肝硬化腹水大鼠水通道蛋白的表达

目的 :探讨肝硬化腹水大鼠模型中水通道蛋白的变化及其作用方法采用改良的CCl4肝硬化腹水大鼠模型 ,通过免疫组织化学及半定量RT -PCR ,检测肾脏 (皮质和髓质 )中水通道蛋白AQP1和AQP2的表达以及脏层腹膜中AQP1的表达 ,并与正常对照组大鼠相比较。结果 :(1)免疫组织化学显示 ,AQP1主要表达在肾脏近曲小管上皮细胞的刷状缘和髓襻降支细段上皮细胞的顶质膜 ,AQP2主要表达在肾脏的远曲小管与集合管 ,肝硬化腹水组与正常组比较 ,皮质、外髓及内髓的AQP1和AQP2的表达均显著增加 (P <0 .0 1)。在两组中 ,AQP1均仅表达在脏层腹膜中若干小血管壁中 ,两组之间无显著差异 (p >0 .0 5 )。 (2 )半定量RT -PCR显示 ,肝硬化腹水组与正常组相比 ,在肾皮质和髓质中 ,AQP1mRNA、AQP2mRNA表达升高 (P <0 .0 1)。AQP1mRNA在两组的脏层腹膜中的表达无显著差异 (p >0 .0 5 )。结论肝硬化伴腹水大鼠模型中肾脏AQP1及AQP2的表达升高 ,与肝硬化腹水情况下水的重吸收增加有关。     

内毒素对肝硬化患者可溶性CD14的影响

目的　研究肝硬化时外周血单个核细胞 (PBMC)在内毒素刺激后可溶性CD14 (sCD14 )的变化。方法　选择肝炎后肝硬化患者 5 9例 ,分为伴有内毒素血症 (IETM ,A组 ) 2 9例和不伴有IETM (B组 ) 30例 ,19名健康人作为对照组。采用梯度离心法得到PBMC ,按每 2× 10 6个细胞给予内毒素 1ng的比例刺激 ,于 0、3、6h抽取培养液 ,分别检测sCD14和肿瘤坏死因子 (TNF) α。结果　肝功能分级 :Child PughC级者血浆sCD14水平为 (4 .79± 1.91) μg/ml,明显高于Child pughA级者的 (2 .91± 0 .14 ) μg/ml和Child PughB级者的 (3.6 8± 0 .91) μg/ml。A组血浆sCD14水平为 (4 .85± 1.11) μg/ml,其PBMC在内毒素刺激 6h后所释放的sCD14及TNF α的浓度分别为 (10 1.5 4± 7.6 3)和 (4 33.2 5± 12 3.4 5 )ng/ml;而B组分别为 (3.6 8± 0 .91)、(73.84± 6 .94 )和 (2 10 .18± 81.0 1)ng/ml;对照组分别为 (2 .31± 0 .2 1)、(70 .82± 5 .16 )和 (12 2 .2 1± 0 .34)ng/ml。在培养后第3、6小时 ,A组sCD14、TNF α水平与对照组相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　肝硬化伴IETM的PBMC对内毒素的敏感性增加 ,提示PBMC处于预致敏状态     

一氧化碳与肝硬化大鼠血脑屏障通透性的关系

目的 研究肝硬化大鼠血浆一氧化碳（ＣＯ）水平与血脑屏障通透性改变之间的关系。方法 将ＳＤ大鼠分为两组，ＣＣｌ４肝硬化模型组（ｎ＝１０）及正常对照组（ｎ＝１０），用联二亚硫酸盐还原法测定血浆ＣＯ的含量，用伊文思蓝法测定血脑屏障通透性，生理多导仪测定血压、心率等。结果 与对照组相比，肝硬化组血浆ＣＯ水平明显升高［（１８．３７±１．７９）μｍｏｌ／Ｌ ｖｓ （１０．２７±１．２１）μｍｏｌ／Ｌ，ｔ＝７．５，Ｐ＜０．０１］而平均动脉压（ｋＰａ）降低（１８．９３±０．７１　ｖｓ　１５．９２±０．７４），ｔ＝５．８３，Ｐ＜０．０１；血脑屏障通透性增加，脑内伊文思蓝含量肝硬化组明显高于对照组（１８．５２±１．３９ ｖｓ１５．０８±１．０６）ｎｇ／ｍｇ，ｔ＝３．９４，Ｐ＜０．０１。在肝硬化组血浆 ＣＯ水平与脑内伊文思蓝含量成正相关（ｒ＝０．７２，Ｐ ＜ ０．０１）而与平均动脉压成负相关（ｒ＝－０．６７，Ｐ＜０．０５）。结论 ＣＯ作为一种信使分子，不仅参与肝硬化大鼠低血压的发生，还与血脑屏障通透性增加有关，可能是肝硬化易诱发肝性脑病的重要介质之一。     

