Survivin表达及临床病理因素与原发性肝癌预后的关系

目的:研究凋亡抑制因子survivin在原发性肝癌中的表达及各临床病理因素与肝癌预后的关系.方法:应用免疫组化法检测42例原发性肝癌组织survivin的表达,采用Kaplan-Meier单因素分析法分析各临床病理因素与肝癌生存时间的关系,应用Cox比例风险回归模型对生存期的影响因素进行回归分析.结果:42例肝癌组织中survivin阳性率为71.4%,单因素分析42例患者的生存时间与肝外转移、临床分期、包膜侵犯和survivin表达有关,Cox比例风险回归模型分析临床分期、肝外转移和survivin是影响预后的最危险因素之一 .结论:survivin表达,临床分期,肝外转移是影响原发性肝癌预后的独立危险因素.     

靶向survivin的siRNA诱导胰腺癌细胞凋亡的实验研究

目的 采用RNA干扰技术（siRNA）阻断survivin基因的表达,观察其抑制胰腺癌细胞增殖及诱导胰腺癌细胞凋亡的作用。方法 构建靶向survivin的siRNA质粒表达载体,采用Lipofectamine^TM2000转染胰腺癌细胞PC-2,采用半定量RT-PCR、免疫组化技术检测转染前后PC-2细胞survivin基因表达的变化;采用MTT法检测对PC-2细胞增殖的抑制作用：采用流式细胞术检测其诱导PC-2细胞凋亡的作用。结果 靶向survivin的序列特异性的siRNA可以高效地抑制PC-2细胞survivin基因表达,在mRNA水平其表达抑制率为81．25％,在蛋白质水平其表达抑制率为74．24％。转染靶向survivin的siRNA质粒表达载体可以显著抑制PC-2细胞的增殖,细胞接种24、48h后其增殖抑制率分别为28．00％和33.38％：转染后24、48h可以诱导8．46％、7．53％的细胞凋亡。结论 所构建的靶向survivin的siRNA质粒表达载体可以有效地阻断PC-2细胞survivin基因表达。阻断survivin基因表达可以显著地抑制PC-2细胞的增殖并在一定程度上诱导其凋亡,靶向survivin的siRNA在胰腺癌的基因治疗中具有一定的价值。     

彩色多普勒超声引导下肝活检在慢性肝病诊断中的应用价值

目的 ：探讨彩色多普勒超声引导下肝活检对诊断慢性肝病准确性,有效性、安全性及临床应用价值。方法：慢性肝病患者25例超声引导下行活检肝组织条病理检查。统计分析肝活检操作成功率,不同并发症情况、取材有效性及病理结果分型。结果：（1）活检一针成功23例（92.0%）,两针成功2例（8.0%）。有效率100%。本组直径18G活检枪所取肝组织条最长15.3mm,最短8.6mm,平均长度10.6mm。操作时及术后肝区疼痛10例,操作中感腹痛8例,术后感腹痛2例,自行缓解9例,注射安慰剂后缓解1例。（2）病因学诊断乙型肝炎16例,脂肪肝1例,肝癌化疗前1例,Gilbert综合征1例,药物性肝损害1例,酒精性肝病2例,自身免疫性肝病3例。（3）纤维化及炎症程度分期：除肝癌化疗前1例外,24例参照西安大会标准行纤维化及炎症程度分期,G1S0 6例,G1S1 5例,G1-2S1 1例,G2S1 4例,G2S2 1例,G3S4 3例,G2-3S1 1例,G2-3S1-2 1例,G3S1 1例,G2-3S3 1例。结论：彩色多普勒超声引导下肝活检安全有效,并发症少,具有较高的临床应用价值。     

纳米碳混悬注射液用于乳腺癌前哨淋巴结活检的临床研究

目的:探讨纳米碳混悬注射液用于乳腺癌前哨淋巴结示踪活检的临床应用。方法:自2012年9月至2014年11月,选择我院收治的经病理检查确诊为乳腺癌的患者89例,于术前30~60 min将纳米碳混悬注射液1 m L分多点注入肿块、活检腔或乳晕区周围皮下。先行前哨淋巴结活检(sentinel lymph node biopsy,SLNB),再行腋窝淋巴结清扫。将前哨淋巴结及腋窝淋巴结送病理检查。结果:89例患者中87例检出SLN,检出率为97.75%(87/89);共检出前哨淋巴结386个,平均每例为4.44个;准确率为97.70%(85/87);灵敏度为93.94%(31/33);假阴性率为6.06%(2/33)。结论:采用纳米碳混悬注射液作为淋巴结示踪剂用于乳腺癌前哨淋巴结活检具有简便、易行、可靠的优点,可用于临床实践。     

