vIL-10逆转录病毒载体构建及在鼠成纤维细胞中的表达

目的：探讨ｖＩＬ１０的免疫抑制作用，为应用ｖＩＬ１０进行免疫基因治疗打基础。方法：用基因重组技术将ｖＩＬ１０ｃＤＮＡ克隆到逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ，并用脂质体法导入包装细胞ＰＡ３１７，取其上清感染小鼠成纤维细胞ＮＩＨ３Ｔ３。结果：经筛选获得抗Ｇ４１８的ＮＩＨ３Ｔ３阳性克隆，用ＲＴＰＣＲ，ＥＬＩＳＡ方法检测到ｖＩＬ１０的表达，用３ＨＴｄＲ法检测到ｖＩＬ１０对ＭＬＲ的抑制作用。结论：构建ｖＩＬ１０逆转录病毒表达载体并转染小鼠成纤维细胞，初步证实ｖＩＬ１０具有免疫抑制作用。     

微创加锁定接骨板治疗股骨转子间骨折

目的观察微创结合锁定接骨板治疗股骨转子间骨折的疗效。方法自2007年2月至2010年4月,采用微创加锁定接骨板对26例股骨转子间骨折患者进行治疗。其中男11例,女15例,平均年龄58岁。结果平均随访12个月（10～18个月）,骨折全部愈合,平均愈合时间3.5个月。未发现螺钉断裂、松动及拔出,1例出现轻度髋关节内翻畸形。髋关节功能评价（Sanders）优良24例,优良率92.3%。结论微创结合锁定接骨板治疗股骨转子间骨折具有损伤小、固定可靠、操作简便、骨折愈合率高、髋关节功能恢复较佳等优点,是较理想的一种手术治疗方法。     

T形接骨板结合植骨治疗桡骨远端不稳定骨折

目的探讨桡骨远端不稳定骨折采用手术切开复位T形接骨板内固定结合植骨治疗的疗效。方法2006年2月～2010年1月,采用掌侧或掌背联合人路切开复位T形接骨板内固定结合植骨治疗桡骨远端不稳定骨折31例。骨折按AO分型,B23例、B35例、C111例、C29例、c33例。结果所有患者均获得10～22个月随诊,按改良MeBnde评分,优21例、良6例、可3例、差1例,无并发症发生。结论切开复位T形接骨板内固定是治疗桡骨远端不稳定骨折的有效方法,结合术中植骨能有效防止关节面塌陷和促进骨折愈合。     

环磷酰胺衍生物4-氢过氧环磷酰胺诱导狼疮肾炎患者肾间质成纤维细胞凋亡

目的和方法：探索环磷酰胺能否通过诱导细胞凋亡来减轻纤维化病变，观察环磷酰胺衍生物４－氢过氧环磷酰胺（４－ｈｙｄｒｏｐｅｒｏｘｙｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ，４－ＨＣ）对狼疮性肾炎患者肾间质成纤维细胞凋亡的影响。结果：４－ＨＣ可明显促进其凋亡。结论：这为临床应用环磷酰胺治疗狼疮性肾炎，减轻肾间质纤维化，以迟缓肾功能恶化，提供新的实验证据。     

骨调素反义RNA在培养的肾小管上皮细胞的表达

骨调素（ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ,ＯＰＮ）是含精氨酸·甘氨酸－天门冬氨酸（ＲＧＤ）三肽序列（黏附分子结构）的高度酸性的磷酸化分泌性糖蛋白,是很强的巨噬细胞化学趋化和黏附分子。在许多与肾小管间质炎症损伤和纤维化有关的实验动物模型中,肾小管上皮细胞均有ＯＰＮ的过度表达,巨噬细胞浸润均发生在肾小管上皮细胞过度表达ＯＰＮ的区域,肾小管上皮细胞ＯＰＮ的过度表达与巨噬细胞局部浸润的密切相关性,表明ＯＰＮ是介导巨噬细胞在肾小管浸润并导致炎症损伤和纤维化发生和发展的关键细胞因子。因此,如能阻断肾小管上皮细胞ＯＰＮ…     

逆转录病毒载体介导的同种MHC基因在小鼠胸腺的表达

目的:通过胸腺内注射质粒 PXN(N2—B19—H—2K~b),表达外源性主要组织相容性抗原复合物(major histo-compatibility complex,MHC)抗原,为下一步诱导异基因小鼠器官移植耐受作准备.方法:通过 BALB/C 小鼠胸腺内注射质粒 PXN(N2—B19—H—2K~b),将外源性的编码 C57BL/6小鼠MHCI类抗原的H—2K~bcDNA转移到 BALB/C小鼠胸腺,用聚合酶链反应(PCR),反转录聚合酶链反应(RT—PCR),单克隆抗体免疫萤光染色流式细胞仪检测BALB/C小鼠胸腺细胞DNA,mRNA和MHC蛋白质表达,结果:BALB/C小鼠胸腺表面有外源性MHC分子表达,转染效率为5.1%结论:通过胸腺内注射逆转录病毒载体PXN(N2—B19—H—2K~b),小鼠胸腺能表达同种MHC基因,为下一步行异基因小鼠器官移植耐受打下了物质基础.     