反义转化生长因子βⅡ型受体表达质粒对实验性肝纤维化的影响

目的 观察反义转化生长因子βⅡ型受作(TGF βRⅡ)表达质粒对实验性肝纤维化的影响。方法 运用重组DNA技术中构建反义TGF βRⅡ真核细胞表达质粒,采用猪血清腹腔注射制备免疫性大鼠肝纤维化模型,实验动物分为肝纤维化模型组、反义TGF βRⅡ治疗组、pCDNA3对照组及正常对照组。反义TGF βRⅡ质粒和pCDNA3空质粒与糖化多聚赖氨酸偶联后经尾静脉分别导入大鼠体内,通过northern blot、RT-PCR、Western blot检测外源导入质粒在肝组织中的表达,检测血清转化生长因子β1(TGFβ1)、肝组织羟脯氨酸测定,Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组织化学与Van Gieson染色观察反义TGF βRⅡ质粒对大鼠肝纤维化的影响。 结果 反义TGF βRⅡ表达质粒可在肝组织中获得确切表达,其表达可使反义治疗组血清TGF β1含量下降,反义TGF βRⅡ治疗组为(23.16 ± 3.13)ng/ml,模型组为(32.96±3.79)ng/ml,F=36.73,P<0.01。肝组织羟脯氦酸含量下降,治疗组为(0.17±0.01)mg/g,模型组为(0.30±0.03)mg/g,F=15.48,P<0.01。减少了肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的沉积,治疗组Ⅰ型胶原为650.26±51.51,Ⅲ型胶原为661.5 8±55.28,模型组Ⅰ型胶原为1209.44±16.60,Ⅲ型胶原为1175.14±121.44,F值分圳为69.87、70.46,P<0.01。并促进反义治疗组肝脏病理形态一定程度的改善。     

口服乳果糖对肝脏病患者血清内毒素和细胞因子的影响

目的：观察乳果糖治疗对急、慢性肝病患者血清内毒素、细胞因子水平及肝功能指标的影响。方法：在８９例急、慢 性肝炎、肝硬化患者中,４９例口服乳果糖２０日,检测两次血清内毒素、细胞因子、胆红素及转氨酶。结果：治疗前,３组 患者血清内毒素水平有差异,肝硬化患者最高（６９．３ｐｇ／ｍｌ± ２３．６ｐｇ／ｍｌ）,慢性肝炎患者最低 （２．４ｐｇ／ｍｌ± ７．９ｐｇ／ｍｌ）,内毒素与ＴＮＦ－α（ｒ＝０．５５５,Ｐ＜０．０１）、ＩＬ－６（ｒ＝０．５３１,Ｐ＜０．０１）、ＩＬ－８（ｒ＝０．４４０,Ｐ＜０．０５）、Ｇ－ＣＳＦ（ｒ＝０.４４ ０,Ｐ＜０．０５）呈正相关,口服乳果糖组血清内毒素,ＴＮＦ－α、ＩＬ－６、ＩＬ－８和Ｇ－ＣＳＦ水平下降及肝功能改善较未服药者明 显。结论：急、慢性肝病时内毒素可能是ＴＮＦ－α、ＩＬ－６、ＩＬ－８和Ｇ－ＣＳＦ的诱导物,其共同参与肝脏炎症反应。口服乳果糖 可能通过降低血清内毒素、细胞因子水平而对肝病患者有利。     

酶电极探针

本文就酶电极探针作了综述,介绍了40种以上不同底物和25种不同酶的探针,还讨论了酶电极的一些基本性质:它们的响应特性、灵敏度、寿命时间和专一性。这些电极在医学、工业、生物学和化学等领域中将会得到广泛应用。前言酶电极探针是由一种具有高度专一性、高灵敏度的催化试剂的酶和一种离子选择性电极探针构成的。通常,可以不用预处理或分离反应混合物,直接测量溶液中的有机物或无机物(浓度在10~(-1)-10~(-5)M)。其原理十分简单:选用一种与待测定物质完全专一或呈高度选择反应的酶,这种酶以可溶性     