腺病毒介导的靶向survivin的siRNA上调乳腺癌MCF-7细胞雌激素受体表达

目的 探讨腺病毒介导的靶向survivin的小干扰RNA(siRNA)对乳腺癌MCF-7细胞雌激素受体(ER)表达的影响.方法 构建靶向survivin的siRNA腺病毒载体并转染乳腺癌MCF-7细胞,采用Western blot法检测MCF-7细胞转染腺病毒后survivin、ER表达的变化.结果 实验组、阴性组、空白组survivin的表达强度分别为0.09 ±0.04、0.86±0.08、0.82 ±0.17;ER的表达强度分别为1.57 ±0.09、1.16±0.10、1.23±0.01.统计学分析表明,本研究中所构建的靶向survivin的siRNA腺病毒载体可以高效地抑制survivin的表达,抑制survivin的表达可以显著上调乳腺癌MCF-7细胞ER的表达(P＜0.05).结论 在乳腺癌MCF-7细胞中,survivin与ER信号通路之间可能存在着某种相互调节机制,提示靶向survivin的siRNA在ER阳性乳腺癌的内分泌治疗中可能具有潜在的重要意义.     

前哨淋巴结活检对乳腺癌腋窝淋巴结转移状况的预测价值

目的探讨前哨淋巴结活检(SLNB)对乳腺癌腋窝淋巴结转移状况的预测价值。方法以36例体检无腋窝淋巴结转移的乳腺癌患者为研究对象，用美蓝皮下注射染色法定位前哨淋巴结(SLY)，行SLNB，以病理检查结果计算SLNB的成功率及假阴性率、假阳性率、准确性、灵敏度、特异度、阳性符合率、阴性符合率、阳性结果预测值、阴性结果预测值。结果36例患者行SLNB，成功率为97．2％，灵敏度为92．9％。特异度为100％，假阴性率为7．7％，假阳性率为O％，准确率为95．8％，阳性符合率为92．3％；阴性符合率为95．7％，阳性结果预测值为100％，阴性结果预测值为93．9％。结论美蓝皮下注射染色法行SLNB有很高的成功率，SLNB能够准确地预测乳腺癌腋窝淋巴结转移状况。     

半枝莲含药血清对肝癌H22细胞凋亡及线粒体膜电位的影响

目的：探讨中药半枝莲提取物（Scutellaria Barbata extract,ESB）含药血清对肝癌H22细胞凋亡率及线粒体膜电位的影响。方法：体外培养小鼠H22肝癌细胞,以ESB高、中、低剂量含药血清培养液作用于H22细胞,并设立空白血清及5-氟尿嘧啶（fluorouracil,5-Fu）组（阳性对照组）。应用四甲基偶氮唑盐法检测药物对细胞增殖的抑制作用;透射电镜下观察肿瘤细胞的超微结构变化;碘化丙啶标记,流式细胞术检测肿瘤细胞周期及细胞凋亡情况;采用荧光探针罗丹明123负载,激光扫描共聚焦显微镜下观察H22细胞的荧光强度,分析H22细胞线粒体膜电位的大小。结果：ESB含药血清有一定的抑制H22细胞增殖的作用,高、中剂量组96 h抑制率分别为（47.5±6.4）%和（36.3±4.5）%。透射电镜下可见部分细胞呈典型凋亡形态学改变。流式细胞仪检测结果显示,ESB中、高剂量组有明显的诱导凋亡作用,其凋亡率分别为（3.15±1.12）%和（7.83±2.25）%,与空白组相比差异有统计学意义（P〈0.01）。空白对照组、5-Fu组和ESB低、中、高剂量,H22细胞线粒体膜电位分别为（245.45±67.37）、（127.42±41.35）和（213.68±65.52）、（186.34±56.37）、（142.65±39.44）,各组线粒体膜电位与细胞凋亡率呈负相关（r=-0.826,P〈0.01）。结论：ESB含药血清可有效诱导肿瘤细胞凋亡,其机制可能与降低肿瘤细胞线粒体膜电位有关。     

