地尔硫对抗扩张型心肌病自身免疫性损伤的临床疗效研究

扩张型心肌病(DCM)的病因和发病机理不明,既往一直以控制心力衰竭和纠正心律失常等对症治疗措施为主。对症治疗不能阻止和延缓DCM的心肌病变进展,因此DCM预后不良。文献报道DCM5年死亡率达40％。近些年来的研究表明,DCM患者体内存在一种抗心肌线粒体ADP/ATP载体(ANT)的自身抗体(抗ANT抗体),可以引起实验心肌细胞毒性损伤,钙拮抗剂可以阻止这种抗ANT抗体介导的心肌细胞损伤。本文旨在研究钙拮抗剂——地尔硫(艹卓)对抗DCM抗ANT抗体介导心肌损伤的临床疗效。     

牛磺酸对大鼠肝线粒体氧自由基损伤的保护作用

目的 观察氧自由基对线粒体的损伤以及牛磺酸的保护作用。方法 采用氧自由基发生系统ＦｅＳＯ４／ＶｉｔＣ损伤线粒体,分离的肝线粒体分为３组：对照组（Ａ组）,损伤组（Ｂ组）,牛磺酸保护组（Ｃ组）。分别测定线粒体呼吸功能、３种氧化酶活性、丙二醛含量。结果 Ｂ组线粒体状态３速率、呼吸控制率、磷／氧比、氧化磷酸化效率降低,说明线粒体呼吸功能和氧化磷酸化功能受损;Ｂ组线粒体电子传递链的琥珀酸氧化酶１、ＮＡＤＨ氧     

黄芪含药血清诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的实验研究

目的:探索黄芪含药血清诱导骨髓间充质干细胞(MSC)分化为心肌样细胞的作用。方法:采用日本大耳白兔制备黄芪含药血清,分离SD大鼠MSC进行传代培养。用黄芪含药血清和5-Aza进行诱导分化,免疫组化法检测诱导后细胞心肌肌钙蛋白、结蛋白表达,RT-PCR反应测定α-MHC和β-MHC表达。结果:诱导后细胞心肌肌钙蛋白、结蛋白表达阳性,并可以表达心肌特异性的肌球蛋白。结论:黄芪含药血清可诱导MSC分化为心肌样细胞。     

Analysis of Specific Th1/Th2 Helper Cell Responses and IgG Subtype Antibodies in Anti-CD4 Monoclonal Antibody Treated Mice with Autoimmune Cardiomyopathy

The cytokine repertoire of ADP/ATP carrier-specific humoral immune responses and the cytokine-dependent anti-ADP/ATP carrier antibody IgG subclasses were examined in a cohort of ADP/ATP carrier-immunized BALB/c mice treated with anti-CD4 monoclonal antibody. Eighteen male BALB/c mice （6–8 weeks old） were randomized into 3 groups： dilated cardiomyopathy （DCM） group, DCM-tolerance （Tol） group and control group. The mice in DCM group were immunized with the peptides derived from human ADP/ATP carrier protein for 6 months and mice in the control group were sham-immunized, while the mice in DCM-Tol group were immunized with ADP/ATP carrier protein and anti-CD4 McAb simultaneously. Serum autoantibody against ADP/ATP carrier and IgG subclasses were measured by ELISA, intracellular cytokines IFN-γ and IL-4 of Th cells were moni- tored with flow cytometry, and splenic T cell cytokines IFN-γ, IL-2, IL-4 and IL-6 were detected by using real-time fluorescent quantitative PCR. The results showed that the autoantibody against ADP/ATP carrier was found in all mice in DCM group, and the antibody level, serum IgG1 and IgG2a subclasses, cytokines in T cells and Th cells were all elevated in DCM group, as compared with those in control group （P〈0.01）. On the other hand, in DCM-Tol group, the autoantibody level and contents of all the cytokines were significantly different from those in DCM group （P〈0.01）, and were close to those in control group. And the levels of IgG1, IgG2a, IgG2b and IgG3 were influenced, to varying degrees, by anti-CD4 McAb as compared with those in DCM group. All these four types of IgG subclasses were substantially decreased in DCM-Tol group as compared with DCM group. It is concluded that the treatment with anti-CD4 McAb could prevent the activation of T cells, reverse the abnormal secretion of cytokines and the imbalance between Th1/Th2 cell subsets and abnormal production of autoantibody against ADP/ATP carrier, and eventually avoid myocardial injuries.     

