173例肝移植术后乙型肝炎病毒再感染防治经验回顾

目的 探讨原位肝移植术后乙型肝炎病毒再感染的预防。方法 回顾性分析了173例乙肝相关性肝病病人，移植前后给予抗病毒药物预防乙型肝炎病毒再感染，拉米呋啶2例，拉米呋啶＋乙肝免疫球蛋白（HBIg）166例，阿德福韦＋HBIg5例，观察临床表现、血清HBV、HBVDNA及肝活检免疫组织化学检测等指标。结果 应用拉米呋啶预防的2例病人，有1例再感染，其血清HBsAg、HBeAb、HBcAb和HBVDNA均阳性，肝活检免疫组织化学检测有HBsAg表达。用拉米呋啶＋HBIg预防的166例中，有3例再感染，血清均HBsAg、HBeAb和HBcAb阳性，肝活检免疫组织化学检测有HBsAg表达，其中1例血清HBVDNA阳性，有1例经治疗后HBsAg又转阴。用阿德福韦＋拉米呋啶＋HBIg预防的5例中，血清学和肝活检免疫组织化学检测均无HBsAg表达。结论 原位肝移植术是治疗HBV相关性终末期肝病的有效手段，拉米呋啶＋HBIg或拉米呋啶＋阿德福韦＋HBIg联合应用可以有效预防乙型肝炎病毒的再感染。     

海水浸泡伤大鼠胃黏膜和血浆中神经激肽A和降钙素基因相关肽的动态变化

目的： 观察腹腔海水浸泡伤后大鼠胃黏膜和血浆中神经激肽A（NKA）和降钙素基因相关肽（CGRP）水平的动态变化，以探讨感觉神经肽在急性胃黏膜病变中的作用。方法：32只SD大鼠随机分成正常对照组和腹腔浸泡伤组，后者又分为1 h、2 h、3 h 3组，取大鼠胃黏膜和血浆，采用酶标法和放免法测定胃黏膜和血浆中NKA和CGRP水平。结果：随着浸泡时间的延长，腹腔浸泡伤组大鼠胃黏膜NKA和CGRP水平进行性低于正常大鼠（P<0.05），而血浆NKA和CGRP水平进行性高于正常大鼠。结论：海水浸泡伤是一损伤性因素，可引起胃黏膜中NKA和CGRP水平降低、血浆中NKA和CGRP水平升高，提示NKA和CGRP等感觉神经肽在急性胃黏膜病变发生发展过程中可能有重要作用。     

原发性肝癌对化疗药物敏感性的研究

目的 研究化疗药物对原发性肝癌细胞的敏感性。方法 应用ＭＴＴ法及流式细胞仪,选择１７种化疗药物对２０例经手术切除的原发性肝癌标本进行化疗药物２性的检测。结果 对原发性肝癌细胞平均抑制率大于５０％的化疗药物为异环磷酰胺、氟脲嘧啶、ＶＭ－２６（威猛）、ＴＡＡ（泰素）、环磷酰胺及ＤＤＰ（顺铂）。结论 根据联合化疗的原则,对于原发性肝癌患者选用的化疗方案为：以氟脲嘧啶为主、配合顺铂等其他一种或二种敏感的化     

Cyclin D1和NF-κB在5-Fu诱导肝癌细胞凋亡过程中的表达

目的　探讨周期蛋白基因D1(CyclinD1)和核转录因子-κB(NF -κB)在5 氟脲嘧啶(5 - Fu)诱导肝癌细胞凋亡过程中的表达及其对细胞周期的影响。方法　体外培养人肝癌细胞株SMMC- 772 1,应用流式细胞术检测5 Fu对SMMC -772 1细胞周期和凋亡的影响;免疫印迹分析cyclinD1表达差异;用TransAM核转录因子活性检测试剂盒检测NF κB活性;细胞免疫组织化学检测NF κBp65入核情况。结果　5 Fu可诱导SMMC -772 1细胞凋亡,5 0、10 0、2 0 0 μg/ml 5 Fu分别作用2 4h后,其诱导细胞凋亡率分别为13 .2 % ,2 1.7%和3 5 .9% ,与对照组相比有显著性差异(P <0 .0 5 )。随着5- Fu浓度的增加,S期细胞比例和细胞增殖指数增加,CyclinD1蛋白的表达逐渐增强,NF -κBp65被激活并入核。结论　5 -Fu可诱导肝癌SMMC 772 1细胞凋亡;NF- κB在5 - Fu诱导肝癌细胞凋亡同时被激活;其下调基因CyclinD1过度表达可能是促进细胞增殖、对抗细胞凋亡的重要因素之一。     

