大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶基因的核苷酸序列测定及分子进化研究

目的调查四川大学华西医院分离的产超产谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的TEM型及SHV型ESBLs亚型,并探讨其分子进化规律。方法对用PCR法扩增的产ESBLs大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的TEM型及SHV型ESBLs基因进行核苷酸序列测定,通过网上相似性检索确定其编码的酶的亚型,并利用生物信息学的方法探讨ESBLs分子进化的规律。结果检出的ESBLs亚型为SHV-2和TEM-19。本研究检出的10个blaSHV-2沉默突变位点分布彼此相同,2个blaTEM-19沉默突变位点分布也彼此相同。与国外其它地方检出的blaSHV-2比较,沉默突变位点分布不同。本研究检出的blaTEM-19与blaTEM-1沉默突变位点分布相同。结论本研究检出的ESBLs亚型以SHV-2为主。检出的blaSUV-2及blaTEM-19各自由同一可转座突变体传播而来。世界各地流行的SHV=2与本研究检出的SHV-2存在趋同进化。本研究检出的blaTEM-19可能直接由本研究检出的可转座blaTEM-1单点突变而来。     

黄连改善胰岛素抵抗药效物质基础研究

目的:从细胞途径多方面观察黄连药材、部位及其成分等对3T3-L1前脂肪细胞诱导分化及脂肪细胞胰岛素抵抗的影响,探索黄连改善胰岛素抵抗的药效物质基础。方法:培养3T3-L1前脂肪细胞,采用地塞米松、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤和胰岛素共同诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为脂肪细胞,并建立胰岛素抵抗模型。依据黄连传统用药经验,观察黄连"药材-部位-生物碱成分"对脂肪细胞分化的影响,对胰岛素抵抗模型细胞培养液中葡萄糖消耗的影响。结果:除非生物碱部位在6.0μg.L-1具有明显促进分化作用外,其余各组无论黄连水提物、不同提取部位还是不同生物碱成分均能明显抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化,其中单体成分盐酸黄连碱在浓度16.5μmol.L-1时抑制作用最为明显;同时,各组也均能降低培养液中葡萄糖的含量,提高葡萄糖的利用率,改善胰岛素抵抗,作用与马来酸罗格列酮相似,其中单体成分盐酸药根碱在浓度10.5μmol.L-1时改善作用明显优于其余各成分。结论:黄连具有明显改善胰岛素抵抗,抑制前脂肪细胞分化的作用,其疗效可能是各成分协同作用的结果;同时其抑制分化作用也提示黄连在增加细胞对葡萄糖摄取的同时不会引起脂肪的聚集而造成体重增加,这对防治与胰岛素抵抗相关的代谢综合征或并发症具有一定临床意义。     

新发现的传染病

1 新病原体的发现 此介绍的新发现的传染病(Emerging infectious dis-eases)与再度出现的传染病(Re-emerging infectiousdiseases)是有区别的。一些大家比较熟识的古老的传染病,在历史上曾经已被基本控制、不构成公共卫生的问题,近些年又重新流行起来,再度成为严重威胁人类健康的公共卫生问题,这称为再度出现的传染病。 新发现的传染病特指由新种或新型病原微生物引发的传染病。根据Laderbeng (1996)总结,1975～1995年经确认的新病原体及其传染病共有31种,见表(略)。31种传染病中,病毒病14种,细菌病11种,寄生虫病6种。病原体大多是新确认的新种,少数是已     

大肠杆菌头孢哌酮抗性基因亚克隆及序列初步分析

为了确定耐药质粒ｐ Ｆ Ｃ所编码β内酰胺酶衍化类型，用从临床分离出的大肠杆菌耐药质粒 ｐ Ｆ Ｃ头孢哌酮抗性基因，经分段亚克隆，构建重组质粒ｐ Ｆ Ｂ１、ｐ Ｆ Ｂ２、ｐ Ｆ Ｂ３ ，对上述 ３ 个重组质粒分别测序获得的抗性基因序列经 Ｉｎｔｅｒｎｅｔ互联网同源性检索，表明该抗性基因部分序列，与肺炎克雷伯氏菌编码超广谱β内酰胺酶 Ｔ Ｅ Ｍ５２ 的抗性基因序列存在高度同源性（９７％ ），提示ｐ Ｆ Ｃ头孢哌酮抗性基因所编码的 β内酰胺酶可能衍化自 Ｔ Ｅ Ｍ型。     

耐甲氧西林葡萄球菌HVR基因分型及其与耐药性的关系

为获得成都地区耐甲氧西林葡萄球菌的HVR-PCR基因型,比较HVR基因型与耐药谱的关系,从而指导临床合理选用抗生素,并初步探讨其在分子流行病学分析中的作用,从成都地区四     

大肠杆菌耐药质粒头孢哌酮抗性基因的研究

目的　通过对头孢哌酮抗性基因 ( CPZΓ)的性质研究 ,进一步探讨 E.coli HX8810 8多质粒共存并介导第三代头孢菌素耐药的分子机理。方法　采用 Nitrocefin法检测 CPZΓ表达产物 ,用紫外线分光光度计测定β-内酰胺酶活性 ,采用试管二倍液体稀释法进行 CPZΓ克隆菌株对 18种抗生素的敏感性测定 ,同时还进行头孢哌酮( CPZ)对 CPZΓ克隆菌株耐药性诱导试验和温度敏感突变试验。结果　 CPZΓ 表达产物为 β-内酰胺酶 ,其酶活性强且与耐药质粒 p FC表达产物的活性基本一致。CPZΓ 只编码对氨苄青霉素、第一、第二代头孢菌素和第三代头孢菌素中 CPZ的耐药性 ,而对其他抗生素敏感。实验结果还显示了质粒 p FC经多次传代后介导 CPZ的耐药性显著下降 ,诺氟沙星、氨基糖甙类耐药性消失。CPZΓ 克隆菌株 CPZ耐药性增加为药物诱导所致 ,而非温度敏感突变。结论　耐药基因 CPZΓ 是通过编码 β-内酰胺酶介导产生 CPZ耐药性的 ,在抗生素压力下 ,CPZΓ 克隆菌株对 CPZ的耐药可以显著增加