人低密度脂蛋白~(125)I标记——一氯化碘法

本文报告了利用-氯化碘法对人血清低密度脂蛋白(LDL)进行~(125)Ⅰ碘化标记,结果表明,~(125)Ⅰ-LDL的比放射性为(61～185)×10~(-6)μCi/ng LDL,脂质标记率<1%,游离~(125)Ⅰ含量在0.43～1.90%之间,~(125)Ⅰ-LDL浓度为0.5～1.0mg/ml.~(125)Ⅰ-LDL的生物活性经受体实验证实与天然脂蛋白无差异,基本符合用于脂蛋白代谢研究的要求.本法具有反应温和,不易损伤脂蛋白,脂质标记率低,设备简单等优点,为进一步进行脂蛋白受体的研究提供了可行的方法.     

糖基化终产物对大鼠主动脉平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白1基因表达的影响

为探讨糖基化终产物对大鼠主动脉平滑肌细胞表达单核细胞趋化蛋白 1基因的影响 ,体外分离培养大鼠主动脉平滑肌细胞 ,然后用不同浓度葡萄糖 (0、5、2 0、5 0和 80mmol L)制备的糖基化终产物 BSA(2 0 0mg L)干预 2 4h和用葡萄糖浓度为 5 0mmol L孵育的糖基化终产物 BSA干预 0、12、2 4和 36h ,逆转录聚合酶链反应检测细胞中单核细胞趋化蛋白 1mRNA表达水平。结果发现 ,葡萄糖浓度 2 0mmol L、5 0mmol L和 80mmol L孵育的糖基化终产物都增加单核细胞趋化蛋白 1mRNA的表达 ,其中 5 0mmol L组作用最明显 (P <0 .0 0 5 ) ,干预 12h、2 4h、36h后单核细胞趋化蛋白 1mRNA表达均较未干预组明显增加 (P <0 .0 0 1)。结果提示 ,糖基化终产物促进大鼠主动脉平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白 1基因的表达     

尼莫地平、维拉帕米、卡托普利及普罗布可的体外抑制脂质过氧化作用

目的：研究钙拮抗剂、抗氧化剂及转换酶抑制剂抗动脉粥样硬化作用的机理。方法：以体外铜离子催化的ＬＤＬ脂质过氧化时硫代巴比妥酸反应物质（ＴＢＡＲＳ）为指标。结果：尼莫地平、维拉帕米、卡托普利及普罗布可均有程度不同的抑制ＴＢＡＲＳ生成的作用，抑制ＴＢＡＲＳ５０％生成量所需的浓度分别为５３、３１５、３４４、３．３μｍｏｌ／Ｌ。结论：上述药物抑制脂质过氧化的作用可能是抗动脉粥样硬化的主要机制之一。     

Effects of advanced glycosylation end products on proliferation and cytosolic free calcium in cultured rat aortic smooth muscle cells

目的：研究糖基化终产物（ＡＧＥＰ）对主动脉平滑肌细胞增殖的影响及其与［Ｃａ２＋］ｉ的关系．方法：采用同位素掺入法分别测定ＤＮＡ和蛋白质合成；Ｆｕｒａ２ＡＭ测定［Ｃａ２＋］ｉ．结果：ＡＧＥＰ以浓度、时间相关的方式促进［３Ｈ］ＴｄＲ与［３Ｈ］Ｌｅｕ掺入细胞，随ＡＧＥＰ作用时间、糖化时间延长，掺入率增加明显．ＡＧＥＰ增加［Ｃａ２＋］ｉ，与时间、浓度相关，但随ＡＧＥＰ作用时间延长（４０分钟后）而有所降低，ＢＳＡ修饰中葡萄糖浓度的增加，糖基化时间延长，［Ｃａ２＋］ｉ也呈上升趋势．结论：ＡＧＥＰ刺激平滑肌细胞增殖，并与细胞［Ｃａ２＋］ｉ浓度增加有关．     