骨髓间充质干细胞诱导分化为心肌细胞的研究进展及中药干预的前景展望

综述了骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的生物学特征,体外培养诱导MSCs分化成为心肌细胞,体内心肌微环境诱导MSCs生成心肌细胞及中药在MSCs诱导分化上的突破等研究概况。认为中药在MSCs诱导分化上的突破是国内外学者为修复坏死的心肌组织而进行对MSCs诱导分化为心肌细胞的有益尝试。以抗肿瘤药物5-氮胞苷作为诱导剂对MSCs进行诱导,诱导分化率不高,且有一定的局限性;根据中医药在防治心脑血管疾病方面取得较好的疗效,及不少研究表明中药或其有效成分能有效地诱导MSCs分化为神经元细胞,并且其诱导率比传统西医学方法高,展望中药有可能诱导MSCs分化为心肌细胞。采用中药有效成分作为诱导剂对MSCs进行诱导分化,这不仅为应用中医药治疗心肌梗塞提供新的理论依据,而且有可能与细胞移植的方法相结合治疗某些心血管疾病,可作为现代治疗方法的补充手段,为临床研究带来广阔的应用前景。     

变性高效液相色谱-测序技术在检测乳腺癌BRCA1基因突变中的临床诊断价值

目的探讨变性高效液相色谱（DHPLC）-测序技术在早期检测乳腺癌BRCA1基因突变的临床意义。方法用聚合酶链反应（PCR）扩增BRCA1基因，该扩增产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定后，直接进行DHPLC分析；有峰型改变的样本作测序分析，以确认突变。结果从124例乳腺癌患者中共发现9种突变。包括7种错义突变，其中，1例Stop598，1例A807E合并E809L，1例A807E，2例Y856H，1例T967S，2例11170F，1例R1203G；一种存在于一号内含子的突变，即IVS101—10T〉C17例；一种2号外显子的5’非翻译区突变，即A118T2例。此外，在乳腺癌标本和正常对照标本中都发现有几处常见的单核苷酸多态性位点。结论本研究确定了9种乳腺癌患者可能发生的突变类型，为今后临床应用DHPLC对高危人群BRCA1基因进行早期基因检测提供了9个位点。DHPLC一测序技术可快速、方便地区分带有碱基替换和小片段缺失的DNA片段，是一种可用于早期临床诊断乳腺癌BRCA1基因改变的高效、灵敏和操作简便的方法。     

翻转课堂联合案例教学法在心内科住院医师规范化培训中的应用

  目的  案例教学法(case-based learning,CBL)是以案例为主导的教学方法,翻转课堂是教学结构与教学流程颠覆的教学方法,本文旨在探讨翻转课堂联合CBL在心内科住院医师规范化培训中的应用效果,以提高教学质量。  方法  选取2021年4月—2022年7月于蚌埠医学院第二附属医院心内科进行3个月规范化培训的60名住院医师为研究对象, 按随机数字表法分为观察组和对照组, 每组各30名。观察组采用翻转课堂联合CBL,对照组采用传统教学法,对比分析2种教学方法的教学效果。3个月规范化培训结束后,对规培医师进行基础理论考试、实践技能操作及病例分析的考核并采用问卷调查形式评估2种教学方法的效果。  结果  观察组的基础理论知识成绩[(93.1±5.3)分]、技能操作成绩[(89.2±10.1)分]及病例分析考核[(90.2±6.7)分]结果明显高于对照组的基础理论知识成绩[(88.5±8.9)分]、技能操作成绩[(81.3±11.4)分]及病例分析考核[(85.3±5.9)分],差异有统计学意义(均P < 0.05)。问卷调查满意度调查评分也明显高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)。  结论  翻转课堂联合CBL有利于提升心内科规培医师规范化培训的质量,激发规培医师的学习兴趣,提升教学满意度,提高规培医师的临床解决问题能力、自主自学能力、实践操作技能,有利于未来学习,对提升临床教学效果起促进作用。      

