糖尿病患者血清低密度脂蛋白在人单核巨噬细胞中代谢异常

近年证实动脉粥样硬化病灶中泡沫细胞来源于单核巨噬细胞，已发现糖尿病患者糖基化低密度脂蛋白（ＬＤＬ）水平增高，代谢异常。本文以放射受体分析法比较１２例糖尿病患者及１２例年龄。性别配对的健康人血ＬＤＬ在人外周血巨噬细胞中的代谢，发现糖尿病患者ＬＤＬ的摄入和降解明显高于对照组，与其孵育过的巨噬细胞内胆固醇明显增高。提示糖尿病患者ＬＤＬ与巨噬细胞相互作用易形成泡沫细胞，高血糖引起的ＬＤＬ糖基化及其代谢异常可能是糖尿病人易患动脉粥样硬化的重要机制之一。     

糖基化低密度脂蛋白增强人外周血单核巨噬细胞的Sis基因表达

探讨体外糖基化低密度脂蛋白对人类核巨噬细胞中ｓｉｓ基因表达的影响及其在糖尿病易患动脉粥样硬化中的意义。密度梯度离心分离并培养人外周血单核巨噬细胞，提取总ＲＮＡ，地高辛标记ｓｉｓ基因探针和斑点杂交后发光检测及光密度扫描。糖基化代密度脂蛋白显著增强人外周血单核细胞ｓｉｓ基因表达。     

糖基化终产物对人血管平滑肌细胞表达及分泌甲状旁腺激素相关肽和血管钙化的影响

目的：观察糖基化终末产物（AGEs）对人血管平滑肌细胞表达及分泌甲状旁腺激素相关肽（PTHrP）功能的影响,探讨PTHrP影响血管平滑肌细胞钙化发生的相关机制。方法：不同浓度的AGE-BSA分别与人血管平滑肌细胞孵育相同时间后,检测各组细胞钙含量及碱性磷酸酶（ ALP）活性判断钙化程度;酶联免疫吸附法检测各组细胞PTHrP的分泌量;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测PTHrP、核心结合因子（ cbfα1）及骨形态发生蛋白2（ BMP-2）在各组细胞中的表达量。结果：随AGEs浓度增加,细胞中的钙含量及ALP活性增加（P＜0．05）,而细胞分泌的PTHrP量逐渐减少（P＜0．05）,且AGEs可促进cbfα1、BMP-2及PTHrP在血管平滑肌细胞的表达,这在较高浓度组较为显著（ P＜0．05）。结论：适当浓度的晚期AGEs可影响人血管平滑肌细胞PTHrP的表达水平及分泌量,促进钙含量增加,进而有助于血管钙化的发生。     

羧甲基赖氨酸对人外周血单核细胞破骨样转化的影响

目的：探讨羧甲基赖氨酸（ CML）对外周血单核细胞破骨样转化的影响。方法：从外周血分离提取单核细胞,分为3组：细胞核因子κB受体活化因子配基（ RANK-L）＋巨噬细胞集落刺激因子（ M-CSF）诱导组（ A组）,CML＋RANK-L＋M-CSF干预组（ B组）,空白对照组（ C组）。利用RANK-L和M-CSF诱导其破骨样转化,每天通过倒置显微镜观察细胞生长形态及计算细胞核个数,培养8d后通过抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色法观察破骨样细胞的形成,Western blotting 检测破骨细胞标志物组织蛋白酶K蛋白表达。结果：随着培养时间的延长,A组TRAP阳性多核细胞数明显增加,B组TRAP阳性多核细胞数较A组明显减少（P＜0．05）,B组组织蛋白酶K表达亦较A组明显降低（P＜0．05）。结论：CML能够抑制外周血单核细胞向破骨样细胞转化。     

丙酮酸脱氢酶激酶PDK4在临床中的研究进展

丙酮酸脱氢酶复合物PDC可催化丙酮酸氧化脱羧,从而为三羧酸循环和脂质生物合成提供乙酰-CoA和NADH,其活性可被丙酮酸脱氢酶激酶PDK磷酸化灭活。本文主要介绍了PDK同工酶——PDK4在代谢性疾病,如糖尿病、脂质代谢异常以及血管钙化中的研究进展,并进一步对PDK4的调控机制进行总结,包括调控因子、激素水平以及基因多态性。     

糖基化低密度脂蛋白在人单核细胞源巨噬细胞中代谢过程

低密度脂蛋白(LDL)在高血糖状态下,其多肽链上赖氨酸残基ε-NH_2易与葡萄糖发生非酶促结合,生成糖基化产物,使LDL功能和代谢异常,被认为在糖尿病患者动脉粥样硬化形成中起重要作用。现已肯定血液中单核细胞移入血管内皮下成熟成巨噬细胞吞噬大量脂质颗粒是动脉粥样硬化斑块中泡沫细胞的主要来源。本实验从健康成人外周血超速离心分离LDL,在无还原剂并接近体内状态下使用80mM葡萄糖与LDL孵育7-10     

糖基化低密度脂蛋白对细胞脂代谢及钙离子浓度的影响

观察糖基化低密度脂蛋白与人单核巨噬细胞相互作用对细胞脂代谢及钙离子浓度的影响。细胞降解ｇｌｃ－ＬＤＬ较正常ＬＤＬ组升高，结合ｇｌｃ－ＬＤＬ具饱和趋势，亲和常数为１７．８２ｍｇ／Ｌ最大亲和结合为４３４．７８ｍｇ／ｇ细胞蛋白，细胞内部总胆固醇含量升高，细胞游离钙离子浓度升高。提示人单核巨噬细胞代谢ｇｌｃ－ＬＤＬ途径与正常ＬＤＬ不同，此过程伴脂增加和钙离子浓度升高，可能为糖尿病病人易患动脉粥样硬化的原因