Dynamic Imaging of Autophagy-lysosomal Pathway and Autophagy Function Following Pulmonary Hypoxia/Reoxygenation In Vitro

Alterations of the autophagy-lysosomal pathway(ALP) and autophagy have been involved in lung ischemia-reperfusion(I/R) injury. However, dynamic imaging of ALP function under lung I/R injury particularly is not fully understood. Here we depicted the live-cell fluorescence imaging of autophagosome to monitor ALP activation and autophagy function. The p As Red2-N1-LC3 vectors were transfected into CRL-2192 NR8383(an alveolar macrophage cell line) and CCL149(an alveolar epithelial cell line) successfully. 0-h, 2-h, 4-h, and 6-h hypoxia/0-h, 2-h, 4-h, and 6-h reoxygenation were then induced with an ALP inhibitor(3-MA) or activator(rapamycin) in the culture of transfected cells separately. ALP activation was conformed by up-regulating AMPK and beclin1 expression. Apoptosis was not obvious in 2-h hypoxia/2-h reoxygenation. p As Red2-N1-LC3 CCL149 and p As Red2-N1-LC3 NR8383 cells revealed gradually enhanced As Red2 from 2-h to 6-h hypoxia/reoxygenation. As Red2 varied sensitively to 3-MA and rapamycin interventions during 2-h hypoxia/reoxygenation. Our data provides a simple method of autophagosome imaging to monitor ALP activation and autophagy function in lung I/R injury.     

Notch信号通路在肺癌干细胞中的表达及其对增殖的影响

目的 观察Notch信号通路在肺癌干细胞中的表达及阻断Notch信号通路对肺癌干细胞增殖的影响.方法 以CD133作为肿瘤干细胞表面标志,采用流式细胞仪高速分选技术从人肺腺癌细胞株A549中分离肺癌干细胞及普通肿瘤细胞,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)及Western blot检测肺癌干细胞和普通肿瘤细胞内的Notch信号通路的表达水平;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测肺癌干细胞和普通肿瘤细胞的体外增殖能力,并绘制生长曲线;使用γ-分泌酶抑制剂(DAPT)阻断Notch信号通路传导,观察肺癌干细胞和普通肿瘤细胞的体外生长差异.结果 流式分选前检测CD133阳性细胞(肺癌干细胞)占所有A549细胞的百分比为(0.40±0.11)％,而流式分选后所得细胞中,CD133阳性细胞占百分比为(95.00±0.63)％,两者差异有统计学意义(P＜0.01).Notch通路在肺癌干细胞及普通肿瘤细胞中均表达,Notch1及Notch2在肺癌干细胞中的表达显著低于在普通肿瘤细胞内的表达,差异有统计学意义(P ＜0.05);Hes1仅在普通肿瘤细胞中表达,在肺癌干细胞中未检测到表达.肺癌干细胞与普通肿瘤细胞的增殖能力差异无统计学意义(P＞0.05),而在DAPT干预48 h后,肺癌干细胞和普通肿瘤细胞的体外增殖均受到了抑制,肺癌干细胞的生长抑制率[(33.7±1.9)％]显著高于普通肿瘤细胞的生长抑制率[(21.5±3.4)％],差异有统计学意义(P＜0.05).结论 较之普通肿瘤细胞,阻断Notch通路传导对肺癌干细胞的生长抑制效果更强,这可能与DAPT抑制了Notch的过高表达对肺癌细胞的负反馈作用有关.     

呼吸道管理在老年肺癌患者围手术期的护理探讨

目的：探讨低肺功能老年肺癌患者围手术期呼吸道管理的方法。方法：在肺癌患者围手术期护理的基础上，对低肺功能老年肺癌患者，加强术前、术后有效的呼吸道管理。结果：40例70岁以上低肺功能老年肺癌患者中，1例因术前伴有重度通气功能障碍，术后发生呼吸衰竭合并肺部感染死亡。结论：加强围手术期呼吸道管理，可有效的预防和减少术后并发症的发生，提高低肺功能老年肺癌患者术后的生活质量。     

单细胞测序技术在非小细胞肺癌研究中的应用进展

多项研究指出多样的肿瘤微环境影响着肺癌治疗反应性及耐药性,因此亟待我们去描述并定义这些微环境特征。单细胞测序技术通过识别不同的细胞亚群,剖析肿瘤微环境中的信号传递,以及表征细胞基因组突变和拷贝数异常,为我们更深入理解肿瘤生物学开辟了新的途径。应用单细胞测序技术可深入研究非小细胞肺癌的肿瘤微环境,进而指导临床治疗和预防肿瘤复发等。本文将综述单细胞测序技术在非小细胞肺癌研究领域应用的最新进展。     

