的抗生素进入减少无关     

产AmpC酶阴沟肠杆菌耐药的基础与临床

目的 对四川大学华西医院阴沟肠杆菌产AmpC酶菌株的检出率、耐药性及ampC结构基因序列进行分析．探讨阴沟肠杆菌产AmpC酶菌株的耐药性及临床特点。方法 采用琼脂稀释法对临床标本中分离的阴沟肠杆菌进行产AmpC酶株的筛选，用酶粗提物头孢西丁三维试验结合PCR法检测AmpC酶．并测定产AmpC酶菌株对9种抗菌药物的MIC值。对3株高度耐药阴沟肠杆菌产AmpC酶的结构基因和1株敏感菌进行PCR扩增并对产物序列进行分析，测序的菌株与E。cloacae p99进行核苷酸序列比较和推导的氨基酸序列比较。结果 阴沟肠杆菌产AmpC酶株的检出率为24．6％。产AmpC酶菌株多呈多重耐药，产AmpC酶耐药菌对9种抗菌药物的耐药率由高至低为头孢西丁、头孢噻肟、阿米卡星、氨曲南、头孢他啶、头孢哌酮／舒巴坦、环丙沙星、头孢吡肟、亚胺培南。阴沟肠杆菌耐药株ampC结构基因的核苷酸序列与E.cloacae p99的同源性为99％．推导的氨基酸序列仅Ala-58→Pro发生点突变。结论 四川大学华西医院阴沟肠杆菌产AmpC酶细菌检出率较高。产AmpC酶细菌多呈多重耐药，亚胺培南是治疗产AmpC酶细菌感染的较可靠的药物。阴沟肠杆菌产AmpC酶是其对β-内酰胺类抗生素耐药的原因之一，其ampC结构基因突变可能与其耐药性有关。     

101株阴沟肠杆菌的耐药性分析

目的：调查分析阴沟肠杆菌对临床常用抗生素的耐药情况。方法：对四川大学华西医院2001年4月－2002年11月从临床分离的101株阴沟肠杆菌采用琼脂平皿对倍稀释法测定12种抗生素的最低抑菌浓度（MIC），分析耐药情况。结果：阴沟肠杆菌对氨苄西林、头孢呋辛的耐药率高达99.00%、87.13%，对第三代头孢菌素、氟喹诺酮类的耐药率高于50％，对关孢哌酮／舒巴坦、头孢吡肟、阿米卡星的耐药率低于40％，亚胺培南对90％以上的分离株具有抗菌活性。氟喹诺酮类药物的交叉耐药严重。结论：阴沟肠杆菌耐药水平高，多重耐药现象普遍存在。亚胺培南对其抗菌活性最强。     

环孢菌素A血药浓度监测的意义和检测方法的研究进展

环孢菌素A在临床上的应用越来越广泛,其药动学及药效学的特点使得对其进行血药浓度监测具有重要意义,多种检测方法也随之发展.     

金黄色葡萄球菌norA基因的研究

目的 研究norA基因介导的金葡菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制。方法PCR法制备DIG-norA基因探针；点杂交及狭线杂交检测细菌nor4基因及其转录水平。结果所有实验菌株均检测到norA基因；诱导耐药菌SA2-16的norA基因转录水平明显高于其亲代株，临床分离耐药菌norA基因转录水平略高于敏感菌，但统计学分析无显著性差异，细菌在环丙沙星1／10MIC浓度中生长，未见norA基因转录增加。结论 norA基因可能为金葡菌的结构基因，诱导耐药菌药物泵出增加的原因在于norA基因转录的增加，norA基因介导的耐药在不同的耐药菌株中所起的作用并不相同。     

热烈庆祝中国卫生事业管理杂志创刊20周年

(代卷首语 )乘改革开放之春风 ,沐小平理论之雨露 ,集广大作者之智慧 ,蒙万千读者之厚爱 ,《中国卫生事业管理》走过了不断发展的 2 0年。两代主编的正确领导 ,四届编委的不懈努力 ,三任编辑部主任的呕心沥血 ,四位编辑的辛勤笔耕 ,营造出一片中国卫生管理者的思想园地 ,树立起