低表达MICA/MICB导致NK细胞对人鼻咽癌多药耐药细胞（CNE2/DDP）杀伤活性下降

目的〖HT5"SS〗： 探讨HLAⅠ类分子及MHCⅠ类链相关分子(MICA/MICB)在人鼻咽癌细胞株CNE2及多药耐药细胞株CNE2/DDP的表达及其对NK细胞杀伤活性的影响。〖HT5W〗方法〖HT5"SS〗： 流式细胞仪检测CNE2和CNE2/DDP细胞表面HLA Ⅰ类分子和MICA/MICB的表达情况;LDH释放法测定3例健康者的NK细胞在不同效靶比时对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性;效靶比10〖DK〗∶1时,用抗HLAⅠ类分子单抗(W6/32)和抗MICA/MICB单抗(BAMO1)     

造血干细胞移植治疗自身免疫性疾病

近十余年来,造血干细胞移植技术(hematopoi eticstemcelltransplantation,HSCT)治疗难治性自身免疫性疾病(autoimmunedisease,ADs),业已取得了可喜的成绩。国内外学者把病情进展快,造成明显残疾或早期死亡的ADs,归为“严重自身免疫病”(SADs),其预期生存期为5～10年;近年随着医学科学的进展,自身造血干细胞移植的治疗相关病死率为1%～5%;对SADs患者,在发展到不可逆脏器损伤前,进行积极的治疗是合理的、必要的。现将HSCT治疗ADs的机制、适应证、方式和过程做简要叙述。一、HSCT治疗ADs的机制、适应证及方式欧洲抗风湿联盟(EULAR…     

自然杀伤细胞受体及抗肿瘤研究进展

自然杀伤(NK)细胞受体研究的进展对NK细胞如何选择性的识别和杀伤肿瘤细胞、病毒感染细胞而避免杀伤正常细胞的认识发生了革命性的变化。NK细胞表面的主要抑制性和活化性受体包括杀伤细胞免疫球蛋白样受体,C型凝集素受体家族,自然细胞毒受体等。临床资料显示,异基因骨髓移植中供受者之间杀伤细胞免疫球蛋白样受体-配体错配引发的异源反应性NK细胞活性可以防止白血病细胞复发。本文主要阐述NK细胞的受体是如何调控NK细胞的杀伤活性及调控NK受体-配体间相互作用提高抗肿瘤效应的方法。     

KIR3DS1与HLA-BBw4在广东汉族人群中的分布

目的:研究KIR3DS1与HLA-BBw4正常广东汉族人群中的分布状态.方法:对92例广东汉族干细胞移植供者以序列特异性引物扩增技术(PCR-Sequence Specific Primer)分析KIR3DS1和HLA-B表型;根据BW特异性分类,对HLA-BBw4第80位氨基酸残基为异亮氨酸者指定为HLA-BBw480ILE;依靠计算机软件进行KIR3DS1和HLA-BBw480ILE统计.结果:实验发现,在广东汉族人群中KIR3DS1、HLA-BBw4、HLA-BBw480ILE的表现频率依次为0.228,0.652,0.543;其中12.0%的个体为HLA-BBw4纯合子,14.1%的个体同时表现HLA-BBW480ILE和KIR3DS1,另外有8.70%单独表现KIR3DS1而不表现HLA-BBw480ILE.结论:在广东汉族人群中,只有14.1%的个体同时表达HLA-BBw480ILE和KIR3DS1,而单独表达2KIR3DS为18.70%.     

生物导向治疗肺癌的有效性与局限性

肺癌的发病逐年上升,能手术的病例<30％,且术后复发率又高达50％。非小细胞肺癌化疗有效率30～50％,完全缓解率<10％,长期无病生存<10％。因此期望着新的治疗方法,生物导向治疗引人注目。本文选择特异性及体内导向性较好的抗肺癌单克隆抗体为载体,携带放射性核素~(131)I,在荷人肺癌裸鼠模型上探索其用于肺癌导向治疗的可行性。 本文采用50％饱和硫酸胺和DEAE-52离子交换纯化抗人肺癌单克隆抗体ALTO4,得到单带纯IgG,用氯胺T法标记~(125)I于抗肺癌单克隆抗体ALTO4,标记率为60～70％。标记结合物比活性为85.2KBq/ug蛋白。在荷人肺腺癌(PC84045)细胞NC系裸小鼠体内定位研究表明腹腔注射~(125)I-ALTO4该免疫毒素能选择性地定位于肺癌组织。     

