应用PCR技术快速鉴定结核分枝杆菌复合群菌种

目的 建立快速鉴定结核分枝杆菌复合群菌种的方法.方法 将7对结核分枝杆菌复合群各菌种特异性引物(Mtbc1-7)进行聚合酶链反应(PCR)扩增,通过对扩增产物的不同系带型进行分析,对已知标准株和96株临床分离株进行菌种鉴定.结果 用3株结核分枝杆菌复合群(MTBC)标准株,9株非分枝杆菌标准株以及27株非结核分枝杆菌的分枝杆菌(MOTT)对7对结核分枝杆菌复合群各菌种特异性引物进行特异性鉴定,结果证明引物Mtbc1能鉴定出分枝杆菌和非分枝杆菌;引物Mtbc2能鉴定出MOTT和MTBC;引物Mtbc3能鉴定出田鼠分枝杆菌;引物Mtbc4能从MTBC中识别出牛分枝杆菌和卡介苗;引物Mtbc5能鉴定出非洲分枝杆菌Ⅱ型和结核分枝杆菌;引物Mtbc6和引物Mtbc4结合能鉴定出卡介苗;引物Mtbc7和引物Mtbc5联合能鉴定出canettii分枝杆菌.96株临床分离株经7对引物扩增,扩增结果显示MOTT 20株,牛分枝杆菌1株,卡介苗1株,canettii分枝杆菌3株,田鼠分枝杆菌3株,非洲分枝杆菌Ⅰ型3株,caprae分枝杆菌1株,结核分枝杆菌或非洲分枝杆菌Ⅱ型64株.结论 应用PCR技术鉴定结核分枝杆菌复合群菌种结果准确可靠,且具有简便和快速等优点,有较大的分子流行病学应用价值.     

利奈唑胺治疗耐多药肺结核的临床观察

目的观察利奈唑胺（LZD）治疗耐多药结核病（MDR-TB）的临床疗效和安全性。方法采用含LZD为主的化疗方案治疗12例MDR-TB住院患者。LZD用法：治疗开始时应用600 mg,静脉滴注或口服,每天1次,强化治疗6个月后,可用600mg,每天1次;或300mg口服,每天1次,疗程至少9个月。结果 12例患者应用LZD疗程1～12个月;治疗9～12个月3例完成疗程并治愈,最短为1个月;12例患者除1例症状没有改善,其余11例临床症状均有不同程度改善,平均改善时间18天;除2例治疗失败病例外,其余10例空洞缩小时间平均为1.5个月;痰菌涂片阴转时间最短7天1例,最长120天1例,2例仍阳性;痰培养阴转时间14天1例,21天3例,60天3例,3例仍阳性;1例治疗1个月因严重四肢麻木而停药;1例治疗1个月出现严重呕吐、失眠、心悸,后将LZD改为300mg,每天1次,1个月后症状无好转而停药;1例治疗9个月出现视物模糊停药,随访符合治愈标准;1例治疗10个月出现视物模糊,减为300mg每天1次,治疗至12个月治愈停药。结论 LZD600mg,每天1次的剂量可以明显改善MDR-TB患者临床症状,缩短痰菌阴转时间和空洞闭合时间,药物不良反应小,疗程至少9个月。     

抗结核药物的合理应用(下)

抗结核治疗方案1.初治结核病治疗方案以异烟肼(H)、利福平(R)或利福喷汀(L)和吡嗪酰胺(Z)为核心,加乙胺丁醇(E)或链霉素(S),疗程6个月,这一方案称为短程化疗方案(2SHRE/4HR或2SHRE/4H3R3E3)。对于治疗满6个月,病灶仍未完全吸收的患者,疗程可适当延长至9~12个月,耐药者可达24个月以上。     

结核分枝杆菌km基因的突变情况分析

目的探讨结核分枝杆菌km基因突变的情况。方法通过传统梯度药敏试验和聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析248株分枝杆菌临床分离株耐药情况和km基因的变化。结果药敏试验耐药率为32.7%(81/248),248株分枝杆菌临床分离株的16S rDNA SSCP电泳图谱均与结核分枝杆菌标准株相同。81株耐卡那霉素分离株中,24株(29.6%)km基因SSCP泳动异常。结论其部分耐药原因可能是由于T.M耐KM药物的km基因突变所致。     

抗结核药物超声导入治疗浅表淋巴结结核的临床观察

目的观察抗结核药物超声导入治疗浅表淋巴结结核的临床疗效和安全性。方法将72例浅表淋巴结结核患者随机分为治疗组和对照组,每组各36例,两组均以常规抗结核化疗方案为基础,治疗组加用超声电导仪经皮导入异烟肼注射液、硫酸阿米卡星注射液,对照组加用局部注射异烟肼注射液、硫酸阿米卡星注射液,追踪观察两组治疗结果和并发症。以患者治疗后的主要症状、体征缓解情况,局部超声检查等为疗效判断依据,评价治疗结果。结果经2个疗程治疗后,治疗组好转率明显高于对照组（P〈0.05）,所有病例未见严重不良反应及并发症。结论抗结核药物超声导入治疗浅表淋巴结结核能提高浅表淋巴结结核的好转率,是一种无严重并发症和不良反应而安全有效的方法。     