白细胞介素10基因转移抑制肾小球系膜细胞诱生炎症细胞因子

目的：通过建立白细胞介素１０（ＩＬ－１０）的重组逆转录病毒载体基因转移系统,观察ＩＬ－１０对脂多糖（ＬＰＳ）诱导的大鼠肾小球系膜细胞（ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒｍｅｓｅｎｇｉａｌｃｅｌ,ＧＭＣ）中细胞因子的产生及其基因表达的影响。方法：通过构建的重组逆转录病毒载体ｐＬＸ（ＩＬ－１０）ＳＮ将外源基因ＩＬ－１０转移至大鼠ＧＭＣ：（１）应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）,反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ检测ＩＬ－１０基因的整合和表达;（２）以ＲＴ－ＰＣＲ观察ＩＬ－１０基因转移对ＬＰＳ诱导的ＧＭＣ肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）的ｍＲＮＡ表达的影响,以ＥＬＩＳＡ测定白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）和ＴＮＦ－α的蛋白质表达。结果：外源性ＩＬ－１０基因已整合到靶细胞染色体ＤＮＡ并有效地表达,它能抑制ＬＰＳ诱生ＧＭＣ过度产生ＩＬ－１β,ＴＮＦ－α。结论：外源性ＩＬ－１０基因可以转移到ＧＭＣ并稳定表达,它能抑制ＧＭＣ炎症效应中细胞因子的产生及其基因表达。     

表达白细胞介素10的系膜细胞基因转移载体的建立

目的为特异性地将病毒性白细胞介素１０（ｖＩＬ１０）基因转移到肾脏提供一种手段。方法应用逆转录病毒载体介导的基因转移技术将外源性基因ｖＩＬ１０转移到大鼠肾脏系膜细胞,应用ＲＴＰＣＲ、ＥＬＩＳＡ方法检测其表达,并通过对混合淋巴细胞反应（ＭＬＲ）的影响对其活性进行分析。结果ｖＩＬ１０在转染的系膜细胞表达２００００ｐｇ·（１０６细胞）－１／２４ｈ,应用３ＨＴｄＲ掺入法检测ｖＩＬ１０对ＭＬＲ的影响,实验组明显低于对照组（Ｐ＜００５）。结论外源性基因在系膜细胞有效地转录和表达,并对ＭＬＲ有抑制作用。     

GM-CSF对体外培养的LAK细胞抗肿瘤作用影响的初步研究

目的　探讨GM CSF对LAK细胞抗肿瘤作用影响 ,为临床应用GM CSF提供一些实验数据。方法　按常规分离正常人外周血成单个核细胞 ,分GM CSF组和LAK细胞组进行实验 ,观察GM CSF对LAK细胞的增殖活性和LAK细胞的细胞毒活性的影响。结果　GM CSF组细胞增殖活性较LAK组细胞增殖活性高 ,增殖第 7天时 ,GM CSF组达 7 3× 1 0 6/ml细胞 ,而LAK组只有 5 9× 1 0 6/ml细胞。GM CSF组效应细胞对肝癌细胞杀伤活性为 (1 7 4 8± 1 0 6 5 ) % ,LAK组效应细胞对肝癌细胞杀伤活性为 (32 36± 7 2 9) % ;说明GM CSF组对肝癌细胞的杀伤活性较LAK组效应细胞的杀伤活性为低 (P <0 0 0 5 )。结论　GM CSF对LAK细胞抗肿瘤功能具有抑制作用     

系统性红斑狼疮并急性腹痛的诊治—附15例临床分析

目的：总结系统性红斑狼疮（SLE）并急性腹痛的临床特点及诊断和治疗体会。方法：对15例有急性腹痛的SLE患者的临床资料进行回顾性分析。结果：15例患者中4例以急腹症为首次表现,11例见于SLE的不同的治疗阶段,临床上表现为急性腹膜炎,麻痹性肠梗阻,急性胰腺炎,缺血性肠梗死等。给予大剂量肾上腺皮质激素和（或）细胞毒性药物治疗的10例患者病情好转,给予常规肾上腺皮质激素治疗的4例有4例死亡。结论：SLE并急性腹痛可发生于SLE病程中的任何时期,有多种临床表现形式,其病情危重,病死率较高,应用大剂量肾上腺皮质激素和（或）细胞毒性药物常能迅速缓解症状,同时预防及控制感染可改善预后。