肺泡上皮细胞在肺纤维化中的作用及机制研究进展

肺泡上皮细胞(alveolar epithelial cell,AEC)是肺组织的结构细胞,在肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)发生和发展的过程中起着重要的作用。AEC损伤和凋亡是促进和引起肺纤维增生的原因之一,但并不是PF的必需因素,完整的AEC转染TGF-β1基因后也能诱导PF的发生。体外研究发现,AEC在TGF-β1的诱导下可以向间质细胞转化,但其在PF中所起的作用及分子机制还有待进一步阐明。因此,AEC在PF中的作用与上述因素及其它细胞尤其是成纤维细胞之间的相互作用有关。     

环核苷酸磷酸二酯酶活性的反相高效液相色谱测定法

本实验应用反相高效液相色谱法(RP—HPLC)测定环腺苷酸(CAMP)和环鸟苷酸(CGMP)的含量，根据底物量的减少，确认了犬气管平滑肌组织中环核苷酸磷酸二酯酶(PDE)活性的存在。并首次采用甲醇-磷酸缓冲液(10：90)的非梯度洗脱法，取得良好色谱分离效果，为研究犬气管平滑肌组织中PDE活性提供了简便而有效的测定方法。     

良园枇杷膏对豚鼠气道收缩和炎症反应的作用

目的:良园枇杷膏(下简称枇杷膏)是一个传统的镇咳祛痰复方中成药。本文旨在研究其对气道平滑肌的扩张和抗肺部过敏性炎症的作用。方法:采用肺功能测定法、离体气管法观察枇杷膏的支气管扩张和抗过敏作用;支气管肺泡灌流法观察抗炎作用。结果:在整体试验中,枇杷膏7.5 g/kg和15 .0g/kgi.g抑制致敏豚鼠抗原攻击后引起的肺阻力(R_L)增加和动态肺顺应性(C_dyn)降低;抑制支气管肺泡灌流中嗜酸性粒细胞增加,ID₅₀(95 %可信限)为1.98(0 .41～9.6 4)g/kg ;在离体试验中,枇杷膏呈剂量依赖反应松弛豚鼠离体气管平滑肌,IC₅₀(95 %可信限)为1.23(0.97～1.54)×10^-4g .L^-1;抑制Schultz-Dale反应,ID₅₀(95 %可信限)为4.55(2.78～7.42 )×10^-5g .L^-1。结论:枇杷膏具有支气管扩张和抗肺气道变态反应性炎症作用     

致敏小鼠肺组织eotaxin和TNF-α的表达及药物的影响

目的：建立测定肺组织趋化因子eotaxin mRNA、α-肿瘤坏死因子(TNF—α)mRNA表达的方法，观察抗炎药物对其表达的影响。方法：采用半定量RT—PCR法测定肺组织eotaxin mRNA、TNF—αmRNA表达，并通过观察支气管肺灌洗液中白细胞总数和嗜酸性粒细胞的数目来验证eotaxin和TNF—αmRNA表达增多的功能。结果：致敏小鼠抗原攻击后肺组织eotaxin mRNA和TNF—αmRNA表达与正常小鼠比较明显增多，支气管肺灌洗液中白细胞总数和嗜酸性粒细胞数目相应增加。抗炎药地塞米松对eotaxin mRNA、TNF—αmRNA表达以及炎症细胞浸润均有明显抑制作用；受试的复方中药对eotaxin mRNA表达以及炎症细胞浸润有明显抑制作用，对TNF—α表达无明显影响。结论：肺组织eotaxin mRNA表达与嗜酸性粒细胞增多一致，表明半定量RT—PCR测定肺组织eo—taxin mRNA的方法可用于探索平喘药物的作用机制。     

磷酸二酯酶4B在博来霉素诱导的肺纤维化小鼠肺组织中的表达与作用

目的观察博来霉素诱导的小鼠肺纤维化过程中磷酸二酯酶4B(PDE4B)mRNA和蛋白表达随时间的变化,初步探究PDE4B在小鼠肺纤维化过程中的作用。方法采用气道滴入博来霉素2.5 mg·kg-1制备肺纤维化模型,在造模后第3,7,14,21和28天进行支气管肺泡灌洗并留取肺组织。应用细胞形态学方法计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数和分类;ELISA法测定BALF中巨噬细胞炎症蛋白2(MIP2)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β和转化生长因子β1(TGF-β1)含量;胶原试剂盒测定法测定肺组织胶原含量;髓过氧化物酶(MPO)活性测定试剂盒测定组织匀浆液中MPO活性;实时荧光定量PCR方法检测小鼠肺组织中PDE4B mRNA表达;免疫组织化学法检测PDE4B的分布。结果博来霉素气道滴入诱导的肺纤维化随时间持续加重,第28天最明显,可见肺组织明显实质化。BALF中白细胞总数、IL-1β和IL-6在造模后第3天达峰值,分别为正常对照组的22.0,2.0和2.8倍;MPO和TGF-β1在第7天达峰值,分别为正常对照组的1.9和5.5倍;胶原含量、MIP-2和PDE4B mRNA表达从造模后呈持续增长趋势,分别为正常对照组的1.6,2.7和2.6倍。免疫组织化学法检测结果表明,PDE4B分布于炎症细胞和纤维化的肺组织。结论PDE4B在肺纤维化中发挥重要作用,可能是一个特异性的药物作用靶点。     