国产与进口多西紫杉醇应用于乳腺癌新辅助化疗的疗效和安全性比较

目的：比较国产与进口多西紫杉醇应用于乳腺癌新辅助化疗的疗效和安全性。方法：收集2000年1月至2005年12月应用含国产多西紫杉醇（艾素）与进口多西紫杉醇（泰索帝）方案进行新辅助化疗的69例女性乳腺癌患者的临床资料,对近期疗效和不良反应进行回顾性分析。化疗方案为TAC（多西紫杉醇＋表阿霉素＋环磷酰胺）,28天为1个周期,化疗2周期后手术,国产与进口组患者分别为35和34例。结果：所有患者均完成2个周期化疗,两组均无疾病进展病例。其中国产组3例（8.6%）获得完全缓解（CR）,26例（74.3%）部分缓解（PR）,6例（17.1%）病变稳定（SD）;进口组CR4例（11.%）,PR25例（73.5%）,SD5例（14.7%）。国产与进口组总有效率分别为82.9%和85.3%,两组比较差异无显著性（P〉0.05）。两组均无不能耐受不良反应而退出治疗病例。不良反应主要有骨髓抑制、胃肠道反应、脱发、神经毒性和过敏反应等。国产与进口组粒细胞减少发生率均为100%,Ⅲ度以上发生率分别为38.6%（27/70）、54.4%（38/68）,两组相比有显著性差异（P〈0.05）。其余不良反应两组相似。结论：国产多西紫杉醇应用于乳腺癌新辅助化疗,疗效确切,不良反应容易处理,与进口多西紫杉醇相似,且价格远低于进口多西紫杉醇,值得推广。     

靶向survivin的siRNA联合三苯氧胺对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察靶向survivin的siRNA联合三苯氧胺对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响.方法：构建靶向survivin的siRNA真核表达载体,采用lipofec-tamineTM2000转染乳腺癌MCF-7细胞,采用MTT法检测靶向survivin的siRNA联合三苯氧胺对MCF-7细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测靶向survivin的siRNA联合三苯氧胺诱导MCF-7细胞凋亡的作用.结果：靶向survivin的siRNA和三苯氧胺均可抑制MCF-7细胞增殖并诱导其一定程度的凋亡;当联合应用靶向survivin的siRNA和三苯氧胺时,上述作用得到显著加强（P＜0.05）.结论：利用RNA干扰技术阻断survivin基因的表达可以显著增强MCF-7细胞对三苯氧胺的敏感性,靶向survivin的RNA干扰技术在乳腺癌的内分泌治疗中具有重要的潜在价值.     

微环境乏氧对胰腺癌PC-2细胞生长及形态的影响

目的:观察体外培养的胰腺癌PC-2细胞在化学乏氧剂CoCl2作用后形态学及生长曲线的变化,为进一步探讨乏氧对肿瘤细胞的影响寻求直观依据.方法:用CoCl2处理PC-2细胞模拟肿瘤体内乏氧模型,应用倒置显微镜、透射电镜观察细胞形态学变化,MTT法检测不同浓度、不同时间CoCl2处理后的PC-2细胞生长情况.结果:化学乏氧剂CoCl2作用后的胰腺癌PC-2细胞形态发生改变,与正常细胞相比,乏氧后的细胞体积变小、伪足少而短,易分辩个体,但并不可见脱落细胞增多或减少;电镜下可见线粒体肿胀,染色质边集,少见凋亡小体.不同浓度CoCl2对胰腺癌PC-2细胞生长曲线有不同程度的改变,对数生长期和平台期提前,对数期缩短.随着CoCl2浓度增加,曲线越趋于低平.结论:化学乏氧剂CoCl2对胰腺癌PC-2细胞具有一定的凋亡诱导作用,同时也缩短了细胞正常的生长期,细胞形态发生相应改变.