长期培养对基质细胞衍生因子1/CXCR4介导间充质干细胞迁移的影响**◆

背景：人外源性的间充质干细胞能特异性地向损伤部位迁移,参与多种组织的损伤修复,然而其定向迁移的机制尚不清楚。 目的：观察基质细胞衍生因子1对骨髓间充质干细胞定向迁移的影响。 方法：体外培养不同个体的骨髓间充质干细胞,培养至第10代,检测细胞衰老状态。RT-PCR和细胞免疫荧光检测骨髓间充质干细胞CXCR4受体表达情况;体外迁移体系(Transwell)检测基质细胞衍生因子1对骨髓间充质干细胞迁移的影响。 结果与结论：骨髓间充质干细胞在体外长期增殖后生长逐渐缓慢,在第6,7代衰老细胞增多,其CXCR4受体表达减少。基质细胞衍生因子1对骨髓间充质干细胞的趋化作用呈剂量依赖性。 关键词：趋化作用;骨髓间充质干细胞;细胞衰老;基质细胞衍生因子1;CXCR4受体 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.01.013      

MC148腺病毒重组体的构建及鉴定

目的　构建 MC1 4 8腺病毒重组体。方法　从传染性软疣病毒基因组中克隆 MC1 4 8基因 ,产物测序后将之插入柯斯质粒 ,然后与 DNA- TPC共转染进 2 93细胞 ,同源重组构建腺病毒重组体。浓度梯度法测定病毒滴度。结果　成功构建 Ad- MC1 4 8腺病毒重组体 ,经测定滴度达 3.5 6× 1 0 9(pfu/ml)。结论　本方法建立为研究 MC1 4 8基因转染对趋化因子的拮抗作用奠定基础     

7个肾上腺脑白质营养不良家系的基因突变分析

目的：对7个肾上腺脑白质营养不良家系进行基因突变分析。方法：应用RT—PCR技术。对7个患者的ABCD1基因编码区，分4个片段进行扩增并对PCR产物直接测序。应用PCR-限制性酶切或DNA测序等方法分析相应的基因组DNA,进一步确证ABCD1的突变位点。结果：在7名肾上腺脑白质营养不良患者的ABCD1基因上，存在6个不同的碱基置换（709C〉A、807G〉A、1161C〉T、2065C〉T、2113T〉C和2235C〉T）、1个碱基缺失（1801delAG）和1个碱基插入（1126insGCCATCG），分别造成5个错义突变（A141T、R259W、P560L、L576P和R617C）、2个移码突变（fs I246和fs E471）和1个无义突变（S108X）。结论：在中国人肾上腺脑白质营养不良患者中发现4个新的ABCD1基因突变。即S108X、fs I246、R259W和L576P突变。不同家系具有不同的突变位点，且突变类型和表型之间无特殊的相关性。     

扩增阻滞突变系统在脊肌萎缩症快速诊断中的应用

儿童进行性脊髓肌肉萎缩症，简称脊肌萎缩症（spinal muscular atrophy，SMA），是一种以脊髓前角运动细胞变性为病理特征，临床上以近端肌无力、肌萎缩为主要表现的常染色体隐性遗传性疾病。根据SMA发病年龄和病程的不同将其分为三型：Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型。该病的致病基因称运动神经元生存基因，即SMN基因（survival motor neuron gene），它在染色体5q区域内存在2个同源拷贝，即位于端粒端的SMN1和位于着丝粒端的SMN2，两者在编码区内仅存在1个碱基的差异，即位于第7外显子上的840位碱基在SMN1为C，     

扩增阻滞突变系统在脊肌萎缩症快速诊断中的应用

儿童进行性脊髓肌肉萎缩症，简称脊肌萎缩症（spinal muscular atrophy，SMA），是一种以脊髓前角运动细胞变性为病理特征，临床上以近端肌无力、肌萎缩为主要表现的常染色体隐性遗传性疾病。根据SMA发病年龄和病程的不同将其分为3型：Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型。该病的致病基因称运动神经元生存基因，即SMN基因（survival motor neuron gene），它在染色体5q区域内存在2个同源拷贝，即位于端粒端的SMN1和位于着丝粒端的SMN2，两者在编码区内仅存在1个碱基的差异，即位于第7外显子上的840位碱基在SMN1为C，在SMN2为T，但SMN1和SMN2的氨基酸序列相同。     