氩等离子体凝固和冷冻序贯治疗支气管结核

目的 探讨经支气管镜行氩等离子体凝固和冷冻序贯治疗支气管结核的临床疗效和安全性。 方法 将经痰或支气管肺泡灌洗液抗酸染色涂片、培养,影像学和支气管镜检查及病理结果确诊36例支气管结核患者纳入观察范围,常规抗结核化疗基础上,在支气管镜下行氩等离子体凝固和冷冻序贯治疗,并追踪观察治疗结果。以患者治疗后的主要症状、体征缓解情况,胸部X线或CT扫描,支气管镜复查观察病灶大小、气道黏膜、管腔通畅情况为疗效判断依据,评价治疗结果,同时观察不良反应及并发症。 结果 36例支气管结核患者行氩等离子体凝固序贯冷冻治疗,平均治疗(4±2)次/例,完全有效24例(66.7%),部分有效10例(27.8%),轻度有效2例(5.6%)。所有病例未见严重不良反应及并发症。 结论 氩等离子体凝固和冷冻序贯治疗支气管结核不但可以快速使气道恢复通畅,缓解病人临床症状,还可有效地控制肉芽增生,使治疗后的局部组织创面光滑。氩等离子体凝固和冷冻序贯治疗支气管结核是一种无明显并发症和不良反应,安全有效的方法。     

耐药结核病患者结核病防治核心信息知晓率调查分析

目的 调查耐药结核病患者结核病防治核心信息知晓情况,为有效开展耐药结核病防治健康教育工作提供依据。方法 对2013年3月至2014年1月从全国20家医院和结核病防治机构纳入的293例耐药结核病患者进行结核病防治核心信息知晓情况问卷调查,调查内容包括患者的基本信息、结核病防治核心信息知晓情况和患者临床报告情况;发出问卷293份,有效问卷293份,有效率为100.0%。其中223例(76.1%)被调查者自报了解结核病相关核心信息,对该群患者进一步进行结核病防治核心信息知晓情况调查。对调查对象的一般情况、结核病防治核心信息知晓情况进行统计分析,并进一步采用logistic回归分析对影响知晓率的因素进行分析。结果 76.1% (223/293)的耐药结核病患者了解结核病相关知识,有23.9% (70/293)的患者尚不了解。了解者对11条结核病防治核心信息总知晓率为70.1% (1720/2453)。结核病防治核心信息知晓情况单因素分析结果显示,不饮酒或偶尔饮酒(70.3%,1648/2343)、有结核病病史(72.8%,905/1243)、结核病治疗次数为1次及以上(72.6%,878/1210)、结核病病程1年及以上(72.6%,895/1232)的耐药结核病患者,相对于经常饮酒(54.5%,60/110)、无结核病病史(66.4%,803/1210)、结核病治疗次数为0次(66.8%,830/1243)、结核病病程1年以下(66.6%,813/1221)的耐药结核病患者知晓率较高,差异均有统计学意义(χ ²值分别为12.61、12.04、9.88、10.68,P值分别为0.002、<0.001、0.007、0.005)。多因素非条件logistic回归分析结果显示,不饮酒的患者结核病防治核心信息知晓率是经常饮酒患者的1.97倍(95%CI:1.33~2.92,P=0.001),有结核病病史的患者结核病防治核心信息知晓率是无结核病病史患者的1.36倍(95%CI:1.14~1.61,P=0.001)。结论 耐药结核病患者结核病防治核心信息总知晓率较低,应针对经常饮酒、无结核病病史、无结核病治疗史、结核病病程1年以下等耐药结核病患者重点开展健康促进及宣传教育工作。     

结核分枝杆菌重组MPT64蛋白对豚鼠淋巴细胞增殖反应的影响

结核分枝杆菌在生长过程中分泌许多蛋白到细胞外，它们在结核病人的免疫反应中起重要作用。结核分枝杆菌MPT64属结核分枝杆菌分泌蛋白，国内外研究表明了天然和重组的MPT64蛋白能引起结核分枝杆菌致敏豚鼠产生强烈的迟发型超敏反应，是引起人体对结核分枝杆菌保护性免     

结核分枝杆菌重组Ag85A蛋白抗原诱发豚鼠迟发型超敏反应的研究

目的 :结核分枝杆菌重组Ag85A抗原诱发豚鼠迟发型超敏 (DTH)反应。Ag85A剂量、观察时间对DTH的影响。方法 :常规皮肤实验法 :灭活H37Rv全菌体致敏豚鼠 ,皮肤试验以生理盐水为阴性对照 ,5IUPPD标准品为阳性对照 ,0 .1、0 .2、0 .4、0 .6、0 .8及 1.0 μg重组抗原分别于背部皮内注射 ,注射后 2 4、4 8及 72h分别测量红肿或硬结反应横、纵直径 (mm) ,取两者的平均值。皮肤试验轮圈法 :生理盐水、5IUPPD及 0 .4、0 .6、0 .8、1.0 μgAg85A抗原 ,以轮圈法注射于同一只豚鼠背部一侧 ,每批 6只 ,共 3批。于注射后 2 4、4 8、72h分别测量红肿或硬结反应横、纵直径 (mm) ,取两者的平均值。结果 :常规皮肤试验 0 .1、0 .2 μg重组Ag85A抗原诱发DTH的平均直径与PPD相比有显著差异 (P <0 .0 5 ) ,而 0 .4、0 .6、0 .8、1.0重组Ag85A抗原诱发豚鼠DTH的平均直径与PPD相比 ,无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,2 4h平均直径显著高于 4 8h平均直径 (P <0 .0 5 ) ,2 4h测量效果较好。轮圈法皮肤试验排除个体差异后结果与常规皮肤试验结果一致。结论 :从我们的实验结果来看重组Ag85A抗原诱发豚鼠DTH反应可以代替PPD