小鼠肝脏持续低灌注模型的建立及其对热缺血再灌注损伤的耐受性

目的 建立一种稳定的小鼠肝脏持续低灌注模型,并在此基础上研究肝脏持续低灌注对小鼠肝脏热缺血再灌注损伤的影响.方法 选用6～8周龄C57BL/6小鼠建模,将门静脉缩窄至1 mL注射器针头直径,门静脉缩窄后3d、7d、14d和21 d行肝功能及肝脏组织病理学检测;选用稳定的模型小鼠行70％缺血再灌注手术,再灌注3h、24 h、48 h后行肝功能及肝脏组织病理学检测.对照组采用正常C57BL/6小鼠行缺血再灌注手术.结果 小鼠门静脉缩窄术后,丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)均有不同程度的升高,在7d时达到高峰[ALT:(60.8±6.2)U/L vs (25.5±2.8) U/L,P＜0.001;AST:(74.9±6.1)U/L vs (39.1±3.2) U/L,P＜0.001),同时H-E染色显示7d时肝细胞损伤最重,并且有较多炎细胞浸润;在21 d时,ALT基本恢复正常水平(P＞0.05),而AST仍高于正常水平(P=0.03).低灌注处理7d的小鼠进行缺血再灌注手术后,肝酶和组织病理学检查显示肝细胞损伤较对照组显著加重,肝酶在再灌注3h达到高峰[ALT:(8 217.0±1 111.8) U/L vs(5 597.4±1 015.3) U/L,P=0.004;AST:(8 548.2±1 155.4)U/L vs(5 765.4±956.9)U/L,P=0.003];再灌注48 h时,对照组小鼠ALT和AST均恢复正常,而经过低灌注处理的小鼠肝酶仍高于对照组[ALT:(608.8±442.9)U/L vs (47.4±20.1)U/L,P=0.008;AST:(861.8±442.8)U/L vs (70.8±68.3)U/L,P=0.008).结论 成功建立了稳定的小鼠肝脏持续低灌注模型,经持续低灌注处理后的肝脏对热缺血再灌注损伤的耐受能力显著降低,这在一定程度上能够模拟临床上心死亡器官捐献供肝的状况.     

肝移植治疗终末期自身免疫性肝病的预后分析

目的探讨肝移植治疗终末期自身免疫性肝病(AILD)的预后情况。方法回顾性分析1996年5月至2013年4月在第二军医大学附属长征医院实施原位肝移植术的48例终末期AILD受者的临床资料。计算受者的术后累积生存率,分析死亡病例的死因,了解术后排斥反应、病毒性肝炎新发感染及AILD复发情况。结果 48例AILD受者中,存活38例,AILD受者术后5年累积生存率为76%。10例死亡受者的死亡原因包括多器官功能衰竭、移植肝衰竭、脓毒症、肺部感染、出血、肝动脉栓塞、肾衰竭。48例AILD受者中,肝移植术后发生急性排斥反应者9例(19%),有3例分别在术后1~2年内新发乙型肝炎病毒感染,有2例原发性胆汁性肝硬化受者于术后2年出现原发病复发,经积极治疗均长期生存。结论终末期AILD肝移植受者多数可获得长期生存,应重视肝移植术后早期免疫抑制方案的制定,预防感染及排斥反应和术后新发病毒性肝炎,及时发现原发病复发等问题。     

Heparanase antisense oligodeoxynucleotide inhibits angiogenesis and metastasis of human mammary carcinoma cell xenografts in nude mice

Objective： To evaluate the inhibitory effect of heparanase antisense oligodeoxynucleotide （AS-ODN） on the angiogenesis and metastasis of human mammary carcinoma cell xenografts in nude mice. Methods： The AS-ODN complementary to the start codon region of heparanase mRNA and its control, scrambled nonsense oligodeoxynucleotide （NS-ODN） were designed and synthesized. A subcutaneous growth model and an acute hematogenous metastasis model of human mammary carcinoma were established in nude mice and were treated with ODNs. The heparanase expression in tumor was evaluated by RT-PCR and Western blot. The microvessel density （MVD） was measured by immunohistochemistry for factor VS. The tumor volume was calculated and lung metastatic nodules were counted. Results ： The heparanase expression, MVD, tumor volume and lung metastatic nodules in AS-ODN treated group were significantly decreased compared with that in NS-ODN treated group and that in PBS group （P〈0.01）. Conclusion ： Heparanase AS-ODN has significant inhibitory effect on the angiogenesis and metastasis of human mammary carcinoma cell xenografts in nude mice.     

自制长征-1号多器官保存液的动物实验和部分临床应用研究

目的：研制我国自制的多器官保存液,以满足日益发展的国内器官移植手术的需要。方法;在全面分析国外最先进的多器官保存液ＵＷ液配方的基础上,研制成长征－１号多器官保存液。改进有：（１）用低分子右旋糖酐－４０替代羟乙基淀粉’（２）用蔗糖替代木棉粮;（３）去掉ＵＷ液中添加成分;（４）添加钙离子拮抗剂维拉帕米;（５）使ＰＨ值进一步偏碱性。