氨基胍抑制糖基化终产物促进大鼠胰星状细胞增殖和基质合成的作用

目的：探讨抗糖基化药物氨基胍（ＡＧ） 对高级糖基化终产物（ＡＧＥｓ） 促进大鼠胰星状细胞（ＰＳＣ）增殖和基质合成的干预作用。方法：用非同位素的溴脱氧尿苷（ＢｒｄＵ） 掺入法和时间分辨免疫荧光法测定ＰＳＣ 的增殖过程,以时间分辨免疫荧光法和免疫细胞化学法观察了ＡＧＥｓ 对大鼠ＰＳＣ 纤连蛋白合成的作用,并观察了氨基胍对上述效应的干预作用。结果：ＡＧＥｓ 能以浓度相关的方式明显增强ＰＳＣ的增殖和纤连蛋白的合成, ＡＧ 处理的ＡＧＥｓ上述效应明显减弱。结论：ＡＧ 对ＡＧＥｓ 促进ＰＳＣ增殖和基质合成有明显的抑制作用。     

动脉粥样硬化的分子影像学检测

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是一种发生在血管壁的慢性炎症性疾病,是心脏病和卒中发生的最主要病因,因而对于AS的检测特别是早期检测显得尤为重要.尽管目前临床只能发现晚期的AS,但是,近年来随着分子影像学技术的发展,使AS的早期检测成为可能.笔者对分子影像学技术在AS检测中的应用综述如下.     

L-精氨酸/一氧化氮合酶途径在介导脂多糖对人肾系膜细胞增殖中的作用

目的 :探讨L 精氨酸 /一氧化氮合酶途径在脂多糖 (LPS)对人肾系膜细胞增殖中的作用。方法 :利用四甲基偶氮唑 (MTT)法检测L 精氨酸对脂多糖刺激的人肾系膜细胞活力的影响 ;利用硝酸还原酶法测定细胞上清液中亚硝酸盐含量 ,推测L 精氨酸代谢产物一氧化氮 (NO)对LPS刺激的人肾系膜细胞增殖的影响。结果 :L 精氨酸抑制LPS刺激的人肾系膜细胞增殖 ;细胞上清液中亚硝酸盐含量无明显变化。结论 :LPS不能刺激人肾系膜细胞产生大量NO ,L 精氨酸对LPS刺激的人肾系膜细胞增殖的抑制作用与L 精氨酸 /一氧化氮合酶途径无关。     

糖基化终产物对大鼠血管平滑肌细胞骨保护素mRNA表达的影响

目的:研究糖基化终产物(AGEs)对大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)骨保护素(OPG)mRNA表达的影响。方法:体外培养VSMCs,在含10 mmol.L-1β-甘油磷酸(β-GP)的培养液中加入不同浓度(0、50、100、200、400 mg.L-1)的AGE-牛血清白蛋白(BSA)与VSMCs孵育不同时间(0、12、24、36、48、72 h)。采用RT-PCR检测OPG的mRNA表达水平。结果:AGE-BSA呈时间和剂量依赖性地增加VSMCsOPG mRNA的表达;200 mg.L-1的AGE-BSA与VSMCs孵育24 h,OPG mRNA表达水平达到高峰。结论:AGE-BSA能够促进大鼠VSMCsOPG mRNA的表达。     

伊贝沙坦对2型糖尿病大鼠肾皮质fractalkine表达的影响

目的研究血管紧张素受体Ⅱ（ATⅡ）的AT1受体阻滞剂伊贝沙坦对2型糖尿病（T2DM）大鼠肾皮质趋化因子fractalkine表达的影响。方法制备T2DM大鼠模型,随机分为正常对照组、糖尿病组及伊贝沙坦治疗组。分别用半定量RT-PCR和免疫组化法检测肾皮质fractalkine mRNA和蛋白表达。结果糖尿病组血清糖基化终产物-肽、尿素氮（BUN）、24h尿总蛋白（24hUPro）、肾皮质fractalkine mRNA和蛋白表达均明显高于对照组;伊贝沙坦治疗组血清BUN、24hUPro、肾皮质fractalkine mRNA和蛋白表达则明显低于糖尿病组。结论伊贝沙坦可能通过抑制肾皮质fractalkine表达发挥其肾保护作用。