ELISA及免疫印迹法检测抗肌球蛋白抗体的比较

目的 比较ELISA和免疫印迹法检测抗肌球蛋白抗体的优缺点和临床应用价值。方法 采用猪心肌组织中提取的心肌肌球蛋白作抗原,以ELISA和免疫印迹法检测48例扩张型心肌病（DCM）和40例冠心病患者血清中的抗肌球蛋白抗体;同时与人工合成的肌球蛋白重链抗原对比。结果 ELISA和免疫印迹法对DCM组抗肌球蛋白抗体检测的阳性率相近（50％对43．8％）,但后者能区分针对抗原亚单位的抗体,前者则不能。猪心肌肌球蛋白与人工合成多肽的ELISA检测结果具有高度的相关性（P＜0．01）。结论 以人工合成肌球蛋白重链作抗原,采用ELISA检测抗肌球蛋白抗体既有助于DCM与冠心病的鉴别诊断,又简便易行。     

抗CD4单抗干预实验鼠自身免疫性心肌病的T细胞信号转导机制(英文)

目的：探讨抗L3T4单克隆抗体对BALB/c小鼠实验性自身免疫性心肌病的治疗作用及T细胞信号转导机制。方法：以ADP/ATP载体肽免疫小鼠建立自身免疫性心肌病模型。3个月后，向小鼠体内注入抗L3T4单抗，以清除CD4+T细胞，并以无关抗体为对照。通过实时荧光定量PCR检测小鼠T细胞中信号分子（p56lck、p59fyn和Zap-70）和细胞因子（IFN-γ、IL-2和IL-4）的表达；通过免疫组化技术分析各组小鼠T细胞内CD45的表达。结果：给予抗L3T4单抗治疗的DCM小鼠T细胞内信号分子（p56lck、p59fyn和Zap-70）和细胞因子（IFN-γ、IL-2和IL-4）表达均减少，CD45的表达也明显减少。相反，以无关抗体免疫小鼠并不能对其产生保护作用，T细胞信号分子、CD45和细胞因子的表达也不被抑制。结论：抗L3T4单抗可以抑制ADP/ATP载体肽诱导的小鼠DCM过程中的T细胞信号分子和细胞因子的表达，可能起到治疗作用。     

腺苷酸转位酶诱导自身免疫性心肌病小鼠的异常T细胞受体信号通路

目的：通过研究T细胞信号分子的表达, 探讨自身免疫性扩张型心肌病发生的分子机制。 方法： 以线粒体腺苷酸转位酶（ANT）合成肽免疫液免疫Balb/c小鼠，建立自身免疫性扩张型心肌病动物模型（DCM组），运用实时荧光定量PCR法检测其T细胞内P56lck的表达, 流式细胞术检测其Th细胞内IFN-γ和IL-4的含量, ELISA法检测其血清抗ANT自身抗体水平, 免疫组化法观察其T细胞表面CD45的表达。以不含ANT合成肽免疫液免疫小鼠作为对照组（control），试验期6个月。 结果： DCM组小鼠P56lck的基因表达(1 369.51±874.05 vs 47.93±10.21, P<0.01)、IFN-γ和IL-4的百分含量(尤其是IL-4)（8.27±1.29 vs 5.58±0.59, P<0.01; 9.93±1.53 vs 2.05±0.21, P<0.01）、抗ANT自身抗体的水平（0.105±0.015 vs 0.006±0.002, P<0.01）、CD45的表达强度(0.154±0.021 vs 0.026±0.008, P<0.01)均明显高于对照组。 结论： 异常的T细胞受体信号转导通路在ANT肽诱导扩张型心肌病发生中起着重要作用。