同种异体NK细胞对人脐静脉内皮细胞ECV304的杀伤活性差异及分子机制探讨

目的 探讨供者KIR分子表达差异对NK细胞杀伤人脐血内皮细胞系ECV304活性的影响,并观察参与杀伤的活化信号通路.方法 RT-PCR及流式细胞仪检测ECV304细胞NKG2D配体MICA/B、ULBP1-3表达,PCR-SSP法行HLA-A、B、Cw分型.自8例健康供者分离外周血NK细胞,流式细胞仪检测KIR2DL1的表达率,LDH释放法测定NK细胞在效靶比20∶1时对ECV304细胞的杀伤活性及anti-KIR2DL1mAb对NK细胞杀伤活性的影响.结果 ECV30细胞在mRNA水平表达MICA/B、ULBP1-3,但在膜蛋白水平均不表达.HLA分型表明,ECV304表达KIR2DL1的配体,而不表达KIR2DL2/3、KIR3DL1的配体.8例健康供者NK细胞KIR2DL1表达率有较大差异,对ECV304细胞的杀伤活性也有不同,双变量相关分析示个体KIR2DL1表达率与NK细胞对ECV304的杀伤率存在负相关(rS=-0.994,P=0.000).anti-KIR2DL1 mAb明显增强NK细胞对ECV304的杀伤活性(t=-4.860,P=0.002).结论 NK细胞对ECV304细胞的杀伤分子机制主要为HLA-KIR信号系统错配,目前已知的NKG2D配体MICMB、ULBP1-3并不参与,这有助于临床活体器官移植时在遗传指导下选择供体.     

不同肿瘤细胞表面MICA的表达及NK细胞杀伤活性的研究

目的：观察不同肿瘤细胞表面MICA的表达及其对NK细胞杀伤活性的影响。方法：以体外培养的K562（人慢性髓原白血病细胞株）、MCF-7（乳腺癌细胞株）、HR-8348（直肠腺癌细胞株）、CNE-2（人鼻咽癌细胞株）、Hela（人宫颈癌细胞株）为靶细胞，流式细胞仪检测细胞表面MICA的表达，以K562细胞作为对照，应用LDH释放法检测不同效靶比情况下体外培养的NK细胞对靶细胞的杀伤活性。结果：K562、MCF-7、HR-8348、CNE-2、Hela细胞表面均表达MICA，体外杀伤试验表明NK细胞对上述肿瘤细胞均有杀伤活性，anti-MICA单抗可部分封闭NK细胞对靶细胞的杀伤活性。结论：NK细胞对K562、MCF-7、HR-8348、CNE-2、Hela细胞具有较高的杀伤活性，可作为一种生物治疗手段。     

TJU103联合CTLA4-Ig对T细胞增殖和白血病细胞毒活性的影响

目的:观察异烟腙类衍生物TJU103联合CTLA4Ig对供者T细胞增殖和白血病细胞毒活性的影响。方法:体外建立HLA半相合供、受者间单向混合淋巴细胞反应(mixedlymphocytereaction,MLR)体系,应用TJU103联合CTLA4Ig阻断供者T细胞激活的抗原和共刺激双信号通路,利用MTT法检测供者T细胞经受者正常抗原刺激下的增殖反应以及对受者原代白血病细胞的杀伤活性。结果:单独应用TJU103和CTLA4Ig均能够降低供者T细胞的增殖活性,两者联合应用抑制增殖效应明显增强,增殖抑制率达92%,优于单独应用组(P<0.05),但不影响供者T细胞对原代白血病细胞的杀伤活性,P>0.05。结论:TJU103联合CTLA4Ig能够阻断供者T细胞激活的抗原和共刺激双信号通路,在明显降低供者T细胞增殖反应的同时,不影响其细胞毒活性的发挥。     

造血免疫干细胞移植治疗实体肿瘤

恶性实体肿瘤已成为常见病和致死性的疾病，发病率在逐年增长，有很多肿瘤转移得很早，诊断时就失去了手术的机会。并且，很多肿瘤抵抗常规化学治疗和放射治疗的程度也越来越严重。目前，提倡多种方法有计划的联合治疗和引入新的治疗方法。高强度化学治疗、放射治疗、造血免疫干细胞理论和技术的发展，联合组成了实体肿瘤的造血免疫干细胞移植治疗新技术。     

人骨髓基质干细胞克隆对脐血造血干细胞体外扩增作用的研究

目的：探讨人骨髓基质干细胞的克隆化培养及其对体外造血干细胞扩增的影响。方法：取正常肋骨分离骨髓，制备单个核细胞贴壁培养，约5d后取集落样生长的梭形细胞扩增培养，传代、将分选的脐血造血干／祖细胞接种到克隆培养的人骨髓基质干细胞及其他培养条件液上，比较不同培养条件及不同代次骨髓基质干细胞对造血干／祖细胞扩增能力及集落形成能力的影响。结果：人骨髓基质干细胞能扩增达20代以上，经流式细胞仪检测证实基质干细胞，单纯细胞因子组和细胞因子加基质干细胞组能有效扩增造血细胞，而后者有维持长期造血的作用。结论：该克隆培养方法能有效扩增骨髓基质干细胞，培养的细胞有体外支持长期造血的作用。