五个脊肌萎缩症高风险胎儿的产前诊断

目的对5名生育过脊肌萎缩症(spinal muscular atrophy,SMA)患儿的妇女当前所怀胎儿进行产前诊断。方法超声监视下行羊膜腔穿刺术抽取羊水。离心后直接从沉渣中提取胎儿基因组DNA。采用短串联重复序列位点检测法排除母体基因组DNA污染。常规PCR扩增胎儿SMN基因第7外显子。PCR产物经DraⅠ酶切后,行琼脂糖凝胶电泳。通过位点特异性PCR扩增SMN1和SMN2的第7外显子。结果比较各胎儿与父母的16个短串联重复序列位点,未见羊水DNA受母体DNA污染迹象。常规PCR中,胎儿A、C、D的PCR产物(189bp)仅有部分可被DraⅠ切割,而胎儿B、E的PCR产物全部被DraⅠ切割。在位点特异性PCR中,胎儿A、C、D既有SMN1、也有SMN2的第7外显子扩增产物,而胎儿B、E只有SMN2的第7外显子扩增。结论胎儿A、C、D未见SMN1纯合性缺失,出生后患SMA的风险极小;胎儿B、E为SMN1纯合性缺失,出生后患SMA的风险极大。     

腹茧症临床分析(附9例报告)

目的:探讨腹茧症的临床表现、影像学表现、诊断、治疗和预后。方法:回顾性分析2007年1月至2018年6月我院诊治的9例腹茧症病人的资料,包括临床表现、影像学表现、诊断、治疗和随访结果。结果:4例术前CT检查明确诊断腹茧症,余5例经剖腹探查确诊。1例接受非手术治疗好转,8例手术治疗。术中发现部分或全部小肠或伴有部分结肠包裹在纤维茧状膜中。手术方式为腹茧切除,肠粘连松解。术后1例死于多脏器功能衰竭,另4例术后并发早期肠梗阻。8例生存病人中,1例失访,7例随访6个月至10年,其中1例慢性腹痛,2例肠梗阻,1例腹胀,3例情况良好。结论:腹茧症的临床表现为非特异性,术前诊断较困难。腹部增强CT伴或不伴二维图像重建检查的特征性图像是术前诊断的关键。手术治疗是首选,总体预后满意。     

结肠中血管根部切断在右侧结肠癌根治术中的价值

目的评估右侧结肠癌根治术中常规根部切断结肠中血管的远期疗效。方法将1981年1月至2004年12月间在我院行右侧结肠癌根治术的患者308例按手术的不同方法,将患者分为两组：A组（103例,1996年1月至2004年12月间）,常规根部切断结肠中血管,清除结肠中血管周围组织;B组（205例,1981年1月至1995年12月间）仅切断结肠中血管右侧支;对两组患者手术的安全性和随访结果进行比较分析。结果A组和B组手术死亡均为1.0％,吻合口瘘发生率分别为2.9％和2.4％,腹腔淋巴瘘发生率分别为8.7％和5.9％,胃潴留发生率分别为9.7％和5.9％,其他并发症发生率分别为4.9％和3.9％;两组比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。254例（82.5％）获得随访,随访时间8-60个月。A组1、3年复发率分别为1.9％和13.6％,B组则分别为19.0％和24.9％,两组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。5年生存率A组为（78.3±3.4）％;B组为（64.8±2.8）％;两组比较,差异也有统计学意义（P〈0.05）。结论右侧结肠癌根治术中,常规根部切断结肠中血管,不增加手术并发症,可明显减少术后1、3年复发率,提高5年生存率。     

肾移植联合成人胰岛细胞移植治疗糖尿病肾病七例报告

目的 建立新型成人胰岛细胞分离纯化方法和无激素免疫抑制方案.观察.肾移植联合胰岛细胞移植治疗1型糖尿病肾病的安全性与有效性.方法 全氟化碳液与威斯康星大学器官保存液双层冷藏胰腺,Liberase酶消化,COBE 2991型专用胰岛细胞分离机分离及连续密度梯度纯化,获取高纯度与高活性的胰岛细胞.常规方法行尸体肾移植,次El采用外科方法将短期培养的胰岛细胞经门静脉移植到肝脏内,采用无激素免疫抑制治疗.术后定期监测血糖与胰岛素用量、C肽与糖化血红蛋白水平以及肝肾功能.结果 23个胰腺均成功分离胰岛细胞,平均数量30万胰岛当量(IEQ)、纯度92%、活率95%、刺激指数3.16,病原学结果均阴性.7例1型糖尿病肾病患者共行胰岛细胞移植12次(移植1次3例、2次3例、3次1例).每次移植胰岛数量平均为11 820 IEQ/kg.采用阿来佐单抗诱导、西罗莫司和小剂量他克莫司、无激素免疫抑制治疗.随访1.5～3.0年,4例完全撤除胰岛素,3例胰岛素用量较术前减少＞70%.术后血糖稳定维持在正常水平,C肽均＞0.166nmol/L,糖化血红蛋白正常,肝肾功能正常.结论 新型成人胰岛细胞分离纯化方法可靠,胰岛细胞联合肾移植治疗1型糖尿病肾病安全、有效.