美国国家综合癌症网络临床实践指南:非小细胞肺癌(2021V1)更新解读

在世界范围内,肺癌是最常见的癌症,预计2020年美国将有606520人死于癌症,而其中几乎四分之一的死因是肺癌[1].肺癌在组织病理学上主要分为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC )和小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC),其中,非小细胞肺癌约占...     

脂质代谢在急性肺损伤中的研究进展

急性肺损伤是一种常见的呼吸系统危重症, 具有高发生率和高病死率的特点, 然而目前尚缺乏有效治疗手段。脂质代谢是生物代谢过程中的重要组成成分, 影响着生物体内绝大部分生理进程。而脂质代谢的失衡参与了多种疾病的病理过程, 本文在介绍肺相关正常脂质代谢的基础上, 回顾总结脂质代谢失衡在急性肺损伤中作用机制的研究, 旨在为急性肺损伤的防治提供参考。     

基于机器学习的肺腺癌特征基因筛选初步研究

目的通过采用生物信息学与机器学习算法分析和筛选公共数据库中肺腺癌的关键基因, 探究肺腺癌诊治的生物标志物。方法从基因表达数据库(GEO)数据库中选择肺腺癌基因表达谱(GSE116959、GSE118370、GSE19188), 利用R语言中的Combat包对GSE116959与GSE118370去批次化合并作为训练组;并获得差异表达基因(DEGs)。采用最小绝对收缩和选择算子(LASSO)、支持向量机递归特征消除(SVM-RFE)算法分别对训练组进行预测, LASSO与SVM-RFE算法交集基因被认为是肺腺癌特征基因。利用箱型图和受试者工作曲线(ROC)对筛选出的特征基因在验证集中进行验证并对筛选出的基因进行免疫细胞浸润分析。结果 LASSO算法共筛选出8个特征基因, SVM-RFE算法共筛选出6个特征基因, 两个算法有4个交集基因(BTNL9、LOC400568、RTNK2、SGCG), 4个基因对疾病的预测能力分别为0.945[95%可信区间(CI):0.885～0.994], 0.892(95%CI:0.819～0.952), 0.919(95%CI:0.854～0.971), ...     

N6-甲基腺苷修饰在脂多糖诱导的急性肺损伤中的变化

目的探讨N6-甲基腺苷(m6A)修饰在脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤(ALI)的变化, 并探讨其机制。方法将12只8～10周龄的C57BL/6雄性小鼠按照随机数字表法分为对照组和LPS组。LPS组给予LPS(5 mg/kg)气管内滴注, 对照组给予同等剂量生理盐水气管内滴注, 12 h后取材, 比较两组小鼠肺组织湿干重比。比较两组小鼠肺组织病理变化。应用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测炎性因子和相关基因表达水平。运用m6A甲基化免疫共沉淀测序(meRIP-seq)和RNA测序(RNA-seq)技术检测两组小鼠肺组织的m6A修饰水平和RNA水平, 并采用生物信息学对结果综合分析。组间比较采用t检验。结果 LPS组小鼠肺湿干重比(7.56±0.34)高于对照组(3.99±0.54), 差异有统计学意义(t=13.749, P<0.05), 且苏木精-伊红(HE)染色提示炎性细胞浸润和肺间质水肿程度加剧。LPS刺激增加小鼠肺组织炎性因子IL-1β(1.00±0.27比11.76±6.78)、IL-6(1.00±0.16比2.16±0.70)、TNF-α(1.01±0.09比1....     

尿苷代谢在炎症相关疾病中的研究进展

尿苷是一种嘧啶核苷, 参与细胞内多种生物大分子的合成, 如遗传物质、糖原等。此外, 尿苷及其衍生物可通过多种作用机制调节细胞内的生理过程。越来越多的研究结果显示, 尿苷具有重要的抗炎和抗衰老作用。本文就尿苷的代谢、尿苷的作用机制以及其对急慢性炎症疾病的作用展开讨论, 强调其作为一种内源性抗炎代谢物的作用, 并为后续尿苷相关研究提供依据和参考。