BIO-1211对嗜酸粒细胞趋化和聚集及释放介质的影响

目的 :研究 VL A- 4拮抗剂 BIO- 12 11对嗜酸粒细胞趋化、聚集和释放的影响。方法 :采用离体方法测定血小板活化因子 (PAF)诱导的嗜酸性粒细胞反应 ,整体方法观察嗜酸性粒细胞聚集和释放反应。结果 :BIO- 12 11能明显抑制 PAF对嗜酸性粒细胞的趋化作用 ,BIO- 12 114× 10 -11、4× 10 -10、4× 10 -9mol· L-1的抑制率分别为2 4 .9%、2 9.9%、31.3%。BIO- 12 111、3、10 mg·kg-1单次腹腔给药 ,呈剂量依赖性抑制大鼠葡聚糖凝胶引起的腹腔嗜酸粒细胞聚集 ,抑制率分别为 6 0 .3%、6 8.9%和 72 .9% (P<0 .0 5 ) ,但不能抑制嗜酸性粒细胞释放嗜酸细胞过氧化物酶。结论 :BIO- 12 11抑制嗜酸性粒细胞趋化和聚集 ,减轻局部炎症反应 ,有可能发展成为一种新的抗变态反应性药物。     

环孢素A气雾吸入对哮喘大鼠气道炎症的影响

目的研究环孢素A(CsA)气雾吸入对抗原诱导的大鼠过敏性气道炎症的作用。方法用卵白蛋白(OA)致敏大鼠,2周后气雾吸入CsA(5，10，20 g·L^-1),每天1次，连续7 d。大鼠致敏后d 20和d 21用OA(10 g·L^-1，每天1次)攻击，观察第2次OA攻击24 h后支气管肺泡灌洗液及外周血中嗜酸性粒细胞的数量和支气管肺组织病理学改变情况，测定支气管肺泡灌洗液中TNF-α含量。结果CsA气雾吸入能明显降低支气管肺泡灌洗液及外周血中嗜酸性粒细胞的数量，减轻肺组织中炎症细胞特别是嗜酸性粒细胞的浸润,减轻组织水肿及上皮损伤等气道炎症状况,降低支气管肺泡灌洗液中TNF-α含量。结论CsA气雾吸入对大鼠过敏性气道炎症具有抑制作用，其作用机制与细胞因子TNF-α释放减少有关。     

西地那非对脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤的作用

目的明确西地那非对急性肺损伤(ALI)的治疗作用及可能机制。方法采用脂多糖(LPS,4 mg·kg~(-1))气道滴入诱导的小鼠ALI模型。随机分为生理盐水组、LPS模型组、西地那非3,10及30 mg·kg~(-1)组、地塞米松5 mg·kg~(-1)组。测定肺干/湿重比值,常规细胞形态学检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞,肺组织切片观察病理改变;测定肺组织匀浆髓过氧化酶(MPO)活性、NO含量、NOS活性及TNF-α含量。结果LPS诱导的ALI小鼠肺干/湿重比值明显下降;BALF中白细胞总数及中性粒细胞比例明显增加;肺毛细血管通透性明显增加;肺组织间隙大量中性粒细胞浸润和红细胞渗出;肺组织匀浆TNF-α含量和MPO活性明显增加,NO含量、总NOS活性及iNOS活性明显增加。同时腹腔注射西地那非可剂量依赖性地降低ALI小鼠肺干/湿重比值;减少BALF中的白细胞总数及中性粒细胞的比例;降低肺毛细血管通透性;改善肺组织病理变化;抑制肺组织匀浆TNF-α含量、MPO活性及NO含量、总NOS活性及iNOS活性的增加。结论西地那非对LPS诱导的ALI有保护作用,提示NO- cGMP途径可能在ALI中起重要作用。     

慢性阻塞性肺部疾病治疗药物的研究动向

慢性阻塞性肺部疾病（COPD）是一组呼吸道气流病理性受限为特征的疾病。包括了慢性气管炎和肺气肿。在过去的10年里．没有新的抗炎药上市用于治疗这种疾病。目前。首要的任务是深入研究COPD的病理过程，以此探索新的动物模型和治疗靶点，研发有潜在治疗作用的新药和治疗方法。文中讨论了正在COPD临床研发中的新抗炎药以及它们的作用机制，同时也提出了一些新的看法。以便进一步理解COPD的病理生理，开发治疗COPD的新药。     

甘草黄酮对辣椒素诱导豚鼠咳嗽反射的抑制作用

目的观察甘草黄酮的镇咳作用及机制。方法用辣椒素气雾吸入诱导豚鼠咳嗽反射,M edL ab生物信号采集处理系统记录咳嗽次数。结果甘草黄酮30、100和300 m g/kg ig给药剂量依赖地抑制辣椒素诱导的豚鼠咳嗽反射,与模型组比较咳嗽次数分别减少32.7%、49.3%和59.6%(P<0.01、0.001);甘草黄酮100 m g/kg ig给药1、4、6 h可显著抑制辣椒素诱导的豚鼠咳嗽反射次数(P<0.01、0.05),作用8和12 h对咳嗽反射无显著影响(P>0.05)。纳洛酮0.3 mg/kg(ip)可部分阻断甘草黄酮的作用,马来酸麦角新碱3 mg/kg(ip)或格列本脲20mg/kg(ip)不能阻断甘草黄酮的作用。结论甘草黄酮呈剂量依赖方式抑制辣椒素引起的豚鼠咳嗽反射,甘草黄酮(100 mg/kg,ig)作用持续时间为6 h以上。纳洛酮部分阻断甘草黄酮的作用,表明甘草黄酮可能间接影响内源性的阿片系统。