前列腺素E1对稀盐酸吸入性急性肺损伤的保护作用

目的 研究前列腺素E1（PGE1）能否阻止酸吸入后急性肺损伤（ALI）的发展。方法 20只新西兰兔在稀HC1滴入后随机分成两组：（1）损伤组在酸滴入后维持机械通气,未做其他治疗;（2）治疗组在酸滴入后即刻缓慢静注PGE1并维持。在基础状态及酸滴入后记录血气,动物处死后测定右肺的湿干比（W/D）值及测定右肺支气管肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白（TP）及TNF-a、IL-1β、和IL-8的水平,并作肺组织形态学观察。结果 治疗组在酸滴入后PaO2显著高于损伤组;右肺W/D、TP及TNF-a、IL-1β和IL-8的水平显著低于损伤组。损伤组右肺呈弥漫性炎性损伤,而治疗组则呈局灶性,且其病理损伤程度较损伤组明显减轻。结论 ①酸吸入后即刻应用PGE1可减轻ALI的范围和严重程度;②PGE1可通过调节肺内炎性细胞释放TNF-a、IL-1β和IL-8而阻止ALI的发展。     

Effects of lactulose on intestinal endotoxin and bacterial translocation in cirrhotic rats

Objective To investigate the effects of lactulose on intestinal bacterial overgrowth (IBO), bacterial translocation (BT), intestinal transit and permeability in cirrhotic rats.Methods BT in all animals was assessed by bacterial culture of mesenteric lymph node ( MLN), liver and spleen, and IBO was assessed by a jejunal bacterial count of the specific organism. Intestinal permeability was determined by the 24-hour urinary ^99mTc-diethylenetriamine pentaacetatic acid (^99mTc-DTPA) excretion, and intestinal transit was determined by measuring the distribution of ^51Cr in the intestine.Results BT and IBO were found in 48% and 80% of the cirrhotic rats, respectively, while not in the control rats. Cirrhotic rats with IBO had significantly higher levels of intestinal endotoxin higher rates of bacterial translocation, shorter intestinal transit time and higher intestinal permeability than those without IBO. It was also found that BT were closely associated with IBO and injury of the intestinal barrier. Compared with the placebo group, lactulose-treated rats had lower rates of BT and IBO,which were closely associated with increased intestinal transit and improved intestinal permeability by lactulose.Conclusions Our study indicate that endotoxin and bacterial translocation in cirrhotic rats may attribute to IBO and increased intestinal permeability. Lactulose that accelerates intestinal transit and improves intestinal permeability might be helpful in preventing intestinal bacterial and endotoxin translocation.     

反义金属蛋白酶组织抑制因子-1表达质粒对实验性肝纤维化的影响

目的　观察反义金属蛋白酶组织抑制因子 1(TIMP 1)表达质粒对实验性肝纤维化的影响。方法　运用重组DNA技术构建反义TIMP 1真核细胞表达质粒 ,经与糖化多聚赖氨酸偶联后 ,尾静脉注射将其导入猪血清诱导的免疫性大鼠肝纤维化模型体内 ;通过Northern印迹法、RT PCR、Western印迹法检测外源导入基因的表达 ,并通过肝组织间质胶原酶活性和羟脯氨酸测定 ,以及肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组织化学与VanGieson染色观察反义TIMP 1质粒对大鼠肝纤维化的影响。结果　外源导入基因可在肝组织中获得确切表达 ,其表达可增加间质胶原酶的活性 (P <0 .0 1) ,减少羟脯氨酸含量 (P <0 .0 1) ,促进Ⅰ、Ⅲ型胶原的降解 (P <0 .0 1) ,并促进肝脏病理形态一定程度的改善 (P <0 .0 1)。结论　反义TIMP 1表达质粒对肝纤维化有较好的改善作用。     

西沙比利对肝硬化大鼠小肠细菌及内毒素转位的影响

目的：研究西沙比利对肝硬化大鼠小肠细菌过度生长(IBO)，细菌及内毒素转位，小肠转运时间及小肠通透性的作用。方法：正常对照组大鼠25只，肝硬化对照组大鼠25只，肝硬化治疗组20只(用等渗盐水)，另20只肝硬化大鼠用西沙比利治疗，动物均测定各种参数如细菌和内毒素转位，小肠细菌过度生长，小肠转运时间及通透性。结果：48％肝硬化大鼠发生细菌转位，与无IBO肝硬化大鼠比较，IBO肝硬化大鼠的内毒素和细菌转位发生率高，肠转远时间延长，小肠通透性增高。BT的细菌与IBO主菌群一致。与对照组比较，西沙比利处理的肝硬化大鼠肠细菌和内毒素转位及IBO发生率降低，这与肠转运时间增快及通透性降低密切相关。结论：肝硬化大鼠内毒素和细菌转位可能是由于IBO和肠通透性增加的结果，而IBO的发生可能是由于肠转运时间延长所致。西沙比利可加速小肠转运时间，改善小肠通透性，这有助于防治小肠细菌